微生物学实验七

枯草杆菌石炭酸复红染色图片枯草杆菌吕氏美蓝染色图片实验7放线菌的形态观察霉菌的形态观察一实验目的1、学习并掌握观察放线菌、霉菌形态的基本方法2、初步了解放线菌、霉菌的形态特征一实验目的背景知识•（一）放线菌的菌落形态放线菌的菌落由菌丝体组成。放线菌菌丝纤细，生长缓慢，相互交错，所以形成的菌落较小而且质地致密，表面干燥、多皱、“绒状”。放线菌基内菌丝长在培养基内，菌落与培养基结合较紧，不易挑起。幼龄菌落因气生菌丝尚未分化成孢子丝，所以不易与细菌菌落相区分。当放线菌形成大量的分生孢子而布满菌落表面后，形成表面呈“细粉状”或“颗粒状”的典型放射状菌落。由于放线菌的菌丝和孢子常产生各种色素，所以菌落正反两面有时会呈现不同色泽。二实验材料•菌种：GHSS-Y•盖玻片、载玻片、显微镜、解剖刀、镊子、解剖针、石炭酸复红或美蓝染液。三实验步骤•1菌落形态及菌苔特征：观察菌落的表面形状、大小、颜色（菌丝、孢子）和边缘、在基质上着生紧密与否2个体形态观察--PlanIPlanII（菌丝直径孢子丝形状）注意事项•印片过程中，用力适中，不要错动，水洗时水流应缓慢，以免破坏孢子丝形态。实验报告•菌落或菌苔特征描述、绘图一实验目的•1.观察霉菌菌落形态。•2.学习并掌握霉菌的制片方法。•3.观察霉菌个体形态及各种无性孢子及有性孢子的形态。背景知识—菌落形态较大、质地较疏松，颜色各异•由于霉菌的菌丝较粗而长，因而霉菌的菌落较大，有的霉菌的菌丝蔓延，没有局限性，其菌落可扩展到整个培养皿，有的种则有一定的局限性，直径1-2厘米或更小。菌落质地一般比放线菌疏松，外观干燥，不透明；菌落与培养基的连接紧密，不易挑取；菌落正反面的颜色和边缘与中心的颜色常不一致。•霉菌的菌丝。构成霉菌营养体的基本单位是菌丝。菌丝是一种管状的细丝，把它放在显微镜下观察，很像一根透明胶管，它的直径一般为3-10微米，比细菌和放线菌的细胞约粗几倍到几十倍。菌丝可伸长并产生分枝，许多分枝的菌丝相互交织在一起，就叫菌丝体。•在固体基质上生长时，部分菌丝深入基质吸收养料，称为基质菌丝或营养菌丝；向空中伸展的称气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。•根据菌丝中是否存在隔膜，可把霉菌菌丝分成两种类型：无隔膜菌丝和有隔膜菌丝。无隔膜菌丝中无隔膜，整团菌丝体就是一个单细胞，其中含有多个细胞核。这是低等真菌所具有的菌丝类型（如毛霉、根霉）。有隔膜菌丝中有隔膜，被隔膜隔开的一段菌丝就是一个细胞，菌丝体由很多个细胞组成，每个细胞内有1个或多个细胞核（如青霉、曲霉）。•霉菌有着极强的繁殖能力，而且繁殖方式也是多种多样的。虽然霉菌菌丝体上任一片段在适宜条件下都能发展成新个体，但在自然界中，霉菌主要依靠产生形形色色的无性或有性孢子进行繁殖。孢子有点像植物的种子，不过数量特别多，特别小。霉菌繁殖方式（一）无性孢子1、厚垣（yuán）孢子2、节孢子3、分生孢子4、孢囊孢子（二）有性孢子1、卵孢子2、接合孢子3、子囊孢子子囊果类型：闭囊壳、子囊壳、子囊盘。毛霉菌Mucor孢囊孢子（Sporangiospore）（Conidium）黄曲霉Aspergillusflavus青霉菌Penicillum青霉的分生孢子头厚垣（yuan）孢子节孢子二、材料与器材•曲霉、毛霉、青霉和根霉永久制片；霉菌SWXX、CCSJ、LSG-2菌株培养物•平皿、吸管、盖玻片、玻璃涂棒、载玻片、解剖针、解剖刀、显微镜、乳酸石炭酸棉蓝等。三、实验内容及步骤•（一）菌落特征的观察•用肉眼观察生长在琼脂平板上的各种霉菌菌落，并根据下列要求对每种霉菌的菌落特征加以描述。•1.菌落的大小：局限生长或蔓延生长，菌落的直径和高度。•2.菌落的颜色：正面和背面的颜色，培养基的颜色变化。•3.菌落的形态：”绒毛状”、”棉絮状”、”网状”、疏松或紧密、同心轮纹、放线状的皱褶等。（二）用显微镜观察霉菌装片。•1）毛霉和黑根霉的孢子的形状、大小、孢子囊、中轴体的形状，有无假根和匍匐菌丝。•2）曲霉的分生孢子的形状、大小、顶囊的形状、小梗排列、隔膜。•3）青霉的分生孢子的形状、大小、小梗的排列方式，菌丝的隔膜。（三）制作霉菌装片并观察其个体形态。•1.直接制片法观察（1）制片：在干净的载玻片上加一滴乳酸石炭酸棉蓝染液，用解剖针从菌落边缘处取小量带有孢子的菌丝置于液体中，再小心地把菌丝放开，去掉培养基，然后用盖玻片盖上，注意不要产生气泡。（省略酒精和水浸润，洗涤）（2）镜检：•菌丝体经制片后可用低倍或高倍镜观察。在观察时要注意菌丝直径的大小，菌丝体有无隔膜，营养菌丝有无假根，无性繁殖或有性繁殖时形成的孢子种类及着生方式。各种霉菌都有其特征性的特化结构。注意事项•取菌丝或孢子等样品时应小心操作，尽量减少菌丝断裂及形态破坏。•盖盖玻片时尽量避免产生气泡。•注意无菌操作，取样量不宜太大。•孢子数量巨大，请小心操作，皿盖敞开时间尽可能短，避免孢子四处飞散。六、实验报告•1、分别绘青霉(Penicilliumsp.)、根霉（Rhizopussp.）、霉菌SWXX菌株（或霉菌CCSJ菌株）、霉菌LSG-2菌株的个体形态图，并注明各部分名称及简单描述。思考题•显微镜下如何区分放线菌的基内菌丝和气生菌丝•你认为该如何区分放线菌和霉菌。•曲霉和根霉在形态特征上有何显著区别。