生物化学实验

《生物化学实验》课程实验教学大纲课程编号：31590021学时45学分2.5一、课程的性质和任务本课程通过学习生物化学的基本实验技术，使学生具有初步的科学实验能力及严格的科学作风，同时验证生物化学的某些基本理论知识，加深感性认识。二、教学内容和方法通过本门课程的学习，要求学生在掌握生物化学课程的基本理论和基本知识的同时学习生物化学的基本实验技能，掌握比色、纸层析、电泳、分子筛柱层析、生化制备等基本实验技术。通过学生自己动手亲自参与来实现上述教学要求。三、教学目的要求教学目的是使学生学会生化常用的仪器设备，培养学生的动手能力和解决实际问题的能力。四、考试方式及方法平时成绩和考查相结合。五，配套的实验教材或指导书生化教研组2000年自编«生物化学实验»六，适用专业食品学院海洋药物专业七,实验项目（根据学时选取实验）序号实验内容学时实验类型实验类别实验要求每组人数1氨基氮测定—甲醛滴定法3综合型技术基础实验必修22蛋白质浓度测定—Folin-酚法，紫外吸收法及其比较6综合型技术基础实验必修23血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳3综合型技术基础实验必修24总糖和还原糖测定—3.5-二硝基水杨酸法4综合型技术基础实验必修25酶的专一性3验证型技术基础实验必修26蛋白酶的活力测定4综合型技术基础实验必修27酵母核糖核酸（RNA）的提取制备4综合型技术基础实验必修28葡聚糖凝胶层析3综合型技术基础实验必修29氨基移换反应6综合型技术基础实验必修210底物浓度对酶活性的影响—蔗糖酶米式常数的测定6综合型技术基础实验必修211聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦10综合型技术基础实验必修212药物毒性的生化分析—血清尿素氮的测定3综合型技术基础实验必修213氨基酸的分离鉴定—纸层析法3综合型技术基础实验必修2实验一氨基氮测定—甲醛滴定法（一）实验学时：3（二）实验项目内容：1．样品测定2．计算样品氨基氮含量（三）主要仪器设备及配套数1.仪器：吸量管5ml，10ml；量杯10ml；三角瓶；酸度计2.试剂：甲醛溶液；0.01N氢氧化钠（四）实验室名称：生化实验室实验二蛋白质浓度测定——Folin一酚法，紫外吸收法及其比较（一）实验学时：3（二）实验项目内容：1.Folin—酚法中标准曲线的绘制2.Folin—酚法中样品液的测定3.紫外吸收法中标准曲线的绘制4.紫外吸收法中样品液的测定（三）主要仪器设备及配套数：1.仪器：吸量管（0.5、1.05ml）与吸量管架；试管与试管架；分光光度计；紫外分光光度计2.试剂：Folin一酚试剂A；Folin一酚试剂B；各蛋白标准溶液（400ｕg/ml）；蛋白质样品液（四）实验室名称：生化实验室实验三血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳（一）实验学时：3（二）实验项目内容：1．浸泡2．点样3．电泳4．染色5．漂洗（三）主要仪器设备及配套数：主要仪器：毛细管1.5ｍｍ内径，电泳仪，电泳槽（四）实验室名称：生物化学实验室实验四总糖和还原糖测定――3.5－二硝基水杨酸法（一）实验学时：3（二）实验项目内容1.葡萄糖标准曲线的制作2.样品中还氧糖和总糖的测定（三）主要仪器设备及配套数：主要仪器：容量瓶，玻璃漏斗,吸管,量筒,721型分光光度计，电热恒温水浴锅，水浴锅配套数：10套（四）实验室名称：生物化学实验室实验五酶的专一性，温度、PH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响（一）实验学时：3（二）实验内容：1．温度对酶活力的影响2．pH对酶活力的影响3．活化剂和抑制剂对唾液淀粉酶的影响4．酶对底物的专一性（三）主要仪器设备及其配套数主要仪器：水浴锅，吸量管，白瓷瓶，小漏斗，烧杯，量筒，滴管，玻璃漏斗配套数：10套（四）实验室名称：生物化学实验室实验六蛋白酶的活力测定（一）实验学时：3（二）实验项目内容：1.酪氨酸标准曲线制作2.蛋白酶活力测定（三）主要仪器设备及配套数：主要仪器：试管，吸管，721型分光光度计，电热恒温水浴锅配套数：10套（四）实验室名称：生物化学实验室实验七：酵母核糖核酸（RNA）的提取制备（一）实验学时：3（二）实验内容：1．破碎细胞2．提取3．分离4．沉淀RNA5．洗涤及抽滤6．干燥（三）主要仪器设备及其配套数主要仪器：量筒,三角烧瓶,吸滤瓶,布氏漏斗，表面皿,温度计,干燥器，离心机，水浴锅，烘箱，药物台秤配套数：10套（四）实验室名称：生物化学实验室实验八葡聚糖凝胶层析（一）实验学时：3（二）实验项目内容：1．凝胶容胀2．装柱3．加样4．洗脱与收集5．绘制洗脱曲线（三）主要仪器设备及配套数主要仪器：吸管1m，层析柱,刻度离心筒配套数：10套（四）实验室名称：生物化学实验室实验九氨基转换反应（一）实验学时：3（二）实验项目内容：1.肌肉糜制备2.氨基酸样品的制备3.纸层析（三）主要仪器设备及配套数1.仪器：吸管1ml；试管5*15cm；培养皿15cm；毛细管；2.试剂：0.01M磷酸缓冲液；0.1M丙氨酸；0.1Ma—酮戊二酸；0.1M谷氨酸；0.1%茚三酮丙酮溶液；层析展开剂（四）实验室名称：生化实验室实验十底物浓度对酶活性的影响—蔗糖米式常数的测定（一）实验（一）实验学时：3（二）实验项目内容：1.标准曲线的绘制2.根据活力选择酶浓度3.底物浓度对酶促反应速度的影响—米式常数的测定（三）主要仪器设备及配套数100ml三角烧瓶；研钵；50ml及100ml容量瓶；离心机；糖管；恒温水浴；吸量管；停表；分光光度计(四)实验室名称：生化实验室实验十一聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦（一）实验学时：3（二）实验项目内容：1.制胶柱2.聚焦3.显示4.测pH（三）主要仪器设备及配套数：小玻璃管；小玻璃架；注射器；圆盘电泳槽及直流稳压电流；pH计；平皿及竹夹；吸量管（四）实验室名称：生化实验室实验十二药物毒性的生化分析—血清尿素氮的测定（一）实验学时：3（二）实验项目内容：1.加入反应试剂2.反应3.比色（三）主要仪器设备及配套数：分光光度计（四）实验室名称：生化实验室实验十三氨基酸的分离鉴定——纸层析法（一）实验目的：1．学习分配层析的原理．2．掌握氨基酸纸上层析法的操作技术（包括点样、平衡、展层、显色、鉴定）。3．学习分析未知样品的氨基酸成分（水解、层析及鉴定）。（二）实验项目内容：1．点样2．展开3．显色4．计算各种氨基酸的Rf值（三）主要仪器设备及配套数：主要仪器：层析缸，培养皿ｄ＝15cm，喷雾器，毛细管，电吹风，烘箱配套数：10套（四）实验室名称：生物化学实验室根据教学要求开设相应的实验。