8灌中王余永-动物细胞融合与单克隆抗体

2.2动物细胞工程2.2.1动物细胞培养和核移植技术主编：灌云高级中学王余永一、考纲要求动物的细胞培养和核移植技术A二、本节重要知识点1．动物细胞培养的过程、条件及应用；2．动物体细胞核移植技术克隆动物的过程，应用前景；三、知识建构（一）本节知识体系1．动物细胞培养的过程经历了哪几个阶段？动物器官单个细胞培养接触抑制培养2.体细胞核移植的概念：（二）问题的归纳与总结植物组织培养与动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞的增殖培养基（半）固体、营养、植物激素液体、营养、动物血清培养目的快速繁殖，培育无病毒植株。获得细胞的产物等结果培养成植株培育成细胞系（株）（三）课堂典型题例1.为了使用于培养的动物组织细胞分散开以便配制成一定浓度的细胞悬浮液，选取来的动物组织应选用下列哪种物质处理A.胃蛋白酶B.胰蛋白酶C.盐酸D.胰脂肪酶[解析]在动物组织细胞的间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，它们将细胞网络起来形成具有一定的弹性和韧性的组织和器官，而弹性纤维易被胰蛋白酶在中性略偏碱性环境下催化分解，而胃蛋白酶在pH为1.8左右催化效率最高，此环境动物细胞被破坏。[答案]B2.下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是体细胞核去核卵细胞核移植细胞发育胚胎动物体剪碎酶酶A.培养基成分不同B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株[解析]考查动物细胞培养与植物组织培养的主要区别。动物细胞培养与植物组织培养有许多相似之处，也有许多不同点。其主要不同点是它们的培养基的成分不同。动物细胞培养的培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐和维生素，另外还有动物血清。植物组织培养所需要的培养基包含植物生长和发育的全部营养成分，如矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素和有机添加物，没有动物血清。[答案]A3、一只羊的卵细胞转换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果生下了一只羊羔，这种克隆技术具有多种用途，但是不能A、有选择地繁殖某一性别的家畜B、繁殖家畜中的优秀个体C、用于保存物种D、改变动物的基因型[解析]生物的各种性状是由遗传物质（DNA）控制的，由细胞核内的DNA控制的遗传叫细胞核遗传。由细胞质（主要存在于线粒体、叶绿体）内的DNA控制的遗传叫细胞质遗传。目前的克隆技术是将一个体细胞核植入一个去核的卵细胞，经过试管培养一段时间后再移入另一个体的子宫内发育、分娩的技术，通过该技术，能够保持新的优良性状，能够保持性别不变，也能够用于保存物种，但不能改变动物的基因型，这是因为基因型的改变是通过动物的有性生殖（减数分裂）完成的。答案：D四、课堂训练题选择题1、下列关于动物细胞培养的叙述中，正确的是（）A.动物细胞培养选用的培养材料大多是动物的受精卵细胞B.动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等C.动物细胞培养过程中要用胰蛋白酶处理使细胞分散D.“海拉”细胞系在实验室中被广泛传代使用是因为其遗传物质保持了长时间的稳定2、在进行动物细胞培养时，通常选用的培养材料是（）A、衰老退化的动物组织细胞B、成熟动物个体的体细胞C、动物的受精卵D、动物胚胎或幼龄动物个体的细胞3、下列动物细胞中，恢复其全能性相对较容易的是（）A、神经细胞B、骨细胞C、囊胚期细胞D、肝细胞五、能力提高训练（一）单项选择题1.下列关于动物细胞培养的有关叙述中正确的是A.细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中B.动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等C.动物细胞培养的目只是获得大量的细胞分泌蛋白D.动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶处理2.用于核移植的供体细胞一般都选用A.受精卵B.传代10代以内的细胞C.传代10~50代以内的细胞D.处于减数分裂第二次分裂中期的次级卵母细胞3.科学家将雌黑鼠乳腺细胞的细胞核移入白鼠去核的卵细胞内，待发育成早期胚胎后移植入褐鼠的子宫，该褐鼠产下小鼠的体色和性别是A．黑、雌B．褐、雌C．白、雄D．黑、雄4.