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第五章微生物的营养营养物质:微生物为了生存就必须从环境中吸取各种物质以合成细胞物质、提供能量以及在新陈代谢中起调节作用。这些物质就称为营养物质。营养的概念:有机体吸取和利用营养物质的过程。第一节微生物的营养要求第二节微生物的营养类型第三节营养物质的跨膜运输第四节培养基MicrobialNutrition第一节微生物的营养要求一、微生物细胞的化学组成二、营养物质及其生理功能三、微生物的营养类型NutritionalRequirementsofMicrobialCells一、微生物细胞的化学组成(一)化学元素(chemicalelement):大量元素(macroelement):碳、氢、氧、氮、磷、硫、钾、镁、钙、铁(其中前六种占细菌细胞干重的97%)。微量元素(traceelement):锌、锰、钠、氯、钼、硒、钴、铜、钨、镍、硼。元素细菌酵母菌霉菌碳5049.847.9氮1512.45.2氢86.76.7氧2031.140.2磷3——硫1——表4—1微生物细胞中几种主要元素的含量(干重%)TheMajorElementsAtanelementarylevel,thenutritionalrequirementsofabacteriumsuchasE.coliarerevealedbythecell'selementalcomposition,whichconsistsofC,H,O,N,S.P,K,Mg,Fe,Ca,Mn,andtracesofZn,Co,Cu,andMo.Theseelementsarefoundintheformofwater,inorganicions,smallmolecules,andmacromoleculeswhichserveeitherastructuralorfunctionalroleinthecells.ThegeneralphysiologicalfunctionsoftheelementsareoutlinedintheTablebelow.TraceElementsTraceElementsTraceelementsaremetalionsrequiredbycertaincellsinsuchsmallamountsthatitisdifficulttodetect(measure)them,anditisnotnecessarytoaddthemtoculturemediaasnutrients.Traceelementsarerequiredinsuchsmallamountsthattheyarepresentascontaminantsofthewaterorothermediacomponents.Asmetalions,thetraceelementsusuallyactascofactorsforessentialenzymaticreactionsinthecell.Oneorganism'straceelementmaybeanother'srequiredelementandvice-versa,buttheusualcationsthatqualifyastraceelementsinbacterialnutritionareMn,Co,Zn,Cu,andMo.(二)元素在细胞内存在形式:上述元素主要以水、有机物、无机盐的形式存在于细胞中:1.有机物:蛋白质、糖、脂类、核酸、维生素及其降解产物.2.无机物:1)参与有机物组成,2)单独存在于细胞质内以无机盐的形式存在.3、水:约占细胞总重70%~90%,以游离水和结合水两种形式存在游离水:干重法可测得;结合水:不易蒸发、不冻结、也不能渗透,占水总量的17%—28%。