不同淀粉来源对生长猪回肠食糜中微生物氮和氨基酸含量的影响

书书书动物营养学报２００８，２０（４）：４０４４１０犆犺犻狀犲狊犲犑狅狌狉狀犪犾狅犳犃狀犻犿犪犾犖狌狋狉犻狋犻狅狀不同淀粉来源对生长猪回肠食糜中微生物氮和氨基酸含量的影响戴求仲１，２　王康宁１　印遇龙３　李铁军３　黄瑞林３（１．四川农业大学动物营养研究所，雅安６２５０００；２．湖南省畜牧兽医研究所，长沙４１０１３１；３．中国科学院亚热带农业生态研究所，长沙４１０１２５）摘　要：本试验旨在研究淀粉消化性能的差异对生长猪回肠食糜中微生物氮和氨基酸含量的影响。试验采用４×４拉丁方设计，选择４头回肠末端安装有简单犜瘘管的杜×长×大三元杂交公猪进行消化代谢试验。结果显示，淀粉来源不同其回肠末端消化率存在差异，在生长猪的回肠末端抗性淀粉有８３０７％被消化；糯米淀粉被１００％消化，玉米和糙米淀粉介于二者之间，分别有９７６３％和９６４１％被消化；回肠食糜中氮的流量以采食抗性淀粉日粮组最高（为每千克干物质采食量７４４犵），而食糜氮中微生物氮所占比例以采食糯米组最高（为７２８％）；各组回肠食糜氨基酸流量中微生物氨基酸所占比率变化范围为２５４３％（玉米组）～４５０９％（抗性淀粉组），其中抗性淀粉组犃狊狆、犌犾狌、犛犲狉和犔狔狊的比率明显高于玉米组（犘＜００５），但犜狔狉却低于玉米组（犘＜００５）；糙米组犃狉犵显著高于抗性淀粉组，而犃犾犪和犔犲狌却比抗性淀粉组低（犘＜００５）；糯米组犃犾犪和犔犲狌也明显较抗性淀粉组低。关键词：淀粉；生长猪；回肠食糜；微生物氨基酸收稿日期：２００８０１３１基金项目：国家自然基金项目资助（项目编号３０３７１０３８）作者简介：戴求仲（１９６９），男，湖南新宁人，研究员，博士，主要从事单胃动物营养研究工作。犈犿犪犻犾：犱犪犻狇犻狌狕犺狅狀犵＠犵犿犪犻犾．犮狅犿　　目前普遍认为，用回肠可消化氨基酸评定饲料氨基酸利用率要比粪可消化氨基酸更准确，因为回肠氨基酸消化率排除了肠道微生物对氨基酸消化的影响［１］。但研究发现回肠存在大量微生物，并能够将大量氨基酸降解成氨和胺用于微生物蛋白质合成，在回肠食糜氮含量中约有２５％～３０％来自于微生物氮［２３］，这些微生物氮在内源氮排泄量中占相当大的比例。进一步研究还发现，回肠食糜中微生物氮和氨基酸流量受日粮纤维水平［４］和来源［５］的影响。淀粉是畜禽日粮的重要组成部分，传统认为其在动物体内能够被完全消化吸收，并提供畜禽能量需要量的近５０％。但近年的研究显示，淀粉因来源、组成不同其消化性能存在差异［６］。对于淀粉消化性能的差异是否影响回肠食糜中微生物氮和氨基酸流量目前还未见有研究报道。因此，本试验以生长猪作为动物模型，目的是研究不同来源淀粉消化性能的差异及其对生长猪回肠食糜中微生物氮和氨基酸流量的影响，为进一步测定内源氮和氨基酸排泄量，准确评定回肠氨基酸利用率提供理论依据。