EppendorfMastercyclereprealplex荧光定量仪操作指南e

操作手册证书经授权的热量循环仪该仪器为经授权的热量循环仪，仪器序列号为：购买者需预先支付由RocheMolecularSystems公司持有的美国专利号为4683195，4683202及4965188的专利预付金以及由F.Hoffmann-LaRoche有限公司持有的美国国外的相关专利索赔金。该仪器用于进行聚合酶链反应（PCR）过程全程的本质特性的研究与开发。按产量支付的专利费用可以支付给应用生物系统，或者也可以通过购买授权试剂的方式来抵付。该仪器作为经授权的热量循环仪，可以使用由应用生物系统提供的应用软件。根据配合使用的授权试剂的标签权，该仪器与授权试剂的配合使用可以向购买者提供有限的聚合酶链反应执照。如果仅仅购买仪器，客户不能够持有聚合酶链反应执照，也没有权力执行聚合酶链反应过程。有关购买执行聚合酶链反应的执照的更多信息，请通过联系应用生物系统执照部门经理获得，地址为：美国加利福尼亚州福斯特城林肯驱动中心850号，94404。所有权力均不通过暗示，诉讼等以立即执行的方式转移给专利品，其中不仅仅限于5项核酸酶检测项目以及任何试剂与用具的专利索赔。应用生物系统对该仪器的性能不作保证。该产品说明书版权所有，如无经2005EppendorfAG，Hamburg授权不可复制Mastercycler为注册商标，美国注册号为2273536，加拿大注册号为TMA510572Mastercycle注册商标受到美国专利号6210958的保护EppendorfMastercyclereprealplex目录：1安全预防法2安装2.1交货包装2.2仪器的安装2.3功能性单元2.3.1Mastercyclereprealplex2.4启动2.4.1realplex模块与热模块之间的连接2.4.2Mastercyclereprealplex与计算机之间的连接2.4.3与其它部件的连接2.4.4realplex软件的安装2.4.4.1安装主程序2.4.4.2数据恢复2.4.4.3开始realplex软件的运行3.操作3.1管理者登陆3.2登陆3.3用户变更3.4系统配置3.4.1对使用者的管理3.4.1.1新用户建立3.4.1.2编辑用户3.4.1.3删除用户3.4.2用户层3.4.3循环仪3.4.4realplex模块3.4.5系统层3.4.5.1特性3.4.5.2登陆出错信息3.4.5.3用户登陆3.4.5.4软件更新3.5检测项目管理3.5.1建立检测项目3.5.2打开检测项目3.5.3保存检测项目3.5.4保存模板文件3.5.5模板文件的使用3.5.6复制检测项目3.5.7检测项目的输出3.5.8检测项目的输入3.5.9建立文件夹3.5.10删除检测项目和文件夹3.6探针管理3.7染料管理3.8校准3.8.1背景校准3.8.2颜色校准3.8.2.1使用商业的校准工具包进行的颜色校准3.8.2.2客户特有的染料的校准3.9数据库管理3.9.1当前数据库的自动保存3.9.2当前数据库的保存3.9.3输入数据库3.9.4数据库的归档4编程（检测项目的建立）4.1建立一个新的检测项目4.2建立板布局4.2.1染料的确定4.2.2参考染料的选择4.2.3样本容积输入4.2.4探针类型的确定4.2.5背景的确定4.2.6样品类型的定义4.2.6.1标准4.2.6.2阳性对照4.2.6.3阴性对照4.2.6.4未知样品4.2.7复制和标准系列的自动建立4.2.8定量的样品类型4.2.9相对定量的样品类型4.2.9.1多plex分析例子4.2.9.2单plex分析的例子4.2.10熔点分析中的样品类型4.2.11终点测定中的样品类型4.2.12+/-检测项目中的样品类型4.2.13基因辨识中的样品类型4.2.12样品的复制与剪切4.2.15删除样品4.2.16几个样品的归组4.2.17子检测项目的测定4.2.18板布局的删除4.2.19完整检测项目的