XESERIES检测原理

XSeries五分类血液分析仪检测原理目录基本性能检测原理参数的检测原理报警原理误差分析XE-SERIES血液分析仪器基本性能机型XE-2100XT-1800iXS-800iSF-3000速度150t/h80t/h60t/h80t/h闭盖全血200ul150ul------270ul开盖全血130ul85ul20ul170ul预稀释40ul40ul20ul40ulCBC全血/预稀释全血/预稀释全血/预稀释全血/预稀释DIFF全血全血全血/预稀释全血IMI全血---------------NRBC全血---------------RET全血/预稀释(113t/h)---------------检测原理---标本检测流程WBC/BASO:流式原理；NRBC、4DIFF、RET：流式细胞技术和核酸荧光染色技术；IMI：使用射频/直流电技术和流式细胞技术；RBC/PLT利用液流聚焦电阻抗技术；HGB：SLS原理。核酸荧光染色技术：SYSMEX公司采用聚次甲基和垩嗪作为核酸荧光染料，细胞经过特殊溶血素的处理，荧光染料可以快速进入胞浆和胞核对核酸染色，细胞内的荧光染料在633nm激光的激发下产生一定的荧光强度，这种荧光强度与细胞的核酸含量成正相关，荧光染色后，荧光强度大小依次排列顺序为：异型淋巴细胞原始细胞/幼稚粒细胞单核细胞淋巴细胞粒细胞/晚幼红细胞网织红细胞/网织血小板/聚集血小板成熟红细胞/成熟血小板。流式细胞技术待测血样稀释成单个细胞悬液，细胞经过快速特异性核酸荧光染色，在鞘液的约束下，排成单列由流动室的喷嘴喷出，通过测量区的细胞在垂直入射的激光束照射和激发下，产生前向散射光（FSC）、侧向散射光（SSC）、侧向荧光（SFL）。FSC主要反映细胞的大小，SSC主要反映细胞内颗粒物质的大小和多少，SFL主要反映细胞的核酸含量的多少。射频（RF）/直流（DC）电技术RF/DC检测技术，通过直流电阻的变化测定血细胞的大小，并通过射频电阻测定血细胞内的密度。图四显示的是一个白细胞的RF/DC信号。在IMI通道中，RF/DC技术主要用来检测幼稚髓细胞，越幼稚的细胞密度越小。RF信号大小依次顺序是：杆状核粒细胞幼稚粒细胞原始髓细胞造血干祖细胞（包括HPC）。液流聚焦电阻抗技术液流聚焦技术是流式细胞术中的一种技术，利用液体层流将使细胞排成单列通过检测孔，图五中，前鞘流保证细胞单个通过检测孔，避免细胞与细胞重叠通过检测孔；后鞘流避免液体返流，避免细胞随着返流液体再次通过检测孔。利用液流聚焦技术可以使细胞计数结果更加准确，重复性更好。在检测孔，细胞将得到阻抗信号，由于细胞是一个不良导体，细胞越大，阻抗信号越大，阻抗信号反映细胞的大小信息。SLS（十二烷基磺酸钠）法原理：1，红细胞溶解释放血红蛋白；2，改变血红蛋白结构；3，氧化二价铁为三价铁；4，形成SLS-Hb化合物。SLS-Hb在535nm有最大吸收峰，根据朗伯比尔定律将535nm处SLS-Hb的吸光度换算成血红蛋白浓度。SLS法具有无毒的优点，而且与国际参考方法氰化高铁血红蛋白法具有很好的相关性。XE系列试剂英文名称中文名称作用CELLPACK稀释液RBC/PLT/HGB检测CELLSHEATH鞘流液前鞘流、后鞘流STROMATOLYSER-FB嗜碱通道溶血素溶解出嗜碱细胞以外的白细胞为裸核STROMATOLYSER-4DL白细胞分类溶血素溶解红细；在白细胞膜上打孔STROMATOLYSER-4DS白细胞分类染液核酸染色STROMATOLYSER-NR（溶血素）有核红细胞通道溶血素溶解有核红细胞为裸核STROMATOLYSER-NR（染液）有核红细胞通道染液核酸染色SULFOLYSER红细胞溶血素HGB检测STROMATOLYSER-IMIMI通道溶血素溶解成熟白细胞RETSEARCH（II）（稀释剂）网织红细胞通道稀释液RET检测RETSEARCH（II）（染