中药化学-f甾体类化合物-1.

第九章甾体类化合物含义：以环戊烷并多氢菲——甾核衍生的一类化合物的总称。132564R78910111213141516171819甾体类化合物依-17位取代基团的不同，可分为：类型C17侧链A/BB/CC/DC21甾类C2H5衍生物反反顺强心苷类不饱和内酯环顺\反反顺甾体皂苷类含氧螺杂环顺\反反反植物甾醇8~10个碳原子烃类顺\反反反昆虫变态激素8~10个碳原子含氧烃类顺反反胆汁酸类戊酸顺反反强心苷类含义:是指存在于植物体内的一类对心脏具有显著生物活性的甾体苷类化合物。一．结构与分类（一）苷元部分：132564R78910111213141516171819ABCD依C17-位上连接内酯环大小的不同OO21232022ABCD21OO23202224强心甾烯海葱甾烯（蟾蜍甾二烯）3β-OH14β-OH3β-OH14β-OH甲型强心苷元乙型强心苷元甲型强心苷乙型强心苷3-位连接糖3-位连接糖（二）糖部分糖的类型a-OH糖a-去氧糖五碳醛糖2、6-二去氧糖六碳醛糖2、6-二去氧糖甲醚6-去氧糖6-去氧糖甲醚依直接与苷元相连的糖的种类I型苷元-（2、6-二去氧糖）Χ-（D-葡萄糖）УII型苷元-（6-去氧糖）Χ-（D-葡萄糖）УIII型苷元-（D-葡萄糖）二．强心苷的理化性质•1．性状大多为无色结晶或无定形粉末。具有旋光性。味苦，对粘膜有刺激性。•2．溶解性水甲醇、乙醇醋酸乙酯、含水氯仿、氯仿-甲醇乙醚、苯、石油醚原生苷次生苷+S水++微溶可溶-难溶--•3．脱水反应强心苷用混合强酸（3~5%盐酸）水解时，苷元上羟基（C14-OH，C5-OH更容易）与邻位上的氢脱去水分子的反应。属于水解反应的副反应，应注意避免。•4．水解反应反应类型反应条件水解特点用途酸水解温和酸水解0.02~0.05mol/LHCI含水醇短时加热苷元与a-去氧糖及a-去氧糖与a-去氧糖之间的苷键开裂I型强心苷的水解苷元、a-去氧糖双糖、三糖I型R—O—a-去氧糖—a-去氧糖—glc强烈酸水解3~5%HCI所有苷键断裂(I)、II、III型强心苷的水解延长加热时间苷元和各种单糖或加压但易产生脱水苷元I型苷元-（2、6-二去氧糖）Χ-（D-葡萄糖）УII型苷元-（6-去氧糖）Χ-（D-葡萄糖）УIII型苷元-（D-葡萄糖）Χ氯化氢-丙酮法II型强心苷的水解1%HCI丙酮溶液原生苷元和糖衍生物20℃两周条件温和（水、36℃左右、24hr）、专属性强I、II型次生苷和葡萄糖植物体内只有水解葡萄糖的酶、III型苷元、葡萄糖I型苷元-（2、6-二去氧糖）Χ-（D-葡萄糖）УII型苷元-（6-去氧糖）Χ-（D-葡萄糖）УIII型苷元-（D-葡萄糖）Χ酶水解碱水解酰基内酯环a-去氧糖苷元a-羟基糖NaHCO3+---Ca(OH)2+++-NaOH++++（反应产物与条件有关）水溶液中,内酯环开环，加酸后环和。醇溶液中131417D2223202221OOOHOHHH21OO232022HH21OOO23202220OHHHOCOOHKOHC2H5OH电子转移、双键移位加成反应皂化开环甲型强心苷C22活性亚甲基内酯型异构化苷开链型异构化苷与活性亚甲基试剂反应（用于甲型和乙型强心苷鉴别）5.显色反应按作用部位分：202221OO23OOHOOCH3OHOOCH3OHOOCH3OHOOHCH2OHOHOH作用于五元不饱和内酯环1、Legal反应2、Kedde反应3、Raymond反应4、Baljet反应用于甲型与乙型强心苷的鉴别作用于甾核1、醋酐-浓硫酸（L-B）反应2、Salkowski（氯仿-浓硫酸）反应3、三氯醋酸-氯胺T(Rosenheim)反应4.三氯化锑（五氯化锑）反应作用于a-去氧糖Keller-Kiliani（K-K）反应2.对二甲氨基苯甲醛反应3.吨氢醇反应4.过碘酸-对硝基苯胺反应用于I型与II、III型强心苷的鉴别三．强心苷的提取分离•原料•强心苷提取分离比较困难：•1.