三年制医学检验技术专科-临床检验免疫学-教学大纲

临床免疫学检验教学大纲(ClinicalLaboratoryImmunology)（供三年制医学检验技术专科专业使用）前言《临床检验免疫学》是医学检验专业的重要专业课之一。它主要讲述临床免疫学的基本技术、基本理论及常用的免疫学诊断方法，以及常见免疫相关性疾病的免疫学特征及免疫学诊断的意义。针对检验专科的授课不同与本科层次，它主要强调的是学生实验动手能力的培养，因此学生应熟练掌握临床检验科开展的常用免疫学检验技术，掌握临床免疫相关疾病的免疫学特征，并能针对不同的临床病例开展相关免疫学项目的诊断，并能对诊断结果进行合理的临床解释和分析。目前质量控制是检验工作的重要组成部分，要求学生能熟悉关于免疫检验的相关质量控制。本门课程的教学目的和基本技能训练要求是：通过对临床免疫检验工作较广泛的认识，使学生对临床免疫检验工作形成较深刻的理解，掌握各种免检理论和操作技能，养成良好的实验室工作作风，为毕业后能从事临床免疫检验工作奠定良好的理论和实验室基础。临床免疫检验工作涉及面广，内容多，授课必须重点突出，主次分明，详略得当，难点讲透，以确保学有所获。本大纲是参考中国医药科技出版社出版、吕世静主编、第二版«临床免疫学检验»教材制定的,并确定高等医学院校临床医学类三年制医学检验专业的临床免疫学检验教学的目的要求。在每章的“目的要求”项目中，指出掌握、熟悉与了解三级要求。掌握内容是本章节的教学重点，亦是理论和实验的重点考试范围；熟悉内容为选择性讲授和学生自修内容；了解内容为供学生自学和教师选择性教授。在“教学内容”项目中，划有横线条的部分是要求掌握的具体内容。通过讲授、实验、电教片学习、多媒体课件学习、病例讨论及自学等方式进行教学。本课程总学时为100课时，其中理论讲授58学时，实验42学时。本课程为校考课，课程考核成绩由平时考核和课终考核组成，其中课终考核采用笔答考试方式，其成绩占课程最终成绩的60％，平时考核由平时表现和实验报告两部分组成，各占20%和20%。各章参考学时分配表内容理论学时数实验学时数概论1抗原抗体反应2免疫原和抗血清制备3单克隆抗体与基因工程抗体的制备技术3凝集反应2沉淀反应4补体系统检测及应用2放射免疫技术3荧光免疫技术3酶免疫技术3化学发光免疫技术2其他标记技术3免疫细胞分离及功能检测6免疫检验的质量控制3超敏反应性疾病及其免疫检测5自身免疫性疾病及其免疫检测4免疫增殖性疾病及其免疫检测3免疫缺陷性疾病及其免疫检测3移植免疫及其免疫检测3实验一胶乳凝集试验（抗＂Ｏ＂及ＲＦ检测）3实验二免疫电泳试验4实验三荧光抗体显微技术试验4实验四酶联免疫吸附试验14实验五酶联免疫吸附试验23实验六斑点免疫印迹试验4实验七自动化学发光免疫分析仪见习3实验八补体检测试验4实验九外周血单个核细胞分离4实验十免疫印迹法检测抗ＥＮＡ3实验十一PEG沉淀法检测循环免疫复合物3实验十二ＡＩＤＳ病实验室检测见习3合计5842概论目的要求1.掌握基础免疫学的概念及主要内容。2.熟悉临床检验免疫学的研究对象及其任务。教学内容1．免疫学概念；功能：免疫防御、免疫自稳及免疫监视。2．免疫系统的组成免疫器官：中枢免疫器官（骨髓及胸腺），外周免疫器官（淋巴结、脾脏等）；免疫细胞：淋巴细胞（Ｔ细胞、Ｂ细胞和ＮＫ细胞），单核－吞噬细胞，参与免疫应答的细胞（中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和肥大细胞等）；免疫分子：免疫球蛋白、补体系统、细胞因子、粘附因子、ＣＤ抗原等．3.临床检验免疫学的研究对象及任务免疫学技术：沉淀反应、凝集反应、酶标免疫技术、荧光标记免疫技术等；临床免疫学：免疫学期基础理论、临床疾病及免疫学技术的结合．抗原抗体反应目的要求1.掌握抗原抗体的反应原理；抗原抗体反应的特点。2.熟悉抗原抗体反应的影响因素。3.了解抗原抗体反应的类型。教学内容1．抗原抗体反应的原理抗原决定簇与抗体超变区分子；抗原抗体结合力；亲和力与亲合力；亲水胶体转化为疏水胶体。