中科院遗传所考博生化2003-13

32003年一、简要解释下列名词（每词5分，共30分）1、寡糖与多糖2、端粒酶3、酮体4、生糖氨基酸与生酮氨基酸5、终止子和终止因子6、分子伴侣（molecularchaperone）二、以下问答题任选7题回答（每题10分，共70分）：1、简述关于生物膜运输的分子机制的几种主要假设以及他们间的相互关系。2、蛋白质磷酸化和去磷酸化的生物学意义是什么？3、请解释酶促反应的前馈和反馈（feedforward和feedback）及其意义。4、什么机制保证了DNA复制的准确性？5、神经和肌肉等细胞活动的直接供能者是ATP。然而，ATP在细胞中含量很低，在哺乳动物肌肉中仅3-8mmol/kg。问：是否存在其它的贮能物质，又是怎样“运作”的呢?6、为什么C4植物即使在大气CO2浓度很低时其光合效率仍很高？7、逆转座子广泛存在于真核生物基因组中，简述它的生物学意义并说明原因。8、DNA重组中同源重组是最基本的重组方式，它的过程是什么？有什么意义？2004年选答题：请在下列七题中任选五题，总分为100分。若多答，按其中得分最低的五题记入总分。1、分离纯化蛋白质是根据蛋白质的哪些性质进行的？举例说明3种层析的操作（解释溶液的盐离子浓度、PH值等变化）及其原理。(20分)2、试举一例说明激素介导的信号转导的生理意义和作用机制。(20分)3、简述两类真核细胞蛋白质降解的机制以及它们的生物学意义。(20分)4、基因HOR的转录受激素X的正调控。试设计实验分析鉴定其顺式作用元件（cis-elements）、反式因子(trans-factors)及其调控模式。(20分)5、在应用重组DNA技术表达某些蛋白时，经常在表达的蛋白末端加上一段氨基酸序列作为标签(tag)。说明标签序列在生物学研究中的应用。(20分)6、举2－3例说明组蛋白翻译后修饰的机制及其生物学意义。(20分)7、简述miRNA（microRNA）和siRNA的结构和功能。2005年1.在研究蛋白与蛋白间相互作用时，酵母双杂交和免疫共沉淀是较常用的方法。请简述这两种方法的原理。（15分）2．说明产生自由基的常见途径，并写出两个抗氧化保护酶。（10分）3．SDS(SodiumDodecylSulfate)是生化中常用试剂，请说明它在聚丙烯凝胶电泳测定蛋白质分子量中的作用以及它在碱裂解法提取pUC18质粒DNA中的作用。（10分）4．请设计实验，纯化在大肠杆菌中表达的TaqDNApolymerase(TaqDNA聚合酶)并鉴定其纯度和生物学活性。（20分）5．现在，在药店购买抗生素时，一般要求出示医生处方，以避免抗生素的滥用。请说明细菌产生对抗生素耐药性的生物化学机制。（15分）6．随着石油能源的减少，可再生能源的利用越来越重要，利用发酵工程产生的乙醇是一种可能的石油替代产品。请说明酵母在无氧条件下，将丙酮酸转化为乙醇的生化反应过程（包括中间产物3和所需要的酶和辅酶）。（15分）7．在高等生物蛋白组学研究中发现，逆境条件下某蛋白A含量远远高于它在正常条件下的含量，但是在mRNA水平上检测表明在逆境条件和正常条件下此基因的表达水平基本一致。请根据你所学的知识说明其可能的表达调控机制。（15分）2006年1、试举5例说明绿色荧光蛋白（Greenfluorescentprotein,GFP）在生物化学研究中的应用。（15）2、请说明真核生物中逆转座子(retrotransposon)的结构特征和生物学意义。（15）3、某一蛋白样品在SDS-PAGE上经考马斯亮蓝染色呈现单一的条带。是否可以认为此蛋白样品只包含一种蛋白？如何进一步鉴定这个蛋白的纯度。（15）4、试简述免疫共沉淀（immunoprecipitation）的原理及应用。（10）5、转基因食品(GMfood)正逐渐地被摆上餐桌，请根据你的生化知识谈一谈你对转基因食品安全性的认识。（10）6、请详细说明真核生物基因表达在不同水平上的调节机制。（25）7、中国科学家2005年在生命科学研究领域获得了大丰收，在Cell，Science和Nature上发表了多篇原创性文章(通讯地址为国内)。请说出其中两篇的主要内容和主要作者或主要作者单位。（10）2007年一、名词解释（每题5分，共25分）1、Alternativesplicing2、Nonsensemediateddecay3、RNAediting4、microRNA(miRNA)5、smallinterferingRNA(siRNA)二、简述真核生物中分泌型蛋白的转运途径及主要的生理功能。