含强心苷成分比较复杂，含量较低，•2.强心苷为多糖苷,常与多糖、皂苷、色素、鞣质等性质相近成分共存，•3.共存酶的存在及酸、碱等，易造成强心苷的水解，使成分复杂化。•提取•溶剂法（相似者相溶原则）：原生苷甲醇、乙醇•次生苷乙醚、氯仿、氯仿-甲醇混合溶剂•常用提取溶剂:甲醇、70%乙醇（提取效率高；能使酶破坏失活）纯化•溶剂法:油脂类杂质（种子类药材）：压榨法或石油醚脱脂（原料/醇提浓缩液）•叶绿素（地上部分药材）：静置析胶法（醇提液浓缩至适当醇浓度静置）•铅盐法:沉淀酚酸类杂质（鞣质等），应注意调整含醇量，减少强心苷的损失•注意某些强心苷的脱酰基反应•吸附法:活性炭吸附除去叶绿素等脂溶性杂质•氧化铝吸附除去糖类、水溶性色素、皂苷等，注意调整醇浓度•分离•两相溶剂萃取法：依分配系数差异（K）•逆流分流法：依分配系数差异（K）•液滴逆流分溶法（DCCC）:依分配系数差异（K）•色谱分离法：对亲脂性苷（单糖苷、次生苷、苷元）：吸附原理•对弱亲脂性苷（原生苷）：分配原理四．强心苷的波谱特征（一）紫外光谱202221OO23ROOHaβ21OO24222320ROOH甲型强心苷乙型强心苷五元不饱和内酯环六元不饱和内酯环△aβ-γ内酯△aβ、γδ-δ内酯λmax220nm(lg4.34)λmax295~300nm(lg3.93)用于甲型与乙型强心苷及苷元的鉴别(二)红外光谱•强心苷在1800~1700cm-1产生特征性两个羰基吸收峰,甲型乙型高波数区向低波数移动（多一个双键，分子的共振结构使得-C+-O–比较稳定，依据虎克定律）例如：3-乙酰毛花洋地黄毒苷元1738cm-1（乙酰羰基）嚏根草苷元1756cm-1（内酯环正常羰基吸收峰）1718cm-11783cm-1（内酯环非正常羰基吸收）1740cm-1极性溶剂中减弱或消失△40cm-1202221OO23ROOHaβ21OO24222320ROOH甲型强心苷乙型强心苷五元不饱和内酯环六元不饱和内酯环△aβ-γ内酯△aβ、γδ-δ内酯UVλmax220nm(lg4.34)295~300nm(lg3.93)IR高波数区低波数区△40cm-1用于甲型与乙型强心苷的区别aβ饱和内酯环羰基吸收峰1786cm-1aβ不饱和内酯环羰基吸收峰1756cm-1aβγδ-不饱和内酯环羰基吸收峰1718cm-1羰基共轭程度增大，202221OO23ROOH皂苷类•经典含义----存在于植物体内一类比较复杂的苷类化合物。他的水溶液易引起肥皂样泡沫，且多数具有溶血等特性，皂苷的这些物理及生物学性质构成了皂苷的经典含义。•现代含义----由螺甾烷及其生源途径相似的甾族化合物的低聚糖苷或三萜类化合物的低聚糖苷。因此，皂苷可以分为甾体皂苷和三萜皂苷两大类。皂苷的分类及结构特点：皂苷甾体皂苷三萜皂苷螺甾烷醇型:25L、25S（C25-甲基直立a键、为β型）异螺甾烷醇型:25D25R(C25-甲基平伏e键、为a型)变形螺甾烷醇型：F环变形为呋喃甾烷（五元含氧环）呋甾烷型：F环裂环,C26-OH多与葡萄糖相连成苷五环三萜皂苷四环三萜皂苷β-香树脂醇型()a-香树脂醇型（）羽扇豆醇型达玛烷型羊毛脂甾烷型甾体皂苷的结构特点：•甾体皂苷=甾体皂苷元+糖（a-羟基糖）•1．由A、B、C、D环（甾核）与E、F环以缩酮形式相连接组成的螺甾烷结构•2．A/B/C/D环稠和方式：顺（反）、反、反•3．C25的绝对构型依其上甲基的取向不同有两种C25-甲基直立a键、为β型L型(25S25L25βF)平伏e键、为a型D型（25R25D25aF)螺甾烷型异螺甾烷型4．取代基团：•OH多在C3-位或其他位置•羰基多在C12-位•双键多在△5△9（11）•甾体皂苷不含羧基，呈中性，故称为中性皂苷。