2．抗原抗体反应特点特异性；比例性；可逆性；阶段性。3．抗原抗体反应的影响因素反应物自身因素；环境因素：电解质、酸碱度及温度。4．抗原抗体反应的类型凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应、标记免疫反应等。免疫原和抗血清的制备目的要求1.掌握多克隆抗体的概念；免疫血清（即多克隆抗体）的制备流程；免疫佐剂的概念、种类和作用机制。2.熟悉颗粒性抗原、可溶性抗原的制备。3.了解半抗原性免疫原的制备。教学内容1．多克隆抗体概念多种抗原表位；多个B细胞克隆；混合抗体。2．免疫血清的制备流程免疫原的制备；佐剂的制备；免疫动物的选择；免疫程序：免疫原的剂量、免疫途径及免疫间隔时间；试血；采血；抗血清的鉴定和保存；抗血清的纯化。3．免疫佐剂概念；种类：氢氧化铝、明矾、弗氏佐剂等；作用机制。4．半抗原性免疫原载体；半抗原与载体的连接方法；半抗原的鉴定。单克隆抗体与基因工程抗体的制备技术目的要求1.掌握单克隆抗体的概念及特性；淋巴杂交瘤技术的基本原理；基因工程抗体的概念。2.熟悉单克隆抗体的制备流程。3.了解基因工程抗体的种类。教学内容1．单克隆抗体的概念单一表位；单个Ｂ细胞克隆；均一抗体．2．单克隆抗体的特性高度特异性；高度均一性；弱凝集反应和不呈现沉淀反应；对环境敏感性．3．杂交瘤技术制备单克隆抗体的原理亲本细胞的选择；细胞的融合；选择性培养基的筛选；克隆化培养．4．单克隆抗体的制备流程抗原提纯和动物免疫；制备脾细胞；骨髓瘤细胞制备；细胞融合；饲养细胞制备；杂交瘤细胞筛选；阳性细胞克隆化；克隆扩大再生产；收集抗体；单抗的纯化及鉴定；细胞的冻存及复苏。5．基因工程抗体概念；常见类型：人源化抗体、小分子抗体、抗体融合蛋白、双特异性抗体及噬菌体抗体库技术。凝集反应目的要求1.掌握凝集反应的原理、特点；常见的直接凝集反应；间接凝集反应的分类及常见试验。2.熟悉抗球蛋白试验类型、原理及应用。3.了解冷凝集试验。教学内容1．凝集反应原理；特点。2．凝集反应的分类直接凝集反应：玻片凝集试验（原理及应用），试管凝集试验（原理及应用）；间接凝集反应：正向间接凝集试验、反向间接凝集试验、间接凝集抑制试验及反向间接凝集抵制。3．凝集反应的分类胶乳凝集试验：原理及应用；血凝试验。4．抗球蛋白试验分类；原理；应用。沉淀反应目的要求1.掌握沉淀反应的概念、分类及特点；免疫浊度原理、评价及应用；免疫电泳技术的原理、评价及应用。2.熟悉凝胶内沉淀反应的原理、评价及应用。教学内容1．沉淀反应概念；分类：液体内沉淀试验（絮状沉淀试验、免疫浊度测定），凝胶内沉淀试验（单向扩散试验、双向扩散试验），免疫电泳技术（对流免疫电泳、火箭免疫电泳、免疫电泳及免疫固定电泳）；特点。2．免疫浊度测定原理；分类：透射免疫比浊法、散射免疫比浊法、免疫胶乳比浊法；影响因素；临床应用。3．免疫电泳技术对流免疫电泳：原理，操作要点及应用；火箭免疫电泳：原理，操作要点及应用；免疫电泳：原理，操作要点及应用；免疫固定电泳：原理，操作要点及应用．4．凝胶内沉淀试验单向扩散试验：原理，操作要点及应用；双向扩散试验：原理，操作要点及应用。补体检测及应用目的要求1.掌握补体结合试验；血清总补体溶血活性测定试验。2.熟悉单个补体成分的测定；补体旁路途径溶血活性测定试验。3.了解补体系统概述。教学内容1.概述补体成分的含量与理化特性：补体成分的含量，补体的理化特性；补体的活化途径。2.补体总活性测定（CH50）原理；方法；评价；应用。3.补体旁路途径溶血活性测定原理；方法；评价；应用。4.补体结合试验实验原理；实试验方法：试剂准备，正式试验；方法评价。5.单个补体成分的测定免疫溶血法：原理，方法，评价；免疫化学法：常用指标，常用检测方法。放射免疫技术目的要求1.掌握放射免疫技术的基本类型；放射免疫分析；免疫放射分析；IRMA与RIA的比较。2.熟悉常用的放射性核素；免疫复合物与游离抗原的分离。3.了解放射免疫分析技术的应用；放射性核素标记物的制备、纯化及鉴定。