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《食品科学》,,淡蓝色,记下用碘量。取碘溶液,用标准硫代硫酸钠标定。滴至淡黄色时加入淀粉溶液,再缓慢滴入硫代硫酸钠至无色,记下硫代硫酸钠的用量。结果与分析霜桑叶中的含氮量为,粗蛋白的含量为,根据试验结果可知霜桑叶的含氮量和蛋白量是较高的。蚕之所以选择桑叶作为食物的来源。可见自然界生物的造化之灵性,从中暗示出人类也可作为营养剂。各种氨基酸含量测定如下表:各种氨基酸含量之和为,与前面所做的凯氏定氮相比要小一些,原因可能是:凯氏定氮中氮的含量由于其他形式氮的存在导致数值偏大;蛋白质水解过程中部分氨基酸被破坏如色氨酸:另外一些不常见的氨基酸未被测出如糖蛋白中的氨基酸;蛋氨酸测出的值为微量。各种氨基酸分析的结果显示,人体中的必须氨基酸基本存在,因此应用霜桑叶作为食物氮源也是可取的。在多糖的测定中多糖的含量为。应用制备法测定多糖的含量,与蒽酮法测定多糖相比,实验步骤较简单,结果相差不大,为以后对多糖的研究带来了方便和准确。同时我们还对多糖进行了成分的定性测定,其中含有葡萄糖、甘露糖、半乳糖、果糖等。在脂类的提取中应用索氏提取法提取的是粗脂含量为。其中包括脂肪、游离脂肪酸、磷脂、脂、固醇、芳香油、某些色素及有机酸等混合物。维生素的测定维生素为每新鲜霜桑叶中含维生素为,比一般蔬菜、水果中的维生素的含量高,这又为我们对开发霜桑叶又提供了有益的启示。结论霜桑叶的蛋白质含量比较高,糖和脂肪的含量都比较低,符合现代生活中高蛋白、低糖、低脂的要求,霜桑叶的维生素含量较高。维生素是人体所必须的维生素,它的缺乏会影响胶原的正常形成。此外,维生素能有效地防止亚硝酸盐等致癌物质的合成,防止正常细胞发生恶变,还可以使异常细胞转变为正常细胞,作为营养增强剂,保持和增强机体健康。人体中的必须氨基酸霜桑叶中都存在。通过我们对以上几方面的分析结果显示,开发利用霜桑叶作为食品添加剂是有广阔前景的。参考文献李杨汉植物学年版高教出版社江苏新医学院编中药大辞典年版,上海人民出版社北京大学生物系生化教研室编生物化学实验指导年版,北京大学出版社王俊丽洋槐花粉营养的研究食品科学,:陈利等酸角及其果露成分分析食品科学,,:李志孝等栀子多糖的分离纯化及其性质生物化学与生物物理学报,,:梁忠岩等长白山松杉、灵芝子实体水溶性多糖的分离鉴定与结构研究生物化学与生物物理学报,,:张龙翔等生化实验方法和技术,高等教育出版社几种食品微生物降解黄曲霉毒素作用的研究朱新贵林捷华南农业大学食品科学系广州华南农业大学博士基金资助项目摘要通过固体表面培养测定黄曲霉毒素以下简写为荧光反应降解圈大小和液体摇瓶培养后测定培养基中残余黄曲霉毒素以下简写为含量,研究了食品上常用的几种微生物,乳酸菌、醋酸菌、面包酵母、酿酒酵母、米曲霉和枯草杆菌的的降解能力。这几种微生物中,枯草杆菌、乳酸菌和醋酸菌的降解能力最强,在液体培养后,可分别被去除、和。枯草杆菌的最适生长温度和也是其降解的最适作用。培成分名称天门冬氨酸苏氨酸丝氨酸谷氨酸脯氨酸甘氨酸丙氨酸半胱氨酸缬氨酸成分名称蛋氨酸异亮氨酸亮氨酸酪氨酸苯丙氨酸赖氨酸组氨酸精氨酸色氨酸含量含量微量霜桑叶各种氨基酸含量表营养卫生,,《食品科学》养基中添加钙或镁离子可以促进枯草杆菌对的去除作用。关键词食品微生物黄曲霉毒素降解是由部分黄曲霉和寄生曲霉产生一类真菌毒素,其强烈的毒性严重危害人们的健康。