Anti-CCP.

Anti-CCPTraining抗环瓜氨酸肽抗体产品培训目录类风湿关节炎ElecsysAnti-CCP产品介绍风湿病介绍•风湿病：是一种全身性疾病，主要累及结缔组织，大多数病人有关节、肌肉的病变，与机体的免疫学异常有关，属于自身免疫性疾病骨关节炎脊柱骨关节病类风湿关节炎风湿病结缔组织病SLE血管炎感染性关节炎代谢性骨病关节外风湿病晶体性关节病什麽是类风湿关节炎？•类风湿关节炎(rheumatoidarthritis,RA)–风湿病的一种，其特征是慢性对称性多关节炎,以双手、腕、膝、踝和足关节受累最为常见。患者可伴有发热、贫血、皮下结节及淋巴结肿大等关节外表现。类风湿关节炎的危害•关节表现–关节畸形，腕和肘关节强直、掌指关节的半脱位、手指向尺侧偏斜和呈“天鹅颈”样及钮孔花样表现–重度的关节损害，纤维性或骨性强直，并因关节周围肌肉萎缩、痉挛失去关节功能，致使生活不能自理天鹅颈样改变钮孔花样表现尺侧偏斜类风湿关节炎的危害•关节外表现–类风湿结节–心、肺、肾、周围神经及眼等病变–降低患者的生活质量–平均缩短生存期10-15年–心肌梗死和中风的发生风险增加一倍–心血管死亡风险提高30%类风湿关节炎流行病学•全球发病率1%左右，中国发病率为0.32-0.36%，约400万人•RA多发于女性，男女比例约为1:2~1:4•RA的女性高发年龄在35-44岁，男性高发年龄在55-64岁•早期类风湿关节炎症状不明显，临床确诊困难，患者丧失正确诊断和治疗的机会类风湿关节炎诊断挑战与机遇•临床诊断主要依据（1987年版美国风湿病协会类风湿关节炎分类标准）–症状体征–X线检查–实验室检查（局限性）•血沉•C反应蛋白（CRP）：急性炎症反应•类风湿因子（RF）：慢性疾病、结缔组织病和健康老年人-特异性差•自身抗体检测的优势：–Anti-CCP、抗角质蛋白（AKA）、抗核周因子（APF）特异性高，后两者敏感性低–利于类风湿关节炎的早期诊断2009ACR/EULAR联合推荐类风湿关节炎的诊断标准每个范畴取最高值，总分超过6分即可诊断为RA•受累关节-1个中到大的关节（0分）-2-10中大关节（1分）-1-3小关节（2分）-4-10小关节（3分）-超过10个小关节（5分）•滑膜炎持续时间-少于6周（0分）-6周或更长的时间（1分）•急性期反应物-C反应蛋白和红细胞沉降率均正常（0分）-C反应蛋白或ESR异常（1分）•血清学-类风湿因子和抗瓜氨酸合成蛋白抗体阴性（0分）-两个测试至少有之一是低滴度阳性。低滴度定义为超过正常上限，但不高于3倍正常值上限（2分）-至少有一个试验高滴度阳性，如滴度超过3倍正常上限（3分）ElecsysAnti-CCP临床应用利于类风湿关节炎早期诊断及时干预•早期RA诊断的重要指标–10%的RA在首个临床症状出现前10年左右即可检测阳性–40%的RA发作和70%的RA首次就诊前1年出现阳性–可早期预测未分化关节炎向类风湿关节炎的的发展•Anti-CCP（+）的患者93%进展为类风湿关节炎•Anti-CCP（-）的患者25%进展为类风湿关节炎•减少RF阴性患者漏诊–Anti-CCP抗体出现独立于RF–20%-57%RF阴性的RA，Anti-CCP阳性•预测关节损害的独立指标–Anti-CCP阳性的RA出现严重的关节损坏明显多于阴性患者•RA与其他疾病的鉴别诊断–20%慢性丙型肝炎（HCV）有关节受累等类风湿疾病症状–50%HCV和HCV相关性关节炎患者RF阳性，但这类患者Anti-CCP阴性目录类风湿关节炎ElecsysAnti-CCP产品介绍瓜氨酸是一个非标准的氨基酸，不参与体内蛋白质翻译。瓜氨酸是由精氨酸残基通过精氨酸脱亚氨酶修饰产生.Anti-CCP环瓜氨酸肽抗体Anti-CCP介绍•1998年，Anti-CCP在类风湿关节炎患者的关节滑膜液里发现•第一代的抗瓜氨酸肽抗体，采用ELISA法检测，