１　试验材料和方法１．１　试验动物及设计选择日龄相同、健康、体重（２０３２±０６４）犽犵杜×长×大三元杂交生长公猪４头，进行外科手术在回肠末端安装简单犜瘘管，并按４×４拉丁方设计进行消化试验。１．２　试验日粮用玉米、早籼稻糙米、糯米和抗性淀粉（犎犻犿犪犻狕犲１０４３）作为淀粉来源配合４个日粮，日粮参照犖犚犆（１９９８）２０～５０犽犵猪营养需要配制，各日粮中总能、粗蛋白质、钙、总磷、粗纤维、总淀粉、赖氨酸、蛋氨酸＋胱氨酸、苏氨酸及色氨酸的含量基本一致（试验日粮组成和营养水平见表１）。并在饲料中加入０１％的氧化钛作为外源指示剂。１．３　试验程序试验猪手术后单笼饲养于不锈钢代谢笼内，恢复５犱后驱虫，然后开始正式试验。试验包括观察期和试验期。观察期内测定采食量，以其采食量的９０％确定试验期每天的给食量。试验猪每天０８：００和２０：００各饲喂１次，自由饮水。每个日粮的试验期持续　４期戴求仲等：不同淀粉来源对生长猪回肠食糜中微生物氮和氨基酸含量的影响９犱，第８天和第９天连续收集４８犺回肠食糜。２周后试验猪称重１次，根据体重再调整后期的采食量。表１　试验日粮组成及营养水平（风干基础）犜犪犫犾犲１　犜犺犲犻狀犵狉犲犱犻犲狀狋狊犪狀犱狀狌狋狉犻犲狀狋犾犲狏犲犾狊狅犳犲狓狆犲狉犻犿犲狀狋犱犻犲狋狊（犪犻狉犱狉狔犫犪狊犻狊，％）项目犐狋犲犿狊玉米日粮犆狅狉狀犱犻犲狋糙米日粮犅狉狅狑狀狉犻犮犲犱犻犲狋糯米日粮犛狋犻犮犽狉犻犮犲犱犻犲狋抗性淀粉日粮犚犛犱犻犲狋原料组成犐狀犵狉犲犱犻犲狀狋狊玉米犆狅狉狀５２００－－－糙米犅狉狅狑狀狉犻犮犲－６５８４－－糯米犛狋犻犮犽狉犻犮犲－－６５３４－玉米蛋白粉犆狅狉狀犵犾狌狋犲狀犿犲犪犾３３８－－９８０抗性淀粉（犎犻犕犪犻狕犲１０４３）－－－５１８４豆粕犛狅狔犫犲犪狀犿犲犪犾２４２４２４２４２４２４２４２４鱼粉犉犻狊犺犿犲犪犾２００２００２００２００豆油犛狅狔犫犲犪狀狅犻犾３００３００３００３００石粉犆犪犆犗３０２２０９２０９２０２６磷酸氢钙犆犪犎犘犗４１６６０４８０４８１５８食盐犖犪犆犾０３００３００３００３０预混料犘狉犲犿犻狓１）１００１００１００１００氧化钛犜犻犗２０１００１００１００１０犔赖氨酸犔犔狔狊（７８％）０１５－－０２３犇犔蛋氨酸犇犔犕犲狋（９８％）００２００４００４０１０犔苏氨酸犔犜犺狉（９８％）００３－－００５犔色氨酸犔犜狉狆（９８％）００４００１００１００５稻谷壳犚犻犮犲犺狌犾犾１０６１２４１２４２０２海泡石犛犲狆犻狅犾犻狋犲－０８３１３３３４６玉米淀粉犆狅狉狀狊狋犪狉犮犺１０８０－－－合计犜狅狋犪犾１００００１００００１００００１００００营养水平犖狌狋狉犻犲狀狋犾犲狏犲犾狊２）干物质犇犕８４８４８６４２８５５３８７３６总能犌犈（犕犑／犽犵）　　　　１６３１（１７１２）　　　１６２９（１７２０）　　　　１６２９（１７１８）　　　