DNA重组技术的基本工2

句容三中高二生物教学案选修3（选修班）11．1DNA重组技术的基本工具（第二课时）班级姓名自主评价：2．DNA连接酶（分子缝合针）（1）种类T4DNA连接酶：E·coliDNA连接酶：（2）作用：（3）结果：3．基因进入受体细胞的载体（分子运输车）（1）作用：（2）条件：（1）（2）（3）（3）种类：、、质粒：是一种的、、，并具有能力的。重难点突破：1．把目的基因与质粒DNA缝合时，中间的碱基对靠连接起来，而两链上的磷酸、脱氧核糖则在的作用下连接起来。质粒是基因操作中经常用的。2．两种DNA连接酶的比较：（1）相同点：都缝合键。（2）区别：E·coliDNA连接酶只能将双链DNA片段互补的之间连接起来，而不能将双链DNA片段之间进行连接；而T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的，又可以“缝合”双链DNA片段的。但连接平末端的之间的效率较。3．限制酶与DNA连接酶的比较。（1）区别作用应用限制酶使特定部位的断裂用于DNA连接酶在DNA片段之间重新形成用于由于氢键是分子间作用力，其断裂与重新形成均与限制酶、DNA连接酶无关。（2）两者之间的关系可表示为：例题1．不属于质粒被选为基因运载体的理由是（）A．能复制B.有多个限制酶切点C．具有标记基因D．它是环状DNA限制酶DNA连接酶句容三中高二生物教学案选修3（选修班）22．质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是（）①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A．①③⑤⑦B．①④⑥C．①③⑥⑦D．②③⑥⑦3．人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是A．提高受体细胞在自然环境中的耐药性（）B．有利于对目的基因是否导入进行检测C．增加质粒分子的分子量D．便于与外源基因连接4．下列属于基因运载体所必须具有的条件是（多选）（）A．具有某些标志基因B．具有环状的DNA分子C．能够在宿主细胞内复制D．具有多种限制性内切酶5．下列哪些可作为基因工程技术中常用的基因运载工具（多选）（）A．大肠杆菌B．质粒C．动物病毒D．线粒体6．在基因工程中通常所使用的质粒是（）A．细菌的染色体DNAB．细菌染色体外的DNAC．病毒染色体DNAD．噬菌体DNA7．研究人员想将生长激素基因通过质粒介导入大肠杆菌细胞内，以表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因不插入到基因A、B中，而大肠杆菌不带任何抗性基因，则筛选获得“工程菌”的培养基中的抗抗生素首先应该（）A．仅有链霉素B．仅有氨苄青霉素C．同时有链霉素和氨苄青霉素D．无链霉素和氨苄青霉素课后练习1．下列哪项通常不被用作基因工程的运载体（）A．细菌质粒B．噬菌体C．动植物病毒D．细菌核区的DNA2．下列关于限制酶的说法正确的是（）A．限制酶广泛存在于各种生物中，但微生物中很少（）B．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C．不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端D．限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键3．DNA连接酶催化的反应是()A．DNA复制时母链与子链之间形成氢键B．黏性末端碱基之间形成氢键C．两个DNA片段黏性末端之间的缝隙的连接D．A、B、C都不正确4、作为基因的运输工具——载体，必须具备的条件及理由是()A、能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因B、具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达C．