板布局编辑4.3pcr程序的建立4.3.1用模板程序建立一个pcr程序4.3.2不用模板程序建立pcr程序4.3.3程序步的插入和编辑4.3.3.1温度4.3.3.2循环（1－5步循环）4.3.3.3保温4.3.3.4暂停4.3.3.5声音4.3.3.6熔解曲线4.3.3.7终点4.3.4程序的复制4.3.5程序的删除4.3.6测量点的确定4.3.7热盖设置5操作（监测）5.1样品的加载5.2模块温度控制5.3样品体积5.4启动检测项目5.5单个样品的选择5.6单个样品类型的选择5.7循环仪状态5.8当前运行检测项目的中断5.9继续运行检测项目5.10终止检测项目5.11mastercyclereprealplex作为pcr的使用5.12mastercyclereprealplex作为荧光计的使用5.13关闭6分析6.1概要6.1.1打开检测项目6.1.1.1打开在运行的检测项目6.1.1.2打开子检测项目6.1.2单一检测项目的选择6.1.3使样品处于不活动状态6.1.4样品类型的选择6.1.5分析模式的选择6.1.6图标缩放6.1.7存储默认设置6.1.8图表的保存和复制6.1.9样品数据的保存和复制6.1.10编辑报告6.1.10.1模板报告的应用6.1.11分析的保存6.1.12调用分析6.2定量6.2.1阈值确定6.2.2基准线测定6.2.3标准曲线6.2.4分析6.2.5multiplex分析6.3相对定量6.3.1阈值的测定6.3.2多plex分析的估算6.3.3单plex分析的估算6.4熔解曲线分析6.4.1阈值的测定6.4.2分析6.5终点测量6.5.1标准曲线6.5.2分析6.6+/-检测项目6.6.1将终点测定作为数据源的+/-检测项目分析模式6.6.1.1阈值的测定6.6.2pcr数据作为数据源的+/-assay6.6.2.1阈值测定6.6.3分析6.6.4多plex分析6.7基因测定6.7.1阈值测定6.7.2分析7维护7.1清洁仪器的一般方法7.2热模块的清洁7.3热模块的验证与校准8故障查找8.1一般故障8.2在sybr绿色分析中发生的错误8.3qrt－pcr过程中发生的错误9.1登陆9.2新用户的建立9.3创建一个检测项目9.4检测项目的保存9.5执行检测项目9.5.1概述9.5.2板布局9.5.3pcr程序9.5.4开始检测项目9.5.5当前运行检测项目的中断9.5.6继续运行检测项目9.5.7退出检测项目9.5.8分析10技术数据1安全预防法在使用Mastercyclereprealplex之前，请仔细阅读该操作手册。Mastercyclereprealplex仅可用于实验室内，并需由有资格的专家执行实时的聚合酶链反应和相关研究工作。注意：如果由于使用者没有遵循厂商提供的操作手册使用该仪器，那么导致的任何仪器坏损的担保索赔和责任都为无效。仪器使用者必须无条件的接受如下使用说明：—该仪器用于实验室内工作，必须保证时刻有人在旁边观察。为避免由冷凝引起的损坏，在安装后，仪器应该仅打开12个小时。当仪器被挪动位置时，同样遵循这个规定。—电源电压必须与仪器标识牌上的电压数值相匹配。仪器必须有接地线接地。在作仪器的维护和清洁时，必须关上仪器开关并且切断电源，等待模块冷却下来才可进行。在启动仪器前，必须检查一下接线的正确性。—Mastercyclereprealplex必须被立放在一个稳固的工作台面上，必须提供足够大的空间以保证仪器前后端通风槽的通畅和保证冷空气在仪器的下方流通。仪器后端通风槽离墙面的距离至少为10厘米。确定通风槽处于易装卸状态，并且其进出口的通风不会发生堵塞。仪器下不应放置纸张等物品堵塞通风。—不应有物体放置在加热盖上。—在清理加热盖时，带有尖棱角的一些元件就被暴露在外面。所以在清理加热盖时，请注意保护那些带有尖棱角的卷筒形电线和导轨。—开关加热盖时或把加热盖放在清洁位置时，不要把手指插入盖子和机柜之间。打开加热盖时，不要碰盖子下面的地方。—样品物质不可以直接装入加热模块。