１６０５（１６８４）粗蛋白质犆犘　　　　１８２５（１８０９）　　　１８３５（１８１７）　　　　１８１９（１８０２）　　　１８３１（１７９８）赖氨酸犔狔狊　　１０１（０９７）　　　１０５（０９７）　　　　０９７（０９７）　　　１０５（０９７）蛋氨酸犕犲狋０３９（０３８）　　　０３４（０３５）　　　　０３４（０３７）　　　０３４（０３７）蛋氨酸＋胱氨酸犕犲狋＋犆狔狊　　　　　　（０６６）　　　　　　（０６６）　　　　　　（０６６）　　　　　（０６６）苏氨酸犜犺狉０７２（０７６）　　　０７４（０７６）　　　　０６９（０７６）　　　０７２（０７６）色氨酸犜狉狆　　　　　　（０２７）　　　　　　　（０２７）　　　　　　（０２７）　　　　　（０２７）总淀粉犜犛４２７５（４３６３）　　　　４２８９（４４０４）　　　　４２５６（４４５３）　　　４３１４（４４６６）粗纤维犆犉２９５２９５　２９５２９５钙犆犪　　　　０６３（０７１）　　　　０６３（０６１）　　　　　０６３（０６５）　　　　０６３（０６２）总磷犜犘　　　　０５２（０５４）　　　　０５２（０５６）　　　　　０５２（０５３）　　　　０５２（０４８）　　１）预混料为每千克饲料提供犜犺犲狆狉犲犿犻狓狆狉狅狏犻犱犲狊犳狅犾犾狅狑犻狀犵犳狅狉狆犲狉犽犵犱犻犲狋：犞犃４０００犐犝；犞犇３４００犐犝；犞犈１６犐犝；犞犓１犿犵；胆碱犮犺狅狉犻狀犲２００犿犵；泛酸犇狆犪狀狋狅狋犺犲狀犻犮犪犮犻犱６犿犵；犞犅２２犿犵；叶酸犳狅犾犻犮犪犮犻犱０８犿犵，烟酸狀犻犪犮犻狀１０犿犵；犞犅１０６犿犵；犞犅６０６犿犵；生物素犫犻狅狋犻狀００８犿犵；犞犅１２００１犿犵；犆狌１５犿犵；犉犲１００犿犵；犣狀１００犿犵；犕狀２０犿犵；犐０３犿犵；犛犲０３犿犵。２）括号内为实测值。犐狀狋犺犲犫狉犪犮犽犲狋犪狉犲犪狀犪犾狔狕犲犱狏犪犾狌犲狊．１．４　测定指标１．４．１　日粮、粪和回肠食糜中干物质、总能、钙、总磷及尿氮含量测定参照北京农业大学主编《家畜饲养指导》５０４动　物　营　养　学　报２０卷　（１９７９）［７］有关方法测定。１．４．２　日粮和回肠食糜中淀粉含量和组成总淀粉、抗性淀粉和非抗性淀粉含量测定参照爱尔兰犕犲犵犪狕狔犿犲公司提供的方法测定。直链淀粉含量测定采用分光光度法测定（国标法）。支链淀粉含量由总淀粉与直链淀粉的差计算而来。１．４．３　日粮和食糜中钛含量测定采用紫外分光光度法测定。１．４．４　回肠食糜和粪微生物蛋白质及氨基酸含量参照李铁军等［５］方法测定。称取粪和回肠食糜鲜样１００犵，加入４℃１０００犿犔含８．５犵犖犪犆犾、６犵犕犵犛犗４和２犿犔吐温８０的蒸馏水，磁力搅拌４０犿犻狀后，于２０００狉／犿犻狀离心５犿犻狀，过滤弃去杂质，再将滤液于２０００狉／犿犻狀离心５犿犻狀，过滤；然后将滤液于高速冷冻离心机上离心（５０００狉／犿犻狀，４℃）１０犿犻狀，弃去上清液；将离心沉淀物（微生物颗粒）用４℃的蒸馏水５００犿犔冲洗，再次离心（５０００狉／犿犻狀，４℃）１０犿犻狀，最后将沉淀颗粒冷冻干燥，分离出回肠食糜微生物，－２０℃冷冻保存。