[医学微生物学]虫媒病毒出血热病毒.

第30章学习要求1）掌握流行性乙型脑炎病毒的致病性与免疫性（传染源、传播媒介、储存宿主、流行季节、临床特点、隐性传染与免疫性。2）熟悉流行性乙型脑炎病毒的形态与结构；标本采取、血清学诊断。3）了解其他病毒。虫媒病毒（Arboviruses）通过吸血节肢动物叮咬易感的脊椎动物而传播；节肢动物既是病毒的传播媒介，又是储存宿主；多为自然疫源性疾病，也是人畜共患病；具有明显的地方性和季节性1992年国际虫媒病毒中心登记535种对人类致病的虫媒病毒128种中国发现的虫媒病毒9种其中引起流行的虫媒病毒4种分离到的虫媒病毒5种虫媒病毒的种类黄病毒科、黄病毒属：乙型脑炎病毒脑炎森林脑炎病毒脑炎西尼罗脑炎病毒脑炎、肝炎圣路易斯脑炎病毒脑炎登革病毒登革热、登革出血热黄热病病毒肝炎、出血热重要的虫媒病毒及其所致疾病我国流行的虫媒病毒乙型脑炎病毒登革病毒俄罗斯春夏脑炎病毒（森林脑炎病毒）第一节乙型脑炎病毒Japaneseencephalitisvirus,JEV流行性乙型脑炎病毒是引起流行性乙型脑炎（乙脑）的病原体。病毒经蚊媒介引起中枢神经系统的急性感染致病。为一种人和动物共患的自然疫源性疾病。流行于夏秋季节。案例患者，男，5岁。5d前无明显诱因发热，伴有头痛乏力，喷射呕吐，1d前昏迷,于2004年8月25日入院。居住地为农村，从未接种疫苗，蚊虫较多。查体T39.4℃，R32次/分，P112次/分，Bp150/100mmHg。昏迷状态，被动体位，面色潮红，呼吸急促，双瞳孔等大等圆，直径约3mm，对光反射迟钝，颈抵抗阳性，四肢肌张力较高，心肺无异常，腹平软，肝脾未触及，双膝反射未引出，布氏征阳性，角膜反射存在。布鲁斯基(Brudzinski)征：病人仰卧两下肢伸直，医生以手托起头部使其下颌接近前胸部，如颈部有抵抗及颈后疼痛感，同时两下肢髋关节反射性屈曲即为阳性。辅助检查血常规：Hb164g/L，WBC11×109/L，N0.8，PLT115×109/L；脑脊液检查常规：微混，总细胞500×106/L，白细胞460×106/L，分类多核细胞0.70，单核0.30；生化：蛋白558mg/L，糖3.48mmol/L，氯123.7mmol/L；新型隐球菌（-），乙脑特异性抗体IgM（+）；EB病毒抗体IgM（-），柯萨奇病毒抗体（-），合胞病毒抗体IgM（-），单纯疱疹病毒-I型抗体-IgM（-），单纯疱疹病毒-Ⅱ型抗体IgM（-），巨细胞病毒抗体-IgM（-），自身抗体（-）；颅脑CT显示局限性低密度阴影。思考题:1．可疑哪种病原体感染？其生物学特性怎样？2．该病原体的传染源、传播途径、易感人群以及流行特征怎样？3．该病原体的微生物学诊断及鉴别诊断方法有那些？一、生物学性状1.形态与结构病毒分类：属黄病毒科、黄病毒属病毒颗粒呈球形，直径30~40nm,有包膜，核衣壳呈二十面体立体对称乙脑病毒电镜图乙型脑炎病毒结构模式图培养特性能在白纹伊蚊C6/36细胞、Vero细胞、BHK21细胞中增殖引起明显的细胞病变最易感的动物是乳鼠只有一个血清型，较少变异抵抗力对脂溶剂敏感不耐热56℃30min、100℃2min均可灭活对化学消毒剂敏感，多种消毒剂可灭活二、流行病学特征传染源主要是带毒的猪、牛、马、驴、羊等家畜和鸟类幼猪具有高的感染率和高滴度的病毒血症，是最重要的传染源和中间宿主病人的病毒血症短暂，且血中病毒滴度不高，故病人不是主要的传染源蝙蝠亦可能为乙脑病毒的传染源传播媒介主要传播媒介是三节吻库蚊感染的蚊子可带毒越冬并可经卵传代，因此蚊子不仅是传播媒介又是重要的储存宿主流行特征主要在亚洲的热带和亚热带国家和地区流行我国是乙脑的主要流行区，除青海、新疆及西藏外均有乙脑流行流行季节与蚊子密度的高峰期一致，以夏、秋季流行为主易感人群主要是10岁以下的儿童二、致病性与免疫性致病性与免疫性1、传播媒介：主要为三节吻库蚊、白蚊伊蚊病毒叮咬蚊子猪、牛、羊、马或家禽病毒血症更多蚊子叮咬叮咬易感人群乙型