(三)微生物细胞化学组成含量的变化主要成分细菌酵母菌霉菌水分75~8570~8085~90(占细胞鲜重的%)蛋白质50~8032~7514~15占细碳水化合物12~2827~637~40胞干脂肪5~202~154~40重的核酸10~206~81%无机盐2~303.8~76~12表4—2微生物细胞的化学组成此组成可因菌种的种类、菌龄、培养基组成、培养条件、分析方法等而有所不同。分析细胞有机、无机成分的方式有机成分:1.化学法直接抽提-----定性、定量分析2.破碎细胞,获得亚细胞结构----化学分析无机成分:细胞----550℃----灰分----定性、定量分析二、营养物质及其生理功能碳源氮源无机盐生长因子水(一)、碳源(Carbonsource)◆定义:凡可被用来构成细胞物质或代谢产物中碳素来源的营养物质。◆功能:提供合成细胞物质及代谢物的原料;并为整个生理活动提供所需要能源(异养微生物)。◆种类:无机含碳化合物:如CO2和碳酸盐等。有机含碳化合物:糖与糖的衍生物(多糖:如淀粉、麸皮、米糠等;饴糖;单糖),脂类、醇类。有机酸、烃类、芳香族化合物以及各种含氮的化合物。类型元素水平化合物水平培养基原料水平有机碳C·H·O·N·X复杂蛋白质、核酸等牛肉膏、蛋白胨、花生饼粉等C·H·O·N多数氨基酸、简单蛋白质等一般氨基酸、明胶等C·H·O糖、有机酸、醇、脂类等葡萄糖、蔗糖、各种淀粉、糖蜜等C·H烃类天然气、石油及其不同馏份、石蜡油等无机碳C(?)——C·OCO2CO2C·O·XNaHCO3NaHCO3、CaCO3、等表4-4微生物的碳源谱微生物工业发酵中用做碳源的原料传统种类:糖类(单糖,饴糖)淀粉(玉米粉、山芋粉、野生植物淀粉等)麸皮各种米糠等代粮发酵:纤维素、石油、CO2、H2可以用作洋葱假单胞菌唯一碳源的化合物有:碳水化合物及其衍生物:19种脂肪酸:11种二羧酸:9种其它有机酸:12种伯醇:3种氨基酸:12种其它氮化合物:13种无氮环状化合物:9种微生物不同,利用上述含碳化合物的能力不同,如假单胞菌属中的某些种可以利用90种以上的不同类型的碳源物质;而某些甲基营养型细菌只能利用甲醇或甲烷等一碳化合物进行生长。凡用来构成菌体物质或代谢产物中氮素来源的营养源。种类:无机氮:铵盐、硝酸盐、亚硝酸盐、尿素、氨、N2等;有机氮:蛋白质及其降解产物(如胨、肽、氨基酸等)、牛肉膏、鱼粉、花生饼粉、黄豆饼粉、玉米浆等功能:1)提供合成细胞中含氮物,如蛋白质、核酸,以及含氮代谢物等的原料;2)少数细菌可以铵盐、硝酸盐等氮源为能源。(二)氮源(Nitrogensource):类型元素水平化合物水平培养基原料水平有机氮N·C·H·O·X复杂蛋白质、核酸等牛肉膏、酵母膏、饼粕粉、蚕蛹粉等N·C·H·O尿素、一般氨基酸、简单蛋白质等尿素、蛋白胨、明胶等无机氮N·HNH3、铵盐等(NH4)2SO4等N·O硝酸盐等KNO3等NN2空气表4—5微生物的氮源谱硝酸盐NO3NH4+实验室常用的无机氮源有碳酸铵、硝酸盐、硫酸铵、尿素、蛋白胨、牛肉膏、、酵母膏等。生产上常用的氮源有硝酸盐、铵盐、尿素、氨以及蛋白含量较高的鱼粉、蚕蛹粉、黄豆饼粉、花生饼份、玉米浆等。蛋白氮必须通过水解之后降解成胨、肽、氨基酸等才能被机体利用,这种氮源叫迟效氮源。无机氮源或以蛋白质降解产物形式存在的有机氮源可以直接被菌体吸收利用,这种氮源叫做速效氮源。速效氮源,通常有利于机体的生长,迟效氮源有利于代谢产物的形成。铵盐氨基酸入胞细胞物质蛋白胨豆饼蚕蛹粉分解入胞细胞物质诱导酶诱导酶生理酸式盐和生理碱式盐(NH4)2SO42NH4++SO42-入胞pHK+(Na+)+NO3-入胞pHKNO3NaNO3NH4NO3NH4+(先入胞)+NO3-(后入胞)(三)无机盐(inorganicsalt)定义:为微生物细胞生长提供碳、氮源以外的多种重要元素(包括大量元素和微量元素)的物质,多以无机盐的形式共给。大量元素:P、S、K、Mg、Ca、Na、Fe(微生物生长所需浓度在10-3~10-4mol/L)微量元素:Cu、Zn、Mn、Mo、Co(微生物生长所需浓度在10-6~10-8mol/L)一般微生物生长所需要的无机盐有:硫酸盐、磷酸盐、氯化物以及含有钠、钾、镁、铁等金属元素的化合物。