一个理想的用淀粉酶糖化发展的过程

一个理想的用淀粉酶糖化发展的过程T.satyanarayana1，该noorwez，S.库马尔，j.l.u.m.饶，M.ezhilvannan和P.Kaur微生物学系，德里大学南校区，新delhi-110021，印度摘要筛选的嗜热真菌和细菌的广泛努力，从各种环境中的分离样品，已导致印度thermomucorseudaticae选择，芽孢杆菌thermoleovoransnp33G.thermoleovoransnp54对糖化酶的生产，αamylopullulanase和α-淀粉酶分别。淹没和固态发酵工艺进行了优化，最大化由T.王seudaticae分泌糖化酶。的amylopullulanase和α-淀粉酶的生液态发酵中np33和np54进行了优化。糖化酶是最佳活跃在pH7和60◦C和显示糖化可溶性以及原淀粉。amylopullulanase和α-淀粉酶具有最优在pH值7和100◦C和糖化淀粉有效。分化抑在混合基质的行动清楚地表明，有两αα-淀粉酶活性位普鲁兰酶的amylopullulanase活动。两αα-淀粉酶和amylopullulanase高麦芽糖形和Ca2+独立。这些淀粉分解酶已被证明是有用的在淀粉糖化单独和组合。简介淀粉是一种多糖由葡萄糖单位通过α-1,4-和α-1,6-glycosidic键相连，形两个高相对分子质量的分子：直链淀粉（15–25%），一个线性聚合物组成的α-吡喃葡萄糖残基，支链淀粉（75–85%），支化聚合物含α-1,6-glycosidic联系在分支点淀粉在食品工业中用作增稠剂，粘结剂，稳定剂，乳化剂和悬浮和胶凝剂。此外，它是多糖的主要来源糖浆，这几种药物提供依据和糖果行业。淀粉水解为葡萄糖依赖工业过程在无机酸或酶的催化作用。使用酶优先为它提供了许多优点，包括提高产量和良好的经济。酶法水解允许更大的控制糖化，特异性的反应，而产生的产品的稳定性。温和的反应条件包括温度较低和近中性pH值，从而减少不必要的反应。酶法的青睐，因为他们也较低能源需求和消除中和步骤[1]。受雇于工业淀粉水解的酶市场估计占10–总数的15%的世界.酵素市场。这是第二大工业部门消费者的酶。在常规酶法淀粉糖化过程，在不同的步骤参数变化的原因很多在行业的障碍。由于pH值的变化，大大量的盐必须通过离子交换除去。除了耗费时间，这些步骤导致逆向反应和较低的收益率。不受欢迎的产品分枝低聚糖，麦芽，异葡糖基麦芽糖和异麦芽糖形成。淀粉的转化过程的改进寻找新的有效的、合适的enzymeswith高的热稳定性，功能在酸性至中性的pH范围，和独立的阳离子如Ca2+的稳定性/活动将显著降低糖浆的生产成本2–[4]。提高淀粉糖化过程的温度会导致一些好处，如更高的基板浓度，降低粘度和较低的抽水成本，细菌污染的风险有限，增加的反应率和减少手术时间，降低成本的酶净化催化剂，和较长的半衰期，由于增加酶的热稳定性[4]。为了寻找新的酶，我们筛选了一大嗜热细菌和真菌的菌株数量，和选定的芽孢杆菌thermoleovoransnp33，G.thermoleovorans为np54和thermomucor王seudaticae耐高温、耐钙生产独立的amylopullulanase，α-淀粉酶和糖化酶α中性。酶测定淀粉的应用潜力糖化。表征酶总蛋白纯化纯化淀粉酶技术，其。酶的测定通过测定测定amylopullulanase减少从淀粉糖解放（αα-淀粉酶和普鲁兰多糖（80◦普鲁兰酶）活性的α-淀粉酶的αC.np54thermoleovorans和indicaeseudaticae糖化酶通过估算还原糖的测定在100和60◦C淀粉释放，分别。一个国际单位酶是酶量对于1μ摩尔需要解淀粉分解酶在淀粉中的应用糖化在淀粉糖化酶的适用性让α-淀粉酶/amylopullulanase/糖化酶检单独行动或在不同的组合后的糊化原淀粉和可溶性淀粉在105◦C10分钟，估计还原糖解放在所需的时间间隔。结果G.thermoleovoransnp33和np54是有氧和极嗜热菌，生长温度高温模具T.王seudaticae生长最佳在40–45◦C.在中制定的“一变一次”方法，含胆酸，最高α淀粉酶分泌（48000台·L−1）中达到了G.np54thermoleovorans。表面活性剂如胆酸是众所周知，溶解膜蛋白，导致细胞膜的通透性增加，从而提高生物分子如酶的分泌。胆酸酸也稳定α-在保存过程中淀粉酶活在4◦C（表1）。酶高麦芽糖形成，高热和Ca2+独立（表2）。amylopullulanase滴度最高（α-淀粉酶12300个单位1·L−；普鲁兰酶，5200台·L−1）当G.thermoleovoransnp33在合成复杂的栽培通过单次单因子和研究制定中方法论的方法。酶的分子48kDa的质量，这是最佳的活性在80◦C，2小时的半衰期（为αα-淀粉酶）和3.5（100◦普鲁兰酶）C.分化抑制行为在混合基质和活动建议酶的活动是由两个独立的活动开展网站的amylopullulanase（表3）。酶是高热以及Ca2+无关。酶稳定的聚（乙二醇），和底物淀粉与普鲁兰多糖。高温模具T.王seudaticae分泌糖化酶深层（46000台·L−1）以及固体状态（475单位·G−1干发酵麸曲）。的纯酶的分子量为42kDa的，它是在5–9和40–90◦C的pH和温度范围内活性，在7和60◦C.酶具有活性的最优解原淀粉和可溶性淀粉。抑制由N-乙基马来酰亚胺和N-溴代丁二酰亚胺酶活性建议的半胱氨酸和色氨酸的关键作用催化。所有这三种酶具有淀粉糖化，单独并结合，有不同程度的（表4）。当淀粉水解的amylopullulanase，主要产品为麦芽糖。与治疗前的amylopullulanase淀粉非常有效的糖化酶糖化在这α-淀粉酶的比较结论所有的三种酶活性在中立，Ca2+—独立型。一个统计中的应用方法，响应面方法，让我们提高酶的效价。α-淀粉酶/amylopullulanasepretreate淀粉糖化血糖很有效用糖化酶。我们感谢科技部，大学教育资助科学与工业委员会和理事会研究（印度政府）的形式为提供资助研究项目和奖学金的学者。工具书类1bigelis，R（1993）酶在食品加工（nagodawithana，T.芦苇，G.，主编），科学出版社，San迭戈，CA2萨哈，公元前和Zeikus，JG（1989）趋势研究。7，234–2383antranikian，G（1992）在天然产物的微生物降解（温克尔曼，G.，主编），27页–56引起的，中国，德国4维也里，C和Zeikus，JG（2001）微生物。分子生物学。Rev。65，1–43