液）网织红细胞通道染液核酸染色白细胞检测原理DIFF通道WBC/BASO通道IMI通道NRBC通道DIFF通道4DL完全溶解红细胞血小板在白细胞膜上打孔4DS对核酸染色纵坐标：侧向荧光（SFL）反映核酸含量横坐标：侧向散射光（SSC）反映细胞内容物复杂程度试剂反应（Ⅰ）试剂反应（Ⅱ）试剂反应（Ⅲ）DIFF通道的重要信息异常细胞：幼稚粒细胞、原始细胞、异型淋巴细胞、有核红细胞、疟原虫抗干扰能力强，WBC更加准确：难溶红细胞、聚集血小板、脂质颗粒异型淋巴细胞，原始细胞和幼稚粒细胞异型淋巴细胞：病毒、原虫等刺激下，胞体体增大、胞质增多、嗜碱性增强，细胞核母细胞化。散点图上荧光强度最强幼稚粒细胞：RNA的合成随着细胞的程度而逐渐减少，即细胞越幼稚，RNA越多，散点图上荧光强度越高原始细胞：一般情况下，五种白细胞不能正常分类，时OTHER区域一般为原始细胞幼稚粒细胞异常淋巴嗜酸中性单核淋巴嗜碱疟原虫散点图散点图特征：嗜酸性粒细胞群向中性粒细胞靠拢有核红细胞晚幼红细胞核固缩，细胞简单，因此在淋巴细胞的正下方。难溶红细胞和脂质颗粒、血小板聚集难溶红细胞表现为白细胞群下方有大量散点出现，并且部分显示为淡兰色（和白细胞相同的颜色）脂质颗粒在散点图上表现为胡须状当出现难溶红细胞和脂质颗粒的时候，WBC-BASO受到干扰，不准确。此时WBC-DIFF利用核酸荧光染色技术可以排除这些干扰，因此比较准确聚集的血小板在两个通道内都显示在GOHST区域，不会影响WBCWBC/BASO通道STROMATOLYSER-FB完全溶解红细胞血小板除嗜碱细胞以外的白细胞溶解为裸核嗜碱细胞保持原状纵坐标：前向散射光（FSC）反映细胞大小横坐标：侧向散射光（SSC）反映细胞内容物复杂程度嗜碱其他白细胞IMI(Theimmaturemyeloidinformation)通道STROMATOLYSER-IM溶解红细胞血小板、成熟白细胞粒系幼稚细胞保持原状纵坐标：射频（RF）反映细胞密度横坐标：直流电（DC）反映细胞大小中幼粒细胞晚幼粒细胞早幼粒细胞原始细胞杆核红细胞检测原理RBC/PLT通道RET通道NRBC通道RBC/PLT通道双鞘流阻抗法浮动界标RDW-SD假设峰值高度为100%，在20%频率水平上的分布宽度即为RDW-SD。单位用fL表示。RDW-CV点L1和L2在总分布区域中的出现频率为68.26%，使用下列方程计算RDW-CV=（L2-L1）/（L2+L1）RET/PLT-O通道RETSEARCH（II）稀释剂稀释标本RETSEARCH（II）染液对核酸染色纵坐标：前向散射光（FSC）反映细胞大小横坐标：侧向荧光（SFL）反映核酸含量LFRMFRHFRWBCRBCPLT疟原虫核酸含量略少于低荧光强度的网织红细胞NRBC通道NR溶血素完全溶解红细胞血小板白细胞保持原状有核红细胞溶解为裸核NR染液对核酸染色纵坐标：前向散射光（FSC）反映细胞大小横坐标：侧向荧光（SFL）反映核酸含量NRBCWBC修正WBCEoBaMoNeLyNRBCNRBC扣除扣除修正WBC修正分类扣除血小板检测原理RBC/PLT通道RET通道RBC/PLT通道双鞘流阻抗法浮动界标PDW假设峰值高度为100%，在20%频率水平上的分布宽度即为PDW。单位用fL表示。P-LCR由12fL界标得到的巨型血小板的比值。计算时，将固定界标与高界标之间的粒子数，同低界标与高界标之间的粒子数相比而得到一个比值。