生物化学实验教学大纲

《生物化学》实验教学大纲课程编码：102710112课程名称：生物化学英文名称：Biochemistry开课学期：3实验课学时：56适用对象：医学、药学专业本科生指导教材及参考书：指导教材：《医学生物化学与分子生物学实验教程》《第一版》刘吉民主编吉林大学出版社2002年参考书：1、《生物化学技术导论》（第一版）中山大学生物系生化教研室主编人民教育出版社1978年2、《生化试验方法和技术》（第一版）张龙翔主编人民教育出版社1981年3、《精编分子生物学实验指南》（第一版）F.奥斯伯主编科学出版社1998年4、《分子克隆实验指南》（第二版）萨姆布鲁克主编科学出版社2002年主要仪器设备：电泳系统；层析系统；凝胶成像分析系统；温浴；离心机；分光光度计；紫外检测仪；酸度计；PCR仪；；紫外透射仪；紫外聚胶装置；透析装置；摇床。执笔人：张桂荣杨成君一、课程性质、目的与任务生物化学即生命的化学，是一门研究生命分子基础的学科，是研究生物体的分子结构与功能、物质代谢与调节、基因信息表达与传递等生命现象本质，确定组成生物体的生物分子是如何相互作用以维持及延续生命的状态的科学，其基本目标是揭示生命的奥秘，是医学科学的基础。生物化学是一门实验性科学，它的基本理论都是从实验研究中得到的，都是实验研究的结果和结论。因此，生物化学实验技术在生物化学课程的学习中，占有及其重要的地位。本课程开设实验科的目的在于让学生系统地学习、掌握生物化学实验的基础理论知识和必要的基本技术手段，培养学生的动手能力，通过实验课程的学习培养学生的科研意识、科研能力、启迪创新思维，为后续相关基础和临床课程的学习以及临床实践和研究奠定理论和技术基础。培养与二十一世纪生命科学发展相适应的医学人才。二、教学基本要求生物化学与分子生物学实验技术是生命科学研究应用最广泛的共用的先驱技术手段。本课程要求学生具备良好的无机化学、有机化学、物理化学、生物学基础。教学主要以掌握生物化学与分子生物学实验技术基本理论原理和基本实验操作坊法技术为基本宗旨，在56学时实验教学中，预计开设12项实验。通过验证性实验是学生更好的掌握理论知识，理论联系实际使学生对生物化学课程形成立体思维；通过综合性设计性实验，使学生掌握科学研究的基本方法、基本路线、基本设计原理，培养学生的科学精神和创新思维，将课程的学习转变成学生分析问题和解决问题的能力。三、教学内容及要求：1．掌握以下各项生物化学实验的基本操作技能：各种常用玻璃仪器的洗涤和使用。滴管、吸量管、微量加样器的使用。离心机、分光光度计、紫外检测仪、酸度计、层析系统、PCR仪、凝胶成像系统、摇床、水浴箱、梯度发生器、自动收集器、电泳仪系统等的使用。各种试剂的配制。2．掌握以下各项生物化学实验基本技术和基本原理蛋白质的颜色反应、比色分析法和紫外分光光度法测定蛋白质的含量。血清γ-球蛋白提纯（盐析法、分子筛层析）。醋纤膜电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化蛋白质。DEAE-离子交换层析法分离血清蛋白质。酶促反应动力学有关方法（底物浓度、PH、抑制剂、激活剂对酶促反应速度的影响）。真核生物DNA、RNA的提取鉴定方法和技术。重组质粒DNA的提取、酶切与鉴定的方法。3．熟悉生物化学实验技术的有关理论盐析、透析与反透析、超滤、冷冻干燥实验理论。分光光度法及比色分析法基本原理。离心理论。层析技术理论。电泳技术理论。核酸杂交、基因重组实验技术理论。生物大分子分离、纯化的一般实验设计相关理论。实验误差、数据处理、有效数字相关理论。精密度、标准差、变异系数、回收率概念及理论。四、学时分配序号实验项目内容提要学时分配主要仪器设备实验地点备注1酶促反应动力学验证PH、底物浓度、抑制剂、激活剂对酶促反应速度的影响8学时水浴装置分光光度计实验中心必修2聚丙烯酰胺凝胶电泳学习电泳概念、实验原理、影响因素和电泳的种类及其应用；掌握垂直板电泳操作技术8学时电泳装置紫外聚胶装置实验中心必修3蛋白质的颜色反应学习分光光度法的基本原理、分光光度计722型的基本结构及使用方法、分光光度计使用中应注意的问题、比色分析法的几种计算方法、蛋白质颜色反应原理4学时分光光度计水浴装置实验中心必修4测定蛋白质含量的比色分析法掌握蛋白质含量分析实验技术4学时分光光度计水浴装置实验中心必修5DEAE纤维素离子交换层析法分离蛋白质学习层析技术原理、层析技术分类、层析装置的使用及层析实验操作技术8学时层析装置实验中心必修6血清γ-球蛋白的提纯学习蛋白质分离纯化基本原理、血清蛋白的分类及其实验操作技术4学时层析装置透析装置离心装置实验中心必修7醋酸纤维素薄膜电泳学习薄膜电泳分类、原理及其实验操作技术4学时电泳装置实验中心必修8真核细胞DNA与RNA学习真核细胞DNA与RNA的特点与分离提取实验操作技术8学时电泳装置离心机实验中心必修的分离提取水浴装置紫外透射仪低温冰箱9质粒DNA的提取与酶切鉴定学习质粒DNA的特点、应用与分离提取鉴定试验操作技术8学时电泳装置离心机水浴装置紫外透射仪微量加样器实验中心必修五、考核方式：实验课考核方式由包括实验理论、实验操作考核、实验课课堂表现成绩、实验报告组成。