3药物杂质检查.

全国高职高专药品类专业第二轮规划教材—《药物分析》第三章杂质检查Page2药物中杂质的来源及其种类一般杂质检查特殊杂质检查Page3无治疗作用：Cl-、SO42-影响药物的稳定性和疗效：水分（青霉素钠）对人体健康有害的物质：砷、重金属杂质的概念Page4第一节药物中杂质的来源及其种类Page5（一）药物纯度及化学试剂纯度纯度：纯净程度杂质是影响纯度的主要因素纯度检查—即杂质检查一、杂质的来源Page6安全性有效性稳定性生理作用试剂规格药用规格适用范围目的稳定性等合格不合格化学纯CP分析纯AR优级纯GR基准试剂光谱纯试剂色谱纯试剂一、杂质的来源考虑因素级别Page7一、杂质的来源硫酸钡（BaSO4）试剂或药用检查项目试剂规格氯化物、铁、灼烧失重等药用规格酸溶性钡盐、重金属、砷盐等。存在可溶性钡盐则导致医疗事故Page8一、杂质来源1.生产中引入2.贮存中引入原料，中间体，副产物；试剂，溶剂，催化剂；器皿，装置，管道；制剂过程中产生；保管不当；贮藏时间过长；温度、湿度、光、空气；微生物作用；Page9A.原料不纯或部分未反应完全的原料造成B.合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造成C.需加入的各种试剂产生吸附，共沉淀生成混晶等造成D.所用金属器皿及装置等引入杂质E.由于贮藏不当，日光曝晒使产品发生分解引入的杂质互动：生产过程中引入杂质的途径为Page10二、杂质的种类分类方法杂质种类代表成分按性质分类影响药物稳定性金属离子、水毒性杂质重金属、砷盐信号杂质氯化物、硫酸盐按来源分类一般杂质广泛，附录特殊杂质特殊，正文Page11三、药物的杂质检查方法杂质限量：在不影响药物疗效、稳定性及不发生毒性的前提下，药物中所含杂质的最大允许量。表示方法：百分之几（%）或百万分之几（ppm）杂质的限量检查：一般不要求测定其含量，而是检查杂质的量是否超过限量方法：对照法灵敏度法比较法Page12三、药物的杂质检查方法（一）对照法取一定量待检杂质的对照液与一定量供试品液在相同条件下处理后，比较反应结果，从而判断供试品中所含杂质是否超过限量仪器：纳氏比色管Page13三、药物的杂质检查方法（一）对照法特点：需要对照品，不能准确测定杂质含量注意：平行原则；正确比浊、比色；结果不合格应复检两份结果判断：比色或比浊有色白色沉淀或浑浊白色衬底黑色衬底样品管对照管＜合格Page14三、药物的杂质检查方法（一）对照法限量计算：%100供试品量标准溶液的体积标准溶液的浓度杂质限量%100供试品量允许杂质存在的最大量杂质限量100%cVLS注意单位统一！Page15取本品2.0g，加水100ml，加热溶解后，冷却、滤过，取滤液25ml，依法检查，与标准硫酸钾溶液1.0ml（100µg/mlSO4）制成的对照液比较，不得更浓。计算硫酸盐的限量。对乙酰氨基酚中硫酸盐的检查6100101100%100%0.02%252100CVLSPage16三、药物的杂质检查方法（二）灵敏度法以检测条件下反应的灵敏度来控制杂质限量特点：不需对照品纯化水中氯化物的检查50ml纯化水中加入硝酸5滴及硝酸银试液1ml，要求不得发生浑浊Page17三、药物的杂质检查方法（三）比较法取供试品一定量依法检查，测得待检杂质的吸收度或旋光度等与规定的限量比较，不得更大特点：不需对照品；能准确测定杂质含量硫酸阿托品中莨菪碱的检查取本品，按干燥品计算，加水溶解并制成每1ml中含50mg的溶液，依法测定，旋光度不得过-0.40°。Page18三、药物的杂质检查方法肾上腺素中肾上腺酮的检查规定：A310nm≯0.05Page19取本品0.20g，置100ml量瓶中，加盐酸溶液(9→2000)溶解，并稀释至刻度，摇匀，在310nm处测定吸光度，不得超过0.05，E为453，求酮体的限量。肾上腺素中肾上腺酮的检查)/(1010.1100145305.010016%11mlgEACcm酮体%055.0%100100.21010.1%10036药物酮体CCLPage20三、药物的杂质检查方法（四）高效液相色谱法双重优点：限量检查和准确测得杂质的含量主要用于：特殊杂质的检查主要方法：1.