大量摄入可导致人和动物死亡,长期食用污染的食品可产生慢性肝、肾、肺等器官的病变及肝癌。这两种微生物广泛存在自然界中,尤其多寄生在花生、玉米等碳水化合物和油脂含量高的作物果实或其制品上,在温暖潮湿的条件下,可大量繁殖并产生。的危害具有全球性,年被发现以来,已经受到广泛的重视,人们纷纷研究和采用各种方法来减少的危害。这其中包括对这两种微生物具有抗性的作物选育、改良作物种植、收获、贮藏与加工方式,以及采用各种物理、化学和生物脱毒方法对已经污染的粮食及其产品脱毒等。对脱毒是减少粮食或其产品因污染而造成的损失及危害的补救措施。一些方法可以将降解或去除,而另一些方法则是将其转化为无毒性或毒性很低的其他物质。物理脱毒包括吸附、热处理、射线处理和萃取等;化学脱毒包括酸碱处理、氧化还原处理等;不同方法脱毒效果差异较大,同时也各有其局限性。的生物脱毒主要是采用微生物或其产生的酶来进行脱毒,现已研究发现许多微生物能够或多或少转化,从而降低其毒性。生物脱毒的处理条件相对温和,然而一些微生物可能对脱毒产品的品质产生影响或产生新的毒性。选择既具有脱毒能力又不破坏或较少破坏产品品质的微生物或其酶及相适应处理工艺是实现理想的生物脱毒的关键。食品上常用的一些微生物,如乳酸菌、醋酸菌、面包酵母、酿酒酵母、米曲霉和枯草杆菌等,都是长期使用证明是安全的,某些还赋予食品人们喜欢的、特殊的品质。我们对这些微生物降解的作用进行了研究,以评价其用于脱毒的能力,寻找用于脱毒的安全微生物菌种。材料与方法材料微生物乳酸菌、醋酸菌、面包酵母、酿酒酵母、米曲霉等分别为酸乳厂和调味品厂用于生产的菌株。枯草杆菌,从一种民间发酵豆制品中分离得到,具有较高蛋白质水解活性另报。黄曲霉毒素,采用色谱纯研究方法固体培养及降解能力初步判断培养基为全合成培养基。在培养基凝固前,加入,使其在最终培养基中含量达,培养基凝固后于紫外光下呈现蓝紫色荧光。菌种充分稀释后,在相应培养基上培养能形成单细胞菌落,下培养,经不同培养时间后,在紫外光下观察菌落周围产生的不同于典型荧光颜色的变色圈,这种变色圈的产生是由于分子被转化或菌种产生的代谢物释放到菌落周围而影响的荧光反应,在此将这种变色圈称为荧光反应降解圈简称降解圈。测定降解圈直径与菌落直径之比,依此来初步判定各菌种对的降解能力。液体摇瓶培养及降解能力的研究采用上述培养基液体,各种微生物分别摇瓶培养后,添加,使得培养基中含量达,继续摇瓶培养,然后每取样进行含量测定,以研究培养过程含量的变化。对在上述两种方法中,都表现较高的降解营养卫生《食品科学》,,值乳酸菌醋酸菌面包酵母酿酒酵母米曲霉枯草杆菌表不同培养时间各种微生物对的值时间乳酸菌醋酸菌面包酵母酿酒酵母米曲霉枯草杆菌表不同培养时间各种微生物液体培养液中剩余含量能力菌种,变化条件,继续培养,以确定培养条件对其脱毒的影响。含量的测定方法按照文献介绍的方法进行样品处理和含量测定。结果与讨论不同培养时间几种微生物对的值以上各种微生物在经过、、、和固体表面培养后,其各自的值见表没有降解圈的计为。在培养过程中,乳酸菌、醋酸菌和枯草杆菌的菌落周围逐渐出现明显的降解圈,并且随着培养时间延长,降解圈不断增大;而两种酵母菌和米曲霉菌落周围的降解圈不明显。由于培养过程中菌落直径不断增加,而降解圈的直径没有同比增加,所以在培养后期,几组微生物的值有所下降。在紫外光下能够产生特异的荧光反应,这是对进行定性测定的依据之一。