具有某些标记基因，以便为目的基因的表达提供条件句容三中高二生物教学案选修3（选修班）3D、能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便于进行筛选5、质粒是基因工程最常见的载体，它的主要特点是()①能自主复制②不能自主复制③结构很小④是蛋白质⑤是环状RNA⑥是环状DNA⑦能“友好”地“借居”A、①③⑤⑦B、②④⑥C．①③⑥⑦D．②③⑥⑦6、在受体细胞中能检测出目的基因是因为()A、目的基因上有标记B、质粒具有某些标记基因C、重组质粒能够复制D．以上都不正确7、关于质粒的叙述正确的是()A、质粒是能够自我复制的环状DNA分子B、质粒是唯一的载体C、重组质粒是目的基因D、质粒可在宿主外单独复制8、下列关于基因工程中所选用的质粒的说法，错误的是()A、不能没有标记基因B、是小型链状的DNA分子C、能够自我复制D．可与目的基因重组9、要使目的基因与对应的载体重组，所需的两种酶是()(1)限制酶(2)连接酶(3)解旋酶(4)还原酶A、(2)(3)B、(2)(4)C、(1)(2)D、(1)(3)10、20世纪70年代，创立了一种新兴的生物技术——基因工程，实施该工程的最终目的是（）A、定向提取生物体的DNA分子B、定向地对DNA分子进行人工剪切C、在生物体外对DNA分子进行改造D、定向地改造生物的遗传性状11、在基因工程中，作为基因运输工具的运载体，下列特征除哪项外，都是运载体必须具备的条件（）A、能够在宿主细胞中复制，并稳定地保存B、具有多个限制酶切点C、必须是细菌的质粒或噬菌体D、具有某些标记基因12．下图为DNA分子的切割和连接过程。(1)EcoRI是一种酶，其识别序列是，切割位点是句容三中高二生物教学案选修3（选修班）4与之间的键。切割结果产生的DNA片段末端形式为。(2)不同来源DNA片段结合，在这里需要的酶应是连接酶，此酶的作用是在与之间形成键，而起“缝合”作用的。还有一种连平末端的连接酶是。13.番茄在运输和贮藏过程中，由于过早成熟而易腐烂。应用基因工程技术，通过抑制某种促进果实成熟激素的合成，可使番茄贮藏时间延长，培育成耐贮藏的番茄新品种。这种转基因番茄已于1993年在美国上市，请回答：（1）促进果实成熟的重要激素是。（2）在培育转基因番茄的操作中，所用的基因的“剪刀”是，基因的“针线”是，基因的“运输工具”是。（3）与杂交育种、诱变育种相比，通过基因工程来培育新品种的主要优点是、和。14．根据下面实验原理和材料用具，设计实验选择运载体——质粒，探究质粒的抗菌素基因所合成的抗菌素类别。实验原理：作为运载体的质粒，须有标记基因，这一标记基因是抗菌素抗性基因。故凡有抗菌素抗性的细菌，其质粒才可能用作运载体。材料用具：青霉素、四环素的10万个单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、蒸馏水、恒温箱。方法步骤：第一步：取三个含细菌培养基的培养皿并标1、2、3号，在酒精灯旁，用三支注射器，分别注入1亳升蒸馏水、青霉素、四环素液，并使之分布在整个培养基表面。第二步：将接种环在酒精灯火焰上方灼烧灭菌，并在酒精灯火焰旁取种，然后对三个培养皿接种。第三步：将接种后的三个培养皿放入37度的恒温箱中培养24小时。预期结果分析：（1）设置1号的目的是，出现的现象是。（2）如果1、2、3号培养皿的细菌都正常生长说明；如果1、2号培养皿的细菌能正常生长，3号培养皿的细菌不能正常生长则说明；如果1、3号培养皿的细菌能正常生长，2号培养皿的细菌不能正常生长则说明；如果只有1号培养皿的细菌能正常生长，2、3号培养皿的细菌都不能正常生长则说明。参考答案：句容三中高二生物教学案选修3（选修班）5例题1D2C3B4AC5BC6B7C课后练习题1D2B3D4A5C6B7A8B9C10D11C12、(1)限制酶GAATTC鸟嘌呤脱氧核苷酸腺嘌吟脱氧核苷酸磷酸二酯键黏性末端(2)coliEDNA鸟嘌呤脱氧核苷酸腺嘌吟脱氧核苷酸磷酸二酯键T4DNA连接酶13、（1）乙烯（2）限制性内切酶DNA连接酶载体（3）目的性强育种周期短克服远源杂交的障碍14、（1）对照；细菌能正常生长。（2）此细菌的质粒上既有抗青霉素基因也有抗四环素基因；此细菌的质粒上有抗青霉素基因但无抗四环素基因；此细菌的质粒上有抗四环素基因但无抗青霉素基因；此细菌的质粒上既无抗青霉素基因也无抗四环素