CBAH7N9应用简介

BDCBA技术在H7N9禽流感中的应用BDApplicationSpecialist鲍梅艳[e-mail]人类面临新一轮禽流感病毒侵袭-H7N9典型的病毒性肺炎，起病急，病程早期均有高热（38°C以上）、咳嗽等呼吸道症状起病5-7天出现呼吸困难、重症肺炎并进行性加重，部分病例可迅速发展为急性呼吸窘迫综合症并死亡时间：2013.4.26地点：杭州H7N9新闻发布会人物：李兰娟及其研究团队事件：解读关于H7N9禽流感的研究论文，近日发表于国际医学期刊《柳叶刀》上结论：①文章发现重症感染患者中普遍存在“细胞因子风暴”现象，这种现象导致了肺被病毒大量侵蚀，从而揭露了H7N9病毒“嗜肺”的原因。②李兰娟针对重症感染患者存在的“细胞因子风暴”现象，创造性地应用人工肝技术清除患者体内堆积的炎症因子，可有效抑制炎症反应，帮助重症患者渡过器官功能衰竭难关，临床治疗效果突出。H7N9的“细胞因子风暴”现象BDCBA(CytometricBeadsArray)productsItemDescriptionContent551811HumanInflammatoryCytokineKitIL-8,IL-1β,IL-6,IL-10,TNF,andIL-12p70炎症因子552990HumanChemokineKitIL-8(CXCL8),RANTES,MIG,MCP-1,andIP-10趋化因子CellSignalingIntroduction:CellularImmuneResponsesCellularCommunicationandSignalingCytokines&GrowthFactorsELISA技术缺陷样本用量大单指标检测操作费时费力系统操作误差大标准曲线人为误差大酶-底物背景干扰例：采用ELISA技术检测人外周血中30个指标PBMCsinblood30ELISAsamplesIL-2IL-4IL-5IL-6IL-7IL-8IL-1βIL-10IP-10IL-9VEGFMIP-1αAngiogeninbFGFFasLEotaxinG-CSFGM-CSFRANTESIL-3OSMLT-αMCP-1TNFMIP-1βIL-12p70IL-13IFN-γMIGIgEBDCBAPBMCsinblood例：采用BDCBA技术检测人外周血中30个指标BDCBA技术：ELISA的终结者高通量ELISABDCBAAssay一、什么是BD微球阵列分析技术（CBA技术）?BD微球阵列分析技术(CBA技术)是流式细胞仪的著名生产厂家美国BD公司推出的以携带不同荧光强度的微球为载体，同时对微量、液相样本中多种可溶性蛋白成分（炎症因子、趋化因子等）进行定量分析的流式检测方法。二、CBA原理++AnalyteofInterestFluorescentDetectorAb-PECaptureBeadCaptureAb一系列荧光强度不同的微球包被有特异性捕获抗体，与待测样本孵育后，形成“三明治”复合物。操作步骤：简单易行！CBA原理Th1/Th2kit:IL-2，IL-4,IL-5,IL-10,TNFα,IFNγIL-2IL-4IL-5IL-10TNFaIFNr二、CBA和ELISA的对比BDCBA样本用量少，多指标检测操作方便，节省时间同一样本同时检测，误差小，精密度高标准曲线自动测定，专用软件自动计算，检测范围宽，灵敏度高无酶-底物背景干扰ELISA样本用量大，单指标检测操作费时费力系统操作误差大标准曲线人为误差大酶-底物背景干扰四、HumanTh1/Th2CytokineCBA–标准曲线5000pg/ml2500pg/ml1250pg/ml625pg/ml312pg/ml80pg/ml20pg/mlIL-2IL-4IL-5IL-10TNF-IFN-IL-2IL-4IL-5IL-10TNF-IFN-Curve-FittingModel:4-ParameterLogisticy=((A-D)/(1+(x/C)^B))+DA=1.26B=5.00C=3.60D=3.89R^2=0.9973Curve-FittingModel:4-ParameterLogisticy=((A-D)/(1+(x/C)^B))+DA=1.29B=4.24C=3.43D=4.33R^2=0.9991Curve-FittingModel:4-ParameterLogisticy=((A-D)/(1+(x/C)^B))+DA=1.34B=4.11C=3.42D=4.45R^2=0.9987Curve-FittingModel:4-ParameterLogisticy=((A-D)/(1+(x/C)^B))+DA=1.31B=3.86C=3.30D=4.45R^2=0.9980Curve-FittingModel:4-ParameterLogisticy=((A-D)/(1+(x/C)^B))+DA=1.31B=3.77C=3.37D=4.77R^2=0.9997Curve-FittingModel:4-ParameterLogisticy=((A-D)/(1+(x/C)^B))+DA=1.33B=4.08C=3.24D=4.42R^2=0.9987TNF-a110100100010000110100100010000Concentration(pg/ml)FL2MFIIFN-g1101001000110100100010000Concentration(pg/ml)FL2MFIIL-10110100100010000110100100010000Concentration(pg/ml)FL2MFIIl-4110100100010000110100100010000Concentration(pg/ml)FL2MFIIL-5110100100010000110100100010000Concentration(pg/ml)FL2MFIIl-2110100100010000110100100010000Concentration(pg/ml)FL2MFIFCAPArrayTMsoftware五、BDCBAKit及分析软件Standard+AssayDiluteCaptureBeadsInstrumentCalibratorsWashBufferPE-DetectionReagent操作手册！！强大的技术团队-选择BDPharmingen，选择无忧！三、产品优势BDCBA可实现快速、高通量细胞因子检测，更快发文章通过检测血液中的细胞因子含量，辅助指导临床治疗（多家三甲医院已成功开展此项目）操作简单，更有手把手的技术指导没有流式仪器的客户，可把样本送交我司进行免费检测（我司独资拥有BDAccuriC6流式细胞仪）三、产品优势操作简单，更有手把手的技术指导没有流式仪器的客户，可把样本送交我司进行免费检测三、BD的宗旨:帮助人类健康生活!