四糖尿病的生物化学检测：（一）测定血液中的葡萄糖含量测定

四.糖尿病的生物化学检测：（一）测定血液中的葡萄糖含量测定血糖的方法很多，按其测定原理可分为三类：1.无机化学法：所用试剂均为无机化学试剂氧化亚铜法（又称Folin-Wu法）〖原理〗葡萄糖+还原碱性铜盐（Cu）CuO+磷钼酸钼蓝铁氰化钾法操作简便试剂易得，费用低特异性差谷胱甘肽葡萄糖醛酸尿酸VitC已淘汰。偏高2.有机化学方法：利用糖的羰基与有机试剂反应测糖。Hultmen使用邻甲苯胺试剂（Otoluidine，O-T）测定血糖。〖原理〗血清+冰醋酸+邻甲苯胺（葡糖糖）5羟甲基2呋喃甲醛+邻甲苯胺蓝色的醛亚胺（Schiff碱）3.生物化学法：主要是酶法葡萄糖氧化酶法（GlucoseOxidase，GOD）〖原理〗葡萄糖氧化酶葡萄糖葡萄糖酸+过氧化氢H2O2+4-氨基安替比林+酚O2+有色化合物其颜色深浅同血糖浓度呈正比。过氧化物酶葡萄糖氧化酶法特点：操作简便，特异性较高推荐方法溶血（胆色素0.34mol/L）VitC5mg/L以上左旋多巴（0.5mol/L）谷胱苷肽100mg/L本法第一步是特异反应，第二步特异性差，误差往往发生在反应的第二步。负偏差葡萄糖+ATPG6P+ADPG6P+NADP6-磷酸葡萄糖酸+NADPHNADPH的生成速率与葡萄糖浓度成正比，在波长340nm监测吸光度升高速率，计算血清中葡萄糖浓度。己糖激酶G6PD己糖激酶法〖原理〗己糖激酶法的特点参考方法试剂盒贵轻度溶血脂血、黄疸、VitCNaF、肝素、EDTA、草酸盐但从红细胞中释放出来的有机磷酸酯和一些酶能消耗NADP，有干扰。葡萄糖脱氢酶法无干扰（二）测定尿中葡萄糖临床初判断作为过筛正常人24小时尿糖0.5g尿糖试验（—）1.班氏试剂：CuSO4GluCu＋砖红色2.尿10A：干酶试剂、折光仪比色（三）口服葡萄糖耐量试验(Oralglucosetolerancetest,OGTT）一种葡萄糖负荷试验，了解机体对葡萄糖的调节作用。空腹血糖浓度6～7mmol/L，+OGTTOGTT试验前准备：a试验前三天，每日食物中糖150gb影响试验药物停用3dc试验前病人10～16h未进食d坐位取血5min后饮250ml含75g无水葡萄糖水，以后每隔30min取血一次，共四次，历时2h。306090120150（min）510mmol/L正常人糖耐量受损糖尿病肾糖阈1.正常糖耐量（1）空腹静脉血浆葡萄糖6mmol/L（2）口服葡萄糖后30～60min达高峰，峰值不超过10mmol/L（3）2小时回复到空腹水平。2.糖尿病性糖耐量糖尿病患者由于胰岛素相对和绝对缺乏，对糖负荷的耐受能力降低。空腹血浆葡萄糖浓度7.8mmol/L峰值超过10mmol/L并出现糖尿延迟（2小时后）回复到空腹水平判断指标是服葡萄糖后2小时的血浆葡萄糖值增高。3.糖耐量受损轻度耐量能力下降（1）空腹血浆葡萄糖7.8mmol/L（2）口服葡萄糖后30、60、90min的血浆葡萄糖11mmol/L（3）2h值在8～11mmol/L称为亚临床或无症状的糖尿病1/3恢复正常1/3仍为糖耐量受损1/3明确糖尿病4、影响糖耐量试验的因素年龄饮食劳动应激药物胃肠道功能标本采集葡萄糖测定的方法但糖耐量试验可反映近期体内糖代谢的情况。