ELISA法抗原包被板制备SOP

ELISA法抗原包被板制备SOP(自己学习完后总结的)1、材料1.1实验试剂碳酸盐包被缓冲液（0.05mol/L,pH值9.6）Na2CO31.69gNaHCO32.86g超纯水1L0.45µm滤膜过滤，室温保存。封闭液（1%BSA-PBS-0.05%NaN3）BSA1gPBS100ml5%NaN3母液1ml0.45µm滤膜过滤，4℃保存12h。保护液（4%蔗糖-PBS）蔗糖4gPBS100ml0.45µm滤膜过滤，4℃保存12h。1.2实验耗材烧杯、玻棒、0.45µm滤膜、注射器、酶标条、酶标条架、记号笔等2、操作步骤1、用碳酸盐包被缓冲液将捕获抗体稀释至3μg/ml或其他适宜工作浓度，包被96孔酶标板，每孔100μl，2～8℃孵育过夜（16～24小时）。2、弃去孔中液体，每孔加入200～300μl的PBS（0.01mol/L，pH值7.4），静置3分钟，弃去洗涤液，甩干。3、加入1%BSA-PBS-0.05%NaN3封闭液，每孔200μl，37℃孵育1.5～2小时。4、弃去孔中液体，甩干。每孔加入250μl4%蔗糖-PBS，37℃孵育25分钟。5、弃去孔中液体，甩干。4℃保存一个月。