LC-MS农产品农药检测

LC/MS农药等同时分析法2（农产品）1、分析对象化合物参照附表2、设备液相色谱-质谱联用仪（LC/MS）或液相色谱-串联质谱（LC/MS/MS）3、化学试剂除了下面试剂之外，还需总则3中列出的试剂。各种农药等标准品各农药等要求纯度明确。4、试验溶液的配制方法1）提取（1）谷类、豆类以及种子类试样10.0g中加入20ml水，放置15分钟。再加入50ml乙腈，均质之后，抽滤。在滤纸残留物中加入20ml乙腈，均质之后，抽滤。合并两次滤液，用乙腈定容至100ml。取20ml提取液，加入10g氯化钠和0.01mol/L盐酸20ml，振荡15分钟。静置之后弃去分离的水层。十八烷基（octadecylsilyl）化硅胶小型柱（silicagelminicolumn）（1.000mg）中注入10ml乙腈，弃去流出液。在此柱上注入上述乙腈层，再注入2ml乙腈，取全溶出液，加入无水硫酸钠脱水，滤出无水硫酸钠之后，在40℃以下条件浓缩滤液，除去溶剂。在残留物中加入丙酮：三乙胺：正己烷（20：0.5：80）混合液2ml进行溶解。（2）水果、蔬菜、中草药、茶和啤酒花水果、蔬菜、中草药的取样量为20.0g。分析茶和啤酒花时，称取5.00g，加入20ml水，放置15分钟。样品中加入50ml乙腈，均质之后，抽滤。在滤纸残留物中加入20ml乙腈，均质之后，抽滤。合并两次滤液，用乙腈定容至100ml。取20ml提取液，加入10g氯化钠和0.01mol/L盐酸20ml，进行振荡。静置之后弃去分离的水层。在乙腈层中加入无水硫酸钠脱水，滤出无水硫酸钠之后，在40℃以下的条件下浓缩滤液，除去溶剂。在残留物中加入丙酮：三乙胺：正己烷（20：0.5：80）混合液2ml进行溶解。2）精制硅胶小型柱（500mg）中依次注入甲醇和丙酮各5ml，弃去流出液，注入正己烷10ml，弃去流出液。柱中注入步骤1）中提取的溶液之后，注入丙酮：三乙胺：正己烷（20：0.5：80）混合液10ml，弃去流出液。用2ml丙酮：甲醇（1：1）混合液清洗装有步骤1）中提取溶液的容器。向硅胶小型柱中注入上述洗液，继续注入18ml丙酮：甲醇（1：1）混合液，溶出液在40℃以下的条件下浓缩，除去溶剂。残留物用甲醇溶解，定容4ml作为试验溶液。5、检量线的制作分别配制各种农药等标准品的丙酮溶液，经混合之后，配制含有适当浓度范围内几个浓度点的各种农药等的甲醇溶液。各取5μL注入到LC/MS或LC/MS/MS中，利用峰高法和峰面积法制作检量线。6、定量将5μL试样溶液注入到LC/MS或LC/MS/MS中，利用5个检量线求出其含量。7、确认试验利用LC/MS或LC/MS/MS进行确认。8、测定条件柱：十八烷基（octadecylsilyl）化（silicagel）（粒径3-3.5μm）,内径2-2.1mm，长度150m柱温：40℃流动相：A液和B液的比例如下表所示。流速：0.20mL/分A液：5mmol/L醋酸铵水溶液B液：5mmol/L醋酸铵甲醇溶液时间（分）A液%B液%08515160403.56040650508455517.559530595308515离子化模式：ESI主要离子（m/z）：参照附表保留时间的估计：参照附表9、定量界限参照附表，附表为测定界限（ng）实例。10、注意事项1）试验法的概要用乙腈提取样品中的各种农药，盐析方法除去水分之后，水果和蔬菜直接利用硅胶小型柱精制，谷类、豆类和种子类利用十八烷基（octadecylsilyl）化硅胶小型柱（silicagelminicolumn）进行精制之后，再利用硅胶小型柱精制，最后两者均用LC/MS或LC/MS/MS测定和确认。2）注意点（1）附表列出适用于本法的化合物，按五十音图顺序进行排列。所列化合物可能含有不适合用本法的代谢物等其他化合物。保留时间不同的异性体在化合物名栏中另外标注。（2）本法并不保证附表中所有化合物的同时分析。由于化合物之间可能存在相互作用而分解和干扰测定等现象，因此，有必要先对分析对象的化合物组合进行验证。（3）加入到乙腈提取液的氯化钠（10g）过量时，可减量，但应加入充分饱和量。由于所分析农药极性较高，因此，需要充分振荡之后溶解氯化钠。（4）采用氮吹方法缓慢进行浓缩和完全去除溶剂的操作。（5）有些农药难溶于丙酮：三乙胺：正己烷（20：0.5：80）混合液，用硅胶小型柱精制时，清洗操作之后，用2ml丙酮：甲醇（1：1）混合液清洗分析柱。（6）根据LC/MS或LC/MS/MS的灵敏度，用甲醇稀释试样溶液。（7）甲醇溶液中可能存在不稳定的农药等物质，应在配制试液后迅速进行测定。用于检量线制作的溶液应临用时配制。不应在常温自动制样盒中长时间放置试样溶液。（8）为获得正确的测定值，也可使用Matrix添加标准溶液或标准添加法。（9）定量限与使用设备、试验溶液的浓缩倍数和试验溶液注入量等有关，因此，可根据需要选择最适条件。