无机盐的生理功能:无机盐大量元素微量元素一般功能特殊功能酶的激活剂(Cu2+、Mn2+、Zn2+等)特殊分子结构成分(Co、Mo等)维持渗透压生理调节物质酶的激活剂pH的稳定化能自养菌的能源(S、Fe2+、NH4+、NO2-)无氧呼吸时的氢受体(NO3-、SO42-)细胞内一般分子成分(如P,S,Ca,Mg,Fe等)元素人为提供形式生理功能PKH2PO4、K2HPO4核酸、磷酸和辅酶的成分SMgSO4含硫氨基酸、含硫维生素成分KKH2PO4、K2HPO4酶的辅因子、维持电位差和渗透压NaNaCl维持渗透压、某些细菌和蓝细菌需要CaCa(NO3)2、CaCl2胞外酶稳定剂、蛋白酶辅因子、细菌芽孢和真菌孢子形成MgMgSO4固氮酶辅因子、叶绿素成分FeFeSO4Cyt成分;合成叶绿素、白喉毒素和氯高铁血红素所需MnMnSO4超氧化物歧化酶、氨肽酶、L-阿拉伯糖异构酶等的辅因子CuCuSO4氧化酶、酪氨酸酶的辅因子CoCoSO4VB12复合物的成分、肽酶的辅因子ZnZnSO4碱性磷酸酶、脱氢酶、肽酶、脱羧酶辅因子Mo(NH4)6Mo7O24固氮酶和同化型及异化型硝酸盐还原酶的成分无机元素的来源和功能(四)生长因子(growthfactor):定义:是一类对微生物正常生活所不可缺少而需要量又不大,但微生物自身不能用简单的碳源或氮源合成,或合成量不足以满足机体生长需要的有机营养物质。不同微生物需求的生长因子的种类和数量不同。缺乏合成生长因子能力的微生物称为“营养缺陷型”微生物。categories:Growthfactorsareorganizedintothreecategories:1.purinesandpyrimidines:requiredforsynthesisofnucleicacids(DNAandRNA)2.aminoacids:requiredforthesynthesisofproteins3.vitamins:neededascoenzymesandfunctionalgroupsofcertainenzymes最早发现的生长因子是维生素,目前已经发现许多维生素都能起生长因子的作用。维生素大部分是构成酶的辅基或辅酶,需要量很少,但是缺少维生素微生物不能正常生长。有些微生物缺乏或丧失合成某种或某些氨基酸的酶,所以不能合成生长所必需的氨基酸,这类微生物被称为“氨基酸缺陷型”。例如:肠膜明串珠菌(leuconostocmesenteroides)常常需要由外源供给多种氨基酸才能生长。另外有些微生物生长还需要其它特殊的成分,例如某些乳酸杆菌生长需要核苷;某些酵母菌和真菌生长需要肌醇;某些肺炎球菌生长需要胆碱等。根据微生物对生长因子的需要存在差异,可分为:1.野生型(wildtype)原养型不需要生长因子而能在基础培养基上生长的菌株2.营养缺陷型(auxotroph)由于自发或诱发突变等原因从野生型菌株产生的需要提供特定生长素物质才能生长的菌株水的生理功能:P801.2.3.4.5.6.(五)水(water)几种生物的游离水含量人体:~60%海蛰:~96%微生物孢子营养体霉菌孢子:~39%细菌芽孢:皮层:~70%核心:极低细菌:~80%酵母:~75%霉菌:~85%◆水在细胞中有两种存在形式:结合水和游离水.◆不同细胞及不同细胞结构中游离水的含量有较大差别:◆微生物对水的需要程度(水对微生物生长的影响)常用环境(或基质)中的水活度值(wateractivity,w)表示。所谓w就是水的有效浓度。◆定义:水活度为在一定的温度条件下,溶液的蒸汽压(材料上部蒸气相中水浓度)与纯水的蒸汽压(即纯水上部蒸气相中水浓度)之比,即:w=/o表示溶液的蒸汽压o表示纯水的蒸汽压◆在w为0.60~0.99的环境条件均有微生物生长,但对某种微生物而言,它对w的要求是一定的,微生物对水的需求有相当的变化程度。即微生物不同,其生长的
本文标题:24微生物的营养
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