(15分)三、请说明真核生物中转座子的两大类型、各自的转座方式及生物学意义。(15分)四、简述Co-Immunoprecipitation(免疫共沉淀)及Yeast-two-hybrid(酵母双杂交)实验的原理及各自的优缺点。(15分)五、用大肠杆菌(E.coli)表达带有GST标签的X蛋白，通过免疫家兔获得针对该融合蛋白的多克隆抗体血清，请你设计实验纯化X蛋白特异性抗体(与GST无免疫交叉反应)。(10分)六、你的课题涉及到研究某个蛋白的生物学功能，在你开始具体实验之前，利用网络资源，你需要获得该蛋白的哪些相关信息？通过这些信息，可预测该蛋白的结构与功能。(20分)2009年1.某研究生得转基因植物，并得到了该转基因。1.1证明转基因至基因组？1.2证明该基因转录成mRNA?31.3证明该基因表达成蛋白质2.三种蛋白质之间相互作用的方法。3.在细胞受到X-ray伤害是，P21基因相应P53蛋白3.1P21基因与P53结合的最小启动子？3.2为找到P21基因与P53结合区，证明体外能结合？3.3在细胞内证明P53能与P21启动子结合？4.在细胞发生凋亡时，凋亡抑制因子AAP1下调。4.1实验证明AAP1是否转录下降？4.2实验证明AAP1稳定性下降？4.3蛋白水平是否下调？若是，写出降解方法。5.某研究生得一cDNA，想研究其开放读码框架，问有几种读码框架？6.激素加可刺激拟南芥生长，现有一研究生用诱变剂基因筛选的方法得到突变株x，用该激素处理不敏感，呈矮株。6.1有哪几种方法可克隆得到该基因？6.2如何验证已得到正确的基因？6.3X若编码转录因子，则说明为何突变为显性？7.果蝇基因x编码蛋白X，蛋白X为一种重要受体家族，有研究生的缺失突变x纯合体，欲研究x在发育中的作用，但果蝇发育正常，表型正常，育性正常，试述x突变体表型、育性正常果蝇的原因，并证明其理由。8.通过药物诱变得到a序列，通过T载体插入得到b和c序列。8.1证明a序列和b序列是同一序列，而c序列是另外的序列？8.2系统研究受a基因编码的A蛋白正调控的X蛋白的方法2010年1、谈谈你对缺陷血红蛋白有关疾病的致病分子机制的认识。（15分）2、谈谈你对蛋白质变性的认识？为什么说十二烷基磺酸钠（SDS）是蛋白质的变形剂？（15分）3、论述糖脂代谢途径的相互关系。（15分）4、真核生物的基因组及基因比原核生物复杂，体现在哪几方面？（20分）5、逆转座子的类型和意义。（15分）6、随着人类基因组计划的完成，单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphism,SNP）的筛选及检测成为核酸研究的焦点之一。请阐述分析已知SNP和未知SNP的检测方法。（20分)2011年1、反刍动物的蛋白质代谢。*2、蛋白质的一级结构及其在结构层次中的作用。3、酮体的生成？它与糖代谢的关系。4、羊毛衫热水洗涤后容易皱缩，而蚕丝蛋白则没有这种现象，为什么？*5、真核生物与原核生物DNA复制的不同之处？DNA复制具备什么条件？6、当溶液的PH为丙氨酸等电点时，它以什么形式存在？7、操纵子与操纵基因的概念？它们在基因表达中的作用？8、核糖体的功能？真核与原核生物核糖体的不同？9、氨基酸层析的分离依据于氨基酸的那些特性？离子交换层析中选择洗脱液应该那些因素？32012年1、名词解释（考查基础知识）2、尿素使蛋白变性的机制3、列举两个实验证明protein-protein相互作用4、列举两个实验证明protein-DNA相互作用5、分析题：考查制备分离纯化抗体的实验设计。还有几道题目比较简单，不是特别难。2013年一、名词解释（5’X6）1、泛素化2、半保留复制3、冈崎片段4、Klenow和DNA聚合酶I5、同工酶和异构酶6、tRNA二、列举4种蛋白质翻译后修饰（4’三、利用等电点分离纯化蛋白的原理（4’四、酵母单杂和酵母双杂的原理和应用（6’五、乳化作用？去污剂作用原理？（6’六、质子泵的作用原理（6’七、用G蛋白偶联受体或生长素为例说明激素信号转导的生化机制八、某研究生研究一蛋白，此蛋白定位在膜上，设计实验证明这个蛋白是膜周蛋白还是跨膜蛋白（8’九、维持蛋白结构的四种弱化学键，在蛋白的四种结构中有那种弱化学键（8十、糖原、淀粉、纤维素的异同（8十一、双向电泳（10’（1）电泳图中ABC三种蛋白的分子量（2）电泳图中三种蛋白的等电点（3）某点中含有至少几种蛋白（4）想知道某点是什么蛋白可以用什么实验技术