理论上,当分子被转化后,或者介质中出现其他能够掩盖特有荧光物质时,的荧光反应会发生变化。因此本实验中的几种微生物能够使得荧光反应发生变化只是表明这几种微生和有可能转化,并不能排除其代谢物的影响,进一步确证尚需其他实验。此实验提供一种初筛方法。液体培养时几种微生物对的降解作用在培养后,各种微生物达到一定生物量,添加,再继续培养。含量变化见表。从结果可以看出,在几种微生物的培养过程中,都有不同程度的减少。而以乳酸菌和枯草杆菌培养液中含量减少最多,添加后再经过小时培养含量分别减少和,而经过培养含量分别减少和;醋酸菌则分别达到和;其他种微生物培养过程中含量下降相对较少,因此与固体培养时结果基本一致。含量在各微生物培养液中的变化趋势见图。通过以上初步实验,可以看出用于研究的几种微生物中,乳酸菌、醋酸菌和枯草杆菌具有较高的去除能力,同时由于这些微生物都是常用的食品微生物,本身是安全的,可以进一步用于食品或饲料生物脱毒的研究。培养条件对枯草杆菌降解的影响上述实验证明我们所分离的一株枯草杆菌具有较强的去除能力,同时相关研究还发现该菌株蛋白质水解能力强,可使食品或蛋白饲料产生鲜味,但不产生异味,因此较适合于一些食品或饲料的脱毒。本研究发现培养条件对其去除能力有以下影响培养基的影响调整培养基的起始分别为、、、、、,接种培养后,添加使其含量达,继续培养至总培养时间,测定枯草杆菌细胞和含量,结果见表。表不同下培养枯草杆菌的细胞数和剩余含量细胞量含量营养卫生图各种微生物液态培养时含量变化,,《食品科学》离子浓度对照表钙镁离子对枯草杆菌去除作用的影响从表中可以看出对枯草杆菌的生长和去除有显著影响。在时枯草杆菌生长最好,可以看成是其生长最适,此范围去除量最大,因此对去除的影响可以看成通过对细胞量的影响而产生的。培养温度的影响分别在、、、、下、培养,添加,使其含量达,继续培养,使总培养时间达到。各温度条件下,含量见表。从表中可以看出,为枯草杆菌在本研究温度系列中的最适温度,在此温度下,枯草杆菌对的去除作用最强。和影响等在研究黄色短杆菌去除的条件时发现,钙镁离子能明显地促进黄色短杆菌的去除作用,并结合一些络合剂的影响,其结论是钙镁离子在黄色短杆菌降解时是必须的。我们也研究了钙镁离子对枯草杆菌去除的影响,结果见表。培养条件为正常液体培养基摇瓶培养后,分别添加钙镁离子至相应浓度值后,继续培养至总培养时间为。钙镁离子是许多酶类的激活剂或是构成一些酶类活性中心所必需的。在原来培养基的基础上,添加钙镁离子可促进枯草杆菌对的去除作用。添加、和可使的去除量分别提高、和,而添加、和的可使的去除量分别提高、和。结论实验的几种常用食品微生物中,枯草杆菌、乳酸菌和醋酸菌均具有较强的去除能力,同时由于其食用安全性,可以进一步用于食品或饲料的脱毒研究。影响微生物生长的因子也影响脱毒效果,钙镁离子的影响表明微生物的脱毒作用可能是由微生物分泌的酶的作用。参考文献二氧化氯对霉变玉米黄曲霉毒素脱毒效果的研究摘要霉变染有黄曲霉毒素的玉米,用低浓度二氧化氯浸泡,能有效地解除的毒性。比较了二氧化氯作用时间及不同产地产品脱毒效果的差异,对二氧化氯的解毒功效及其使用安全性也作了探讨。张勇江苏如东县卫生防疫站朱宝根南通市正源生物技术研究所表不同温度下培养枯草杆菌的细胞数和剩余含量细胞数含量营养卫生
本文标题:几种食品微生物降解黄曲霉毒素作用的研究
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