生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成为“复生”野驴的方法是A.将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体B.将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体C.取出野驴的体细胞的细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，再经胚胎移植孕育培养成新个体D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体5、在动物细胞培养过程中，下面哪种物质不是必需的（）A、单糖B、核苷酸C、氨基酸D、无机盐6.在动物细胞培养过程中，出现遗传物质改变的细胞是()A．细胞系B．细胞株C．原代细胞D．传代细胞7.下列有关细胞培养的叙述中错误的是()A.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织B.将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液D.动物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞会衰老死亡8．贴壁细胞的分裂方式属于A、无丝分裂B、有丝分裂C、减数分裂D、增殖（二）多选题9.培育克隆牛的过程中，如果供体细胞来自同一头牛，培育出的这些个体在性状上也不完全相同，分析其原因，下列说法正确的是A．性状变异可由环境条件引起B.基因可能会发生突变C.受体细胞的细胞质基因不同D.细胞核基因发生了重组10、下列动物细胞工程技术利用了细胞膜的流动性的原理的是A、动物细胞培养B、动物细胞融合C、核移植D、胚胎移植（三）非选择题11、为了大力发展我国的肉牛和奶牛养殖业，科学家们在育种途径上进行了大胆探索，并取得了初步成果。材料一2002年1月中旬到2月中旬，中国自主完成的首批成年体细胞克隆牛在山东曹县五里墩陆续降生。克隆牛有3个母亲，A牛提供细胞核即供体细胞，B牛提供去除细胞核的卵细胞即受体细胞，两种细胞在电脉冲的刺激下融合之后，通过细胞分裂形成早期胚胎，再将这个胚胎植入C牛子宫内。（1）培育出的克隆牛几乎就是牛复品，这是因为控制牛性状遗传的物质主要存在于中。（2）如果多个供体细胞来自同一头牛，培育出的这些个体在性状上也不完全相同，分析其原因，下列哪些叙述是正确的（）A、性状变异可由环境条件引起B、基因可能会发生突变C、受体细胞的细胞质基因不同D、细胞核基因发生了重组材料二在克隆技术出现之前，育种工作者已经开始采用胚胎分割移植方法尽快繁殖更多的优质牛，这种育技术的主要步骤是：将经过人工授精得到受精卵在试管内培养到8个细胞胚胎时，进行胚胎分割，均分为4份，再分别移植到多头母牛的子宫中发育，分娩，就能得到多头所需要的小牛。（3）胚胎分割移植要在受精卵培养到8个细胞的卵裂期进行，其主要原因：。（4）通过胚胎分割移植培育出的这些小牛，其性别表现为（）A、雌雄的可能性占50%B、全为雌性或全为雄性C、全为雌性D、全为雄性（5）通过体细胞克隆技术培养出的小牛，其性别则取决于。这样，人们就可以根据需要，有目的控制小牛的性别。12.最近，科学家利用猪的动脉血管以及能够模拟胚胎环境的新型生物反应器，成功的在实验室内培育出新的动脉血管。这种培养新血管的技术可能需要回答：（1）容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自。（2）容器A的动物器官或组织首先要进行的处理是，然后用酶处理，这是为了使细胞分散开。这样做的目的是。（3）培养首先在B瓶中进行。瓶中的培养基成分有等。在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这是培养到第代，到这时的培养称为。（4）为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用处理，然后配置成，再分装。（5）在C瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞全部死亡。原因是。图4-3-1答案：课堂训练题1、C2、D3、C能力提高训练1、D2、D3、A4、C5、B6、A7、D8、B9、ABC10、BC11、（1）A（或供核牛）细胞核（2）ABC（3）此时不未出现细胞分化（4）B（5）供体细胞（或提供细胞核的一方）12.（1）动物胚胎或幼年动物的器官组织（2）剪碎胰蛋白使每个细胞能与培养液接触（3）葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清10原代培养（4）胰蛋白酶细胞悬浮液（5）细胞没有发生癌变