OOHO20222325181927OOHO131013异螺甾烷醇型螺甾烷醇型27OHOHOHO25CH2OHO1819OHO2627呋甾烷型变形螺甾烷醇型23456710131417202122293028272625242313282726252423OHHHH129303101417192021282726252423OHHHH12930β-香树脂醇型a-香树脂醇型羽扇豆醇型131013141720222425263029282723191852120252621183029282723195羊毛脂甾烷型达玛烷二．皂苷的性质1、性状皂苷大多为无色或乳白色无定形粉末（低聚糖苷，极性大，分子量大）皂苷元（极性小）大多有完好结晶。皂苷多数具有苦而辛辣味，对粘膜有强烈刺激性，尤其鼻粘膜，易引起喷嚏。皂苷大多具引湿性。2、溶解性皂苷（低聚糖苷，极性大）易于水、热甲醇、乙醇、含水丁醇，难于丙酮、乙醚次生皂苷（极性降低）易于醇、丙酮、乙酸乙酯皂苷元（极性小）易于石油醚、乙醚、苯、氯仿，难于水皂苷的助溶作用（表面活性剂作用），可以增加其他成分在水中的溶解度。•3．与胆甾醇的沉淀反应皂苷与甾醇（多为胆甾醇）形成的分子复合物沉淀反应。生成的分子复合物沉淀用乙醚回流提取时，胆甾醇可溶于乙醚，皂苷不溶。甾体皂苷与胆甾醇形成沉淀的溶度积小，因此，可用于甾体皂苷的分离纯化。•4．发泡性皂苷的表面活性剂作用，其水溶液在剧烈振摇时，可以产生大量、持久的泡沫，而且不因加热而消失。•5．溶血性皂苷有使红细胞破裂的作用。溶血能力的大小用溶血指数表示。溶血指数是指皂苷对同一动物来源的红细胞稀悬浮液，在同一等渗条件、缓冲条件及恒温下造成完全溶血的最低浓度。原因在于皂苷对胆甾醇有强的亲和力，可形成分子复合物，作用于红细胞表面的类脂质而破坏血细胞，表现强的溶血作用。同时，与胆甾醇的沉淀作用可用于解除皂苷的溶血作用。•6．与金属盐类的沉淀反应三萜皂苷可被中性盐如醋酸铅沉淀，甾体皂苷可被碱式盐或碱，如碱式醋酸铅、氢氧化钡等沉淀。三．皂苷及皂苷元的提取、分离（一）皂苷的提取分离原料以醇提较好，回收乙醇，加适量水稀释提取水溶液（1）正丁醇萃取法：必要时石油醚脱脂，正丁醇萃取，减压回收正丁醇（2）大孔树脂纯化法：水溶液过柱，少量水洗（糖分等），稀醇洗脱，蒸干纯化粗总皂苷乙醚（丙酮）、乙醚-丙酮沉淀法：粗品溶于少量甲醇，滴加乙醚等，混匀，皂苷及可析出，反复几次，可提高皂苷的纯度胆甾醇沉淀法：主要用于甾体皂苷的分离纯化精制较纯的皂苷分配原理为佳（皂苷极性大）硅胶分配柱色谱：氯仿-甲醇-水等梯度洗脱或水饱和正丁醇洗脱制备薄层色谱分离：反相色谱分离：反相键合相硅胶RP18、RP-8、RP-2,甲醇-水、乙氢-水SephadexLH-20：甲醇洗脱液滴逆流色谱法：难分离皂苷，制备成衍生物（乙酰化或甲酯），硅胶柱色谱分离铅盐沉淀法：中性和酸性皂苷的分离分离皂苷单体（实际中，需要多种方法配合应用）（二）皂苷元的提取、分离方法1.原料预发酵水，36℃保温24~48小时药渣酸水解3%硫酸加热水解3~6小时，过滤，水洗，干燥药渣提取石油醚、汽油或甲苯连续回流4~6小时石油醚提取液回收适量回收，放置析晶，抽滤皂苷元粗品重结晶乙醇或丙酮处理，活性炭脱色皂苷元精品方法2.原料提取按上述提取皂苷工艺进行皂苷水解常规酸水解水解液萃取苯、氯仿等有机溶剂萃取液（苯、氯仿）回收皂苷元皂苷元的分离：（1）吉拉尔试剂法：羰基与非羰基皂苷元的分离（2）柱色谱分离法—吸附原理—硅胶、氧化铝苯-氯仿、苯-甲醇、氯仿-甲醇不同比例洗脱•注：甾体皂苷---主要作为合成激素等的原料，故以提取苷元较为实用。•三萜皂苷—为许多中药的有效活性部位，故以提取皂苷为主。四．皂苷的检识及结构测定（一）皂苷的化学检识—颜色反应试剂类型鉴别特点鉴别意义醋酐-浓硫酸反应甾体皂苷黄红紫蓝三萜皂苷最后显绿色用于两类皂苷的区别五氯化锑反应（60~70℃加热）蓝、灰蓝、灰紫色可在滤纸上进行三氯醋酸反应甾体皂苷加热60℃显色三萜皂苷加热100℃显色可在滤纸上进行用于两类皂苷的区别氯仿浓硫酸反应硫酸层---红或蓝色，氯仿层---绿色荧光盐酸-对二甲氨基苯甲醛（Ehrlich试剂，简称E试剂）螺甾烷类不显色呋甾烷类显红色茴香醛-硫酸(A