分析时，微生物中氮的含量采用半微量凯氏定氮法测定；微生物蛋白质中氨基酸含量分析采用６犿狅犾／犔盐酸水解，以邻苯二甲酸为衍生剂，在高效液相色谱仪（犎犘犔犆）上测定２，６二氨基庚二酸（２，６犱犻犪犿犻狀狅狆犻犿犲犾犻犮犪犮犻犱，犇犃犘犃）含量。然后根据以下公式计算：犖犳犾狅狑＝犖犱犻犵犲狋犪×［犕犪狉犽犲狉］犱犻犲狋／［犕犪狉犽犲狉］犱犻犵狊犲狋犪其中犖犳犾狅狑为粪、回肠食糜中氮流量，犖犱犻犵犲狋犪粪氮、回肠食糜氮含量，［犕犪狉犽犲狉］犱犻犲狋和［犕犪狉犽犲狉］犱犻犵狊犲狋犪分别为犜犻犗２在日粮和粪、回肠食糜中的含量。犚＝（犇犃犘犃犱犻犵犲狊狋犪／犇犃犘犃犫犪犮狋犲狉犻犪）×（犃犃犫犪犮狋犲狉犻犪／犃犃犱犻犵犲狊狋犪）×１００％其中犚为猪回肠食糜氮和氨基酸流量中微生物氮和氨基酸所占的比值，犇犃犘犃犱犻犵犲狊狋犪和犇犃犘犃犫犪犮狋犲狉犻犪分别为食糜和微生物中２，６二氨基庚二酸的含量，犃犃犫犪犮狋犲狉犻犪和犃犃犱犻犵犲狊狋犪分别为微生物氮或氨基酸、食糜氮或氨基酸含量。１．５　数据处理用犛犃犛统计软件包对试验数据进行统计分析，并对不同处理间平均数的差异性进行犇狌狀犮犪狀氏新复极差多重比较。２　结　果２．１　不同来源淀粉回肠末端消化率由表２可见，不同谷物饲料淀粉在生长猪回肠末端的消化率存在差异，糯米日粮组淀粉在回肠末端几乎消化完全（消化率为１００％），玉米和糙米日粮淀粉回肠末端消化率也分别达到９７６３％和９６４１％，但抗性淀粉组日粮淀粉回肠末端淀粉消化率仅为８３０７％，明显低于糯米（犘＜００５）、玉米（犘＜００５）和糙米组（犘＜００５）。表２　不同来源淀粉回肠末端消化率犜犪犫犾犲２　犐犾犲狌犿犱犻犵犲狊狋犻犫犻犾犻狋狔狅犳犱犻犳犳犲狉犲狀狋犱犻犲狋犪狉狔狊狋犪狉犮犺犻狀犵狉狅狑犻狀犵狆犻犵（％）日粮犇犻犲狋玉米日粮犆狅狉狀犱犻犲狋糙米日粮犅狉狅狑狀狉犻犮犲糯米日粮犛狋犻犮犽狉犻犮犲抗性淀粉日粮犚犛犱犻犲狋淀粉回肠末端消化率犐犾犲狌犿狊狋犪狉犮犺犱犻犵犲狊狋犻犫犻犾犻狋狔９７６３±０８６犪犫９６４１±０８６犫１００００±０９６犪８３０７±０９６犮　　同行数据肩标不同字母表示差异显著（犘＜００５）。下表同。犇犪狋犪狑犻狋犺犱犻犳犳犲狉犲狀狋狊犿犪犾犾犾犲狋狋犲狉狊狌狆犲狉狊犮狉犻狆狋狊犻狀狋犺犲狊犪犿犲狉狅狑犿犲犪狀犱犻犳犳犲狉犲狀狋狊犻犵狀犻犳犻犮犪狀狋犾狔（犘＜００５）．犜犺犲狊犪犿犲犪狊犫犲犾狅狑．２．２　生长猪回肠食糜氮流量和微生物氮所占比率由表３可见，采食不同来源淀粉日粮的试验猪粪和食糜中氮的流量存在差异。粪中氮流量以采食抗性淀粉日粮组最高，每千克干物质采食量达到４６６犵，明显高于糯米组的２３３犵和糙米组的３４８犵（犘＜００５