教学内容1．概述常用的放射性核素；放射性核素标记物的制备：类型及特点；放射性核素标记物的纯化及鉴定；免疫复合物与游离抗原的分离：活性碳吸附法，PEG沉淀法，双抗体法，PR试剂法2．放射免疫分析基本原理；技术要点：抗原抗体反应，B和F的分离，放射性测量；数据处理；方法评价。3．免疫放射分析基本原理：单位点IRMA，双位点IRMA；技术要点；方法评价。4．IRMA与RIA的比较标记对象；反应速率；反应方式；特异性等。5．放射免疫分析技术的应用。荧光免疫技术目的要求1.掌握荧光物质的类型及特点；荧光抗体技术。2.熟悉荧光的基本知识；时间分辨荧光免疫测定技术。3.了解荧光标记物的制备、鉴定及保存。教学内容1．概述荧光的基本知识：荧光，荧光效率，荧光寿命，荧光淬灭；荧光物质：FITC，RB200，TRITC，PE等；荧光标记物的制备：标记方法，标记物的纯化、鉴定及保存。2．荧光抗体技术标本的制作；荧光抗体染色：直接法，间接法，双标记法；荧光显微镜检查：荧光显微镜的结构（光源，滤光片，光路，聚光器，镜头等）；结果判断；临床应用。3．时间分辨荧光免疫测定基本原理；技术类型；方法评价；临床应用。酶免疫技术目的要求1.掌握酶免疫技术的原理及特点；酶联免疫吸附试验的基本原理、类型及原理、操作要点。2.熟悉酶免疫技术的分类；ELISA的常用试剂。3.了解酶标记物的制备及鉴定。教学内容1．酶免疫技术概述原理；特点；技术类型。2．ELISA的常用试剂酶和酶作用底物：酶的要求，常用的酶，常用的底物；酶标记抗体或抗原（结合物）：制备、纯化及鉴定；固相载体：固相载体的要求，固相载体的种类和选择，包被与封闭。3．酶免疫技术的分类酶免疫测定技术与酶免疫组织化学技术；均相酶免疫测定与异相酶免疫测定。4．酶联免疫吸附试验基本原理；方法类型及反应原理：夹心法（两步法，双位点一步法），间接法，竞争法，捕获法等；技术要点：加样，温育，洗板，显色，终止，结果判断。化学发光免疫分析技术目的要求1.掌握化学发光剂、化学发光免疫分析的类型及原理；2.熟悉化学发光免疫分析的临床应用；3.了解发光剂的标记技术。教学内容1.概述化学发光；化学发光效率。2.化学发光剂和标记技术化学发光剂：直接化学发光剂，酶促反应发光剂；发光剂的标记技术：常用标记方法，影响标记的因素。3.化学发光免疫分析的类型直接化学发光免疫分析；化学发光酶免疫分析：辣根过氧化物酶标记的化学发光免疫分析，碱性磷酸酶标记的化学发光免疫分析；电化学发光免疫分析；临床应用。其他标记技术目的要求1.掌握生物素-亲和素系统的特点、类型及原理；免疫印迹试验；斑点酶免疫吸附试验；酶联免疫斑点试验。2.熟悉生物素-亲和素系统的应用；膜载体免疫测定的种类；常用的固相膜。3.了解生物素的理化性质与标记；亲和素、链霉亲和素的理化性质与标记；固相膜免疫测定技术的评价。教学内容1.生物素及活化生物素理化性质；标记。2.亲和素、链霉亲和素理化性质；标记。3.生物素-亲和素系统的特点灵敏度，特异性，稳定性，适应性，其他。4.生物素-亲和素系统的类型及原理BAB法，ABC法，BA法5.生物素-亲和素系统在各检测技术中的应用在ELISA中的应用；在均相酶免疫测定中的应用；在荧光免疫技术中的应用；在放射免疫测定中的应用；在分子生物学中的应用。6.概述常用的固相膜；固相膜测定技术的评价。7.膜载体免疫测定的种类斑点酶免疫吸附试验；免疫印迹试验；酶联免疫斑点试验。8.斑点酶免疫吸附试验原理；技术要点；应用；评价。9.免疫印迹试验原理；技术要点；临床应用；评价；注意事项。10.酶联免疫斑点试验(ELISPOT)原理；技术要点；评价；应用。免疫细胞分离及检测目的要求1.掌握免疫细胞的分离技术；掌握Ｔ细胞数量检测及临床意义；掌握Ｔ细胞功能检测；掌握Ｂ细胞数量检测及临床意义；掌握Ｂ细胞功能检测及临床意义．2.熟悉淋巴细胞表面主要标志；ＮＫ细胞数量及功能检测．3.了解中性粒细胞数量及功能检测；吞噬细胞数量及功能检测．教学内容1.免疫细胞的分离外周血单个核细胞分离：原理，操作，影响