内标加校正因子法2.外标法3.加校正因子的主成分自身对照法4.不加校正因子的主成分自身对照法5.面积归一化法Page21第二节一般杂质检查Page22一般杂质：在自然界中分布较广，多数药物的生产和贮存过程中容易引入的杂质方法：多采用对照法注意：遵循平行原则Page23（一）检查原理一、氯化物检查Cl-+Ag+AgCl(白)白色浑浊Page24（二）检查方法一、氯化物检查供试品稀HNO310mlH2OAgNO31ml标准溶液稀HNO310mlH2OAgNO31ml暗处放置5min(避免AgCl分解)Page25（三）注意事项一、氯化物检查注意事项内容标准氯化钠溶液临用现配，浓度：10gCl-/ml，用量：5.0－8.0ml加入稀硝酸目的：加速氯化银混浊的生成,避免产生碳酸银、氧化银、磷酸银沉淀。稀硝酸10ml为宜先中和为中性后再检查—避免硝酸银在碱性条件下生成氢氧化银和氧化银。反应，观察方式暗处反应，黑色背景，从上向下观察Page26（三）注意事项一、氯化物检查注意事项内容供试品处理药物不溶解：有机氯：溶液有颜色：内消色法水或水，加热使所含氯化物溶解过滤除去不溶物药物取滤液检查适当的有机方法破坏药物无机氯，依法检查Page27供试品2倍量½量½量样品过滤至澄清对照二者平行试验，比较对照与样品的浑浊程度内消色法（倍量法）：20ml稀硝酸1ml硝酸银标准Cl-和1ml硝酸银1ml硝酸银一、氯化物检查（三）注意事项：Page281mlAgNO3过滤对照管样品管2倍HNO31mlAgNO31mlAgNO32倍量样品1/21/2一、氯化物检查（三）注意事项：内消色法示意图标准Cl-Page29（三）注意事项一、氯化物检查注意事项内容碘（溴）化物中氯化物的检查依法检查挥去22][4322,IOClIPOHOHClIPage30A.所用比色管需配套B.稀硝酸酸性下(10ml/50ml)C.避光放置5分钟D.用硝酸银标准溶液做对照E.在白色背景下观察互动：下列哪些为药物中氯化物检查的必要条件Page31（一）检查原理二、硫酸盐检查)(BaSOBaClSO4HCl224白色白色浑浊Page32（二）检查方法二、硫酸盐检查供试品标准溶液稀HCl4ml稀HCl4mlH2OH2O25%BaCl21ml25%BaCl21mlH2OH2O摇匀，放置10minPage33（三）注意事项二、硫酸盐检查注意事项内容标准硫酸钾溶液标准硫酸钾溶液：0.1mgSO42-/ml比浊范围：0.1-0.5mg/50ml标准硫酸钾溶液取量：1.0-5.0ml酸性条件加入盐酸，防止CO32-、PO43-与Ba2+生成沉淀干扰，以50ml中含稀盐酸2ml为宜，酸度超过，灵敏度会下降Page34A.标准氯化钡B.标准醋酸铅溶液C.标准硝酸银溶液D.标准硫酸钾溶液E.以上都不对互动：药物中硫酸盐检查时，所用的标准对照液Page35三、铁盐检查法（一）原理：+Fe3+6SCN-[Fe（SCN）6]3-（红色）HClFe2+Fe3+[O]过硫酸铵[6SCN-]Fe(SCN)63-防止Fe3+水解氧化Fe2+为Fe3+防止硫氰酸铁受光照还原或分解过量Page36（二）检查方法三、铁盐检查供试品显色，立即与同法制成的对照溶液比较加水溶解25ml稀HCl4ml过硫酸铵50mg加水稀释35ml30%硫氰酸铵溶液3ml加水定容Page37三、铁盐检查（三）注意事项注意事项内容标准铁溶液用硫酸铁胺[FeNH4(SO4)2·12H2O]配制贮备液，加入硫酸防止水解。标准铁溶液：10μg/ml。10-50μgFe/50ml为宜，应取1.0-5.0ml。酸性条件盐酸4ml为宜，防止铁水解过硫酸胺将Fe2+氧化成Fe3+，防止硫氰酸铁光照还原或分解处理样品加硝酸不再加过硫酸胺，但必须加热除去一氧化氮Page38A.使药物中铁盐都转变为Fe3+B.防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色C.