RET/PLT-O通道PLT-I,低可信度PLT-O,低可信度PLT计数无效PLT-I报告PLT-O报告NoNoYesYesPLT-I向PLT-O转换规则PLT-I,低可信度PLT-O,低可信度PLT计数无效PLT-I报告PLT-O报告NoNoYesYesPLT-I由PLT直方图获得PLT-O由RET散点图获得报警原理复检规则SuspectabnormalIP信息的来源散点图直方图SFLSSCFSCSSCRFDCFSCSFLFSCSFLDIFFWBC/BAIMINRBCWBC报警怀疑/异常RETRBC_DCRBC/RET报警怀疑/异常DIFFPLT_DCRBC_DCIMIRET(Plt-O)PLT报警怀疑/异常IP信息解释白细胞Abnormal报警项目中文信息来源WBCAbnScattergramNRBCAbnScattergramNeutropeniaNeutrophiliaLymphopeniaLymphocytosisMonocytosisEosinophiliaBasophiliaLeukocytopeniaLeukocytosisNRBCpresent白细胞散点图异常有核红细胞散点图异常中性粒细胞减少中性粒细胞增多淋巴细胞减少淋巴细胞增多单核细胞增多嗜酸细胞增多嗜碱细胞增多白细胞总数减少白细胞总数增多出现有核红细胞DIFF/BASO散点图NRBC散点图NEUT#1.00x109/L(or%setting)NEUT#11.00x109/L(or%setting)LYMPH#0.80x109/L(or%setting)LYMPH#4.00x109/L(or%setting)MONO#1.00x109/L(or%setting)EO#0.70x109/L(or%setting)BASO#0.20x109/L(or%setting)WBC2.50x109/LWBC18.00x109/LNRBC%2%Ne/EoLy/Ne2Lym/GstLy/Mo2Ly/Mo2Ly/BaMo/Ne1Ne/GstMo/Eo白细胞散点图异常细胞族群之间边界不清边界颗粒达到一定数量触发规则Gst/NLMEBas/NLMENLME:不包括BASO有核红细胞散点图异常NRBCWBCGOST1Pltclumps细胞族群之间边界不清边界颗粒达到一定数量触发规则IP信息解释白细胞Suspect报警项目中文信息来源Blasts?ImmatureGran?LeftShift?AtypicalLympho?AbnLympho/L-Blasts?NRBC?RBCLyseresistance?原始细胞？幼稚粒细胞？核左移？异型淋巴细胞？异常淋巴/原始淋巴细胞？有核红细胞？红细胞溶解不全？DIFF,IMI散点图DIFF,IMI散点图DIFF,IMI散点图DIFF,IMI散点图DIFF,IMI散点图DIFF散点图DIFF,WBC/BASO散点图原始细胞？触发规则：在散点图上特定的区域，散点达到一定数量。原始细胞中幼粒细胞晚幼粒细胞早幼粒细胞原始细胞杆核幼稚粒细胞？触发规则：在散点图上特定的区域，散点达到一定数量。幼稚粒细胞中幼粒细胞晚幼粒细胞早幼粒细胞原始细胞杆核核左移？触发规则：在散点图上特定的区域，散点达到一定数量杆核中幼粒细胞晚幼粒细胞早幼粒细胞原始细胞杆核异型淋巴细胞？触发规则：在DIFF散点图上特定的区域，散点达到一定数量and在IMI通道IG和BLAST区域无散点异型淋巴细胞中幼粒细胞晚幼粒细胞早幼粒细胞原始细胞杆核异常淋巴/原始淋巴细胞？触发规则：在DIFF散点图上特定的区域，散点达到一定数量and在IMI通道IG和BLAST区域无散点异常淋巴中幼粒细胞晚幼粒细胞早幼粒细胞原始细胞杆核有核红细胞？触发规则：在DIFF散点图上特定的区域，散点达到一定数量有核红细胞红细胞溶解不全？触发规则：在DIFF散点图上特定的区域，散点达到一定数量orWBC-BASO/WBC-DIFF比例大于阈值难溶红细胞WBC-BASOWBC-DIFFIP信息解释红细胞Abnormal报警项目中文信息来源RBCAbnDistributionDimorphicPopulationRETAbnScattergramReticulocytosisAnisocytosisMicrocytosisMacrocytosisHypochromiaAnemiaErythrocytosis红细胞分布