脑炎幼猪是主要的中间宿主和传染源传播媒介及长期储存宿主2、致病机制乙脑病毒蚊叮咬人体绝大多数为隐性或轻型感染血管内皮细胞、局部淋巴结增殖血流（一次病毒血症）肝、脾等单核吞噬细胞增殖血流（二次病毒血症）少数人病毒突破血脑屏障脑组织内增殖引起脑实质及脑膜病变引起脑炎症状（高热、惊厥或昏迷等）高热剧烈头痛、频繁呕吐、颈项强直昏迷中枢性呼吸衰竭脑疝病死率：10%~40%后遗症：5%~20%，表现为痴呆、失语、瘫痪乙脑的临床特征二、致病性与免疫性致病机制血－脑屏障通透性增加：病毒诱导单核巨噬细胞分泌某些细胞因子，使血-脑屏障通透性增加，易于侵入中枢神经系统细胞因子释放增加：病毒感染刺激免疫细胞释放TNF-α、IL、IFN等炎症细胞因子，引起炎症反应和细胞损伤免疫复合物介导的免疫损伤二、致病性与免疫性免疫性感染后免疫牢固而持久体液免疫起主要作用IgM中和抗体:感染后1周产生，2周达高峰IgG中和抗体：维持数年血凝抑制抗体：感染后第5天出现，2周达高峰，维持1年以上特异性细胞免疫可阻止病毒侵入脑组织二、致病性与免疫性病毒入血—形成两次病毒血症绝大多数---隐形感染仅有0.1%感染者发病--乙型脑炎/大脑炎病死率10~40%，幸存者5~20%有后遗症感染后可获得持久免疫，以中和抗体为主三、微生物学检查法乙脑病毒微生物学检验标本：患者血液、脑脊液、尸检脑组织动物接种：乳鼠脑内接种－－发病细胞培养：原代地鼠肾细胞、鸡胚细胞－－红细胞吸附试验抗原抗体检测：采用免疫标记技术检测标本中抗原采用双份血清检测特异性抗体四、防治原则防治原则灭蚊防蚊：是预防乙型脑炎的重要环节人群免疫：灭活疫苗和减毒活疫苗对象主要为流行区6个月以上10岁以下的儿童在流行前1个月开始，间隔7～10天复种1次，以后每年加强注射一次免疫保护率：超过60%动物宿主的管理：幼猪的免疫接种思考题1.试述在我国流行的虫媒病毒的种类及流行特点。2.试述虫媒病毒的共同特征。3.试述流行性乙型脑炎病毒的致病机制及防治措施。出血热病毒第31章*出血热（Hemorrhagicfever）是一类疾病的统称。共同特征：“3H”症状1.发热（hyperpyrexia）2.出血（hemorrhage）：皮肤黏膜出现瘀点、瘀斑、不同脏器的损害。3.低血压（hypotension）低血压、休克*引起出血热的病毒种类较多，它们分属于不同的病毒科，我国已发现的主要有：汉坦病毒、登革病毒及克里米亚－刚果出血热病毒。汉坦病毒第一节*汉坦病毒于1978年由韩国学者李镐汪等从疫区黑线姬鼠肺组织中分离出，分类：单分子负链RNA病毒目（Mononegavirade）布尼亚病毒科（Bunyaviridae）汉坦病毒属（Hantavirus）汉坦病毒在临床上主要引起两种急性传染病：*肾综合征出血热（HemorrhagicFeverwithRenalSyndrome，HFRS）以发热、出血、肾功能损害和免疫功能紊乱为主要特征。*汉坦病毒肺综合征（Hantaviruspulmonarysyndrome，HPS）以肺浸润及肺间质水肿，呼吸窘迫、衰竭为主要特征。汉坦病毒（Hantavirus)的型别汉滩病毒（Hantaanvirus）HFRS汉城病毒（Seoulvirus）HFRS多布拉伐-贝尔格莱德病毒HFRS（Dobrava-Belgradevirus）普马拉病毒（Puumalavirus）HFRS泰国病毒（Thailandvirus）HFRS希望山病毒（Prospectvirus）？索塔帕拉雅病毒（Thottapalaymvirus）？辛诺柏病毒（SinNombrevirus）HPS中国是世界上HFRS疫情最严重的国家1.流行范围广：除青海和新疆外，其余各省、市、自治区均有病例报告。*传染源和宿主动物广泛、可通过多种途径传播*多为野外感染，主要危害青壮年*缺乏特异有效的治疗药物2.发病人数多：10万人左右/年；占全球总病例数80%以上。3.病死率较高：5%~10%。一、生物学性状1.