使产生的红色产物颜色更深D．防止干扰E．便于观察、比较互动：中国药典规定，硫氰酸铵法检查铁盐时，加入过硫酸铵的目的Page39四、重金属检查重金属：在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠试液作用而显色的金属杂质。以铅为代表方法适用范围硫代乙酰胺法无需有机破坏，在酸性条件下可溶解的无色药物中的重金属检查炽灼法含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸及乙醇的有机药物中的重金属检查硫化钠法溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀的药物中重金属杂质的检查Page40四、重金属检查SHCONHCH5.3pHOHCSNHCH223223H2PbSHSHPb22黄色至棕黑色混悬液++Pb2+PbS2+Na2SNaOHNa（一）检查原理第一法和第二法：第三法：Page41四、重金属检查（二）操作方法：第一法供试品标准溶液醋酸盐缓冲溶液2mlH2O硫代乙酰胺试液2ml供+标醋酸盐缓冲溶液2mlH2O醋酸盐缓冲溶液2mlH2O甲乙丙当丙管中显出的颜色不浅于甲管时，乙管中显示的颜色与甲管比较，不得更深。如丙管中显出的颜色浅于甲管，应取样按第二法重新检查Page42四、重金属检查（二）操作方法：第二法缓缓炽灼放冷H2SO40.5-1.0ml供试品炭化加热HNO3500-600℃H2SO4除尽放冷完全灰化蒸干HCl2ml水15ml中性按第一法检查蒸干氨试液注意：做空白试验Page43四、重金属检查（二）操作方法：第三法供试品标准溶液NaOH5ml20mlH2O5滴Na2S试液摇匀NaOH5ml20mlH2O5滴Na2S试液Page44（三）注意事项注意事项内容反应环境醋酸盐缓冲液(pH3.5)标准铅溶液Pb(NO3)210µg/ml炽灼温度在用第二法检查时,炽灼温度控制在500～600℃，温度太低灰化不完全，温度过高重金属挥发损失硫化钠临用现配第三法中，显色剂硫化钠试液对玻璃有一定的腐蚀性，而且久置会产生絮状物，应临用前配制四、重金属检查Page45A.硫化氢试液B.硫代乙酰胺试液C.硫化钠试液D.氰化钾试液E.硫氰酸铵试液互动：重金属检查法中，所使用的显色剂Page46A.用硫代乙酰胺为标准对照液B.用10ml稀硝酸/50ml酸化C.在pH3.5醋酸盐缓冲溶液中D.用硫化钠为试液E.结果需在黑色背景下比较互动：葡萄糖中进行重金属检查时，适宜的条件Page47现有一药物为苯巴比妥，欲进行重金属检查，应采用《中国药典》上收载的重金属检查的哪种方法？互动：重金属检查方法选择Page48（一）古蔡法五、砷盐检查法：毒性杂质1、原理：三价As五价AsZn+HClAsH3HgBr2试纸砷斑五价砷的反应较慢，需先还原为三价砷古蔡法二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC法）黄棕色中国药典Page49醋酸铅棉花避免硫化物的干扰HgBr2试纸HCl+SnCl2+KI5min+Zn→AsH3砷斑（一）古蔡法2.操作方法Page50五、砷盐检查（一）古蔡法3.注意事项注意事项内容碘化钾、氯化亚锡作用As5+还原成As3+，加快反应速度醋酸铅棉花排除硫化物的干扰标准砷溶液三氧化二砷，1µg/ml，取用量2mlPage51五、砷盐检查（一）古蔡法3.注意事项注意事项内容砷斑遇光、热、湿褪色反应完毕立即比色供试品若为硫化物加HNO3处理，使氧化成硫酸盐供试品若为铁盐事前处理，先加酸性SnCl2试液，使Fe3+成Fe2+环状药物有机破坏Page52（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC法）C2H5C2H5NCS+3----+6AgC2H5C2H5NCSSAgSSCNC2H5C2H56+AsH3SH3As1、原理：加入有机碱三乙胺