—当使用不经推荐的样品试管时，将有可能导致模块和加热盖的坏损。同时样品试管也会被弄破以至于造成样品物质的外泄。所以在使用具有传染性的样品物质时，这一点一定要引起注意。—确保聚合酶链反应板被正确放置在模块上，否则将会导致模块和加热盖的坏损以及样品物质外泄。—如果试管在模块中加热的时候不使用加热盖，试管可能因为温度太高而产生破裂，最后将导致样品物质的外泄。加热模块，加热盖的内部及微测试管/聚合酶链反应板能迅速达到50摄氏度的高温。小心不要被灼伤。直到加热盖温度降为30摄氏度或者更低时，才可以打开加热盖。不要使用耐温性（120摄氏度）不够的材料（试管、聚合酶链反应板、罩、箔片和垫子等）。加热模块上有如下标记：提出了对加热模块和加热盖中潜在温度的提醒指明操作将导致右边温度高于左边温度。—带有爆炸、易燃、易挥发性质的物质禁止在Mastercyclereprealplex中进行加热。仪器禁止在有潜在爆炸性危险的房间内使用，以防止产生爆炸。—当使用致病物质、放射性物质和其它对人体健康有危害的物质工作时，必须遵守相关的安全手则。—确保仪器内不进水。—仪器的维修必须由经过EppendorfAG授权的专家来操作。该项授权仅可通过参加一个持证培训课程获得。—转交如果仪器发生转交时，必须附上本操作手册。—处理当仪器要被处理掉时，必须遵循相关的法律规定。电器的清除请遵循欧共体基于EU指令2002/96/EC的对废电子电气装置（WEEE）的国际规定。根据这些规定，在商业对商业领域内，05年8月13号以后供应的设备将不再被归类为城市或家庭废物，并有如下标记：关于处理的规定可能存在国家与国家之间的不同，所以如果有需要请联系你的供应商解决。2安装2.1交货包装交货包装中包含以下各个部分：一台Mastercyclereprealplex的主体装置一个主电源电缆一个PC控制器局域网络总线电缆一个控制器局域网络总线电缆一个USB控制器局域网络适配器一个3.0毫米带把手的六角扳手一个内装有安装使用手册和软件的CD一个英文的安装使用手册（印刷本）一对96tecPCR板，全裙边/半裙边一袋封口条，8根一个热封的薄膜，封装（5×）一份产品合格证明2.2仪器的安装为避免由于冷凝给仪器带来的损害，安装后，仪器仅可运行12个小时。当仪器被挪动位置后，同样要遵守该规定。仪器必须被严格立式放置在稳固的工作台面上。确保仪器放置的位置远离会产生震动的其他仪器（比如离心分离机等）为保证仪器前后通风槽的通畅，以及仪器下端和空气的接触，放置时要留有足够大的空间。仪器的后通风槽与墙壁之间的距离应大于10厘米。空间要求：宽度：26厘米进深度：41厘米高度：39.6厘米电源设备：一个提供给热模块的安全插座。Realplex模块由热模块的主连线供电。安装时要确保通风槽的拆卸空间，确保入口与出口的通风顺畅。为保证通风顺畅，禁止在仪器下放置纸张或者其他物品。电源电压大小必须与仪器标识牌上的数据相符。仪器必须带有接地线。仪器和供电电源的放置必须可以保证快速的切断电源。包装仪器的纸箱应妥善保存以备日后仪器维修时的安全运输。注意：仪器运输与贮存温度不得超过50摄氏度。仪器放置应避免直接日晒。2.3功能性单元2.3.1Mastercyclereprealplex图1：关闭的realplex模块前面观1realplex模块2状态显示3密封压板（锁住状态）4控制面板的挂钩（Mastercyclereprealplex不需要）5热模块图2：打开的realplex模块前面观1密封压板（开启状态）2realplex模块3热模块放入试验样本后，向前拉动realplex模块，覆盖住插入的试管。然后用压板密封，程序开始启动。注意在把密封压板归位时小心不要弄伤手指。当realplex模块开启时，不要触碰盖子下端以防被灼伤。图三：后面观1realplex模块2realplex模块的接线板(见图4)3热模块4通风槽5供电电源开关，0为关断，1为接通6供电电源插座7热模块的接线板图4：realple