形态结构病毒体呈圆形或卵圆形，直径75～210nm，有囊膜，囊膜上有突起。病毒核酸为单股负链RNA（-ssRNA），分L、M、S三个片段。四种结构蛋白：核蛋白N、糖蛋白G1、G2和RNA依赖RNA聚合酶（RdRp）汉坦病毒颗粒模型*囊膜糖蛋白G1和G2：分别为70kD和55kD。有中和抗原位点和血凝抗原位点，能刺激机体产生中和抗体，起保护作用，但免疫原性较弱。*核蛋白：50kD。含量高，免疫原性强。氨基端有多个线性抗原位点，对于维持完整核蛋白的立体构象和抗原活性有重要作用；既有T细胞识别的位点，也有中和抗原位点；能刺激机体体液免疫和细胞免疫应答。2.培养特性及实验动物*多种细胞敏感，一般不出现细胞病变，需用免疫学方法检测证实。*易感动物有多种（主要为啮齿动物），但除了小白鼠乳鼠感染后可发病及致死外，其余均无明显症状。*病毒型别据基因序列和抗原性可分为14个型别与人类疾病关系密切的6种血清型是汉滩病毒、多布拉伐-贝尔格莱德病毒、汉城病毒、普马拉病毒、辛诺柏病毒和希望山病毒，我国流行的是汉滩病毒和汉城病毒3.抗原性4.抵抗力*对酸（pH3）和丙酮、氯仿、乙醚等脂溶剂敏感；一般消毒剂如新洁尔灭等也能灭活病毒。*不耐热，56～60℃30分钟可灭活病毒。*紫外线照射（50cm、1小时）可灭活病毒。二、流行病学特征1.传染源和宿主动物*多宿主性，主要为啮齿动物。姬鼠属、家鼠属、林平属、白足鼠属等为主要传染源。*我国主要是黑线姬鼠和褐家鼠；主要存在着姬鼠型（汉滩型）疫区、家鼠型（汉城型）疫区和混合型疫区。汉坦病毒的主要动物宿主和传染源——黑线姬鼠2.传播途径尚未完全确定*动物源性传播：呼吸道消化道破损皮肤*垂直（胎盘）传播*虫媒（螨）传播3.流行季节四季均可发生，有明显的季节性流行高峰*姬鼠型疫区：11～12月、6～7月*家鼠型疫区：3～5月份*混合型疫区：冬、春季均可出现流行高峰中国HFRS宿主动物汉坦病毒型别的分布汉坦病毒循环——鼠间存在着病毒的自然循环，人作为易感宿主偶然进入这个循环就会感染。三、致病性与免疫性三、致病性与免疫性1、致病性汉坦病毒人体人体毛细血管及免疫细胞损伤汉滩病毒、汉城病毒、普马拉病毒多布拉伐-贝尔格莱德病毒HFRS高热、出血、肾脏损害、免疫功能紊乱辛诺柏病毒黑港渠病毒病毒HPS双肺弥漫性浸润，间质水肿，迅速发展为呼吸窘迫、衰竭。三大主症*发热*出血*肾脏损害五期经过*发热期*低血压期*少尿期*多尿期*恢复期1.临床表现：潜伏期短，起病急，发病快流行性出血热的症状潜伏期为5～46天，一般为1～2周。本病典型表现有起病急，有发热（38～40℃）、三痛（头痛、腰痛、眼眶痛）以及恶心、呕吐、胸闷、腹痛、腹泻、全身关节痛等症状，皮肤粘膜三红（脸、颈和上胸部发红），眼结膜充血，重者似酒醉貌。HFRS的部分临床表现:A:结膜充血；B:牙龈出血；C:皮下出血；D:皮肤淤斑。2.发病机理1）汉坦病毒直接作用靶细胞：血管内皮细胞、骨髓巨核细胞、肝细胞、神经细胞、单核细胞2）免疫病理损伤（发病与机体免疫应答密切相关）*Ⅰ型变态反应——早期IgE和组胺↑，嗜碱性粒细胞脱颗粒试验阳性*Ⅲ型变态反应——早期特异性抗体↑，免疫复合物形成，沉积到小血管、毛细血管、红细胞、血小板、肾小球、肾小管基底膜等，补体被激活，促使肥大细胞及受损血小板释放血管活性物质、凝血因子等参与血管扩张和通透性增加的作用，引起血管和各组织的免疫病理损伤。1）人群易感性*普遍易感；*多呈隐性感染；*患者以青壮年为主。3.免疫性2）免疫特点*感染后免疫应答出现早、强；*以体液免疫（中和抗体）为主；*细胞免疫（包括细胞因子）起重要作用；*病后免疫力持久；*强烈免疫应答也参与致病。四、微生物学检查法（一）病毒分离与抗原检测四、微生物学检查：标本病人急性期血清病死者脏器感染动物肺、肾等A549、Vero-E62BS、地鼠肾细胞免疫荧光抗体染色法检病毒抗原（二）血清学诊断：检测病人血清中IgM、IgG抗体的效价及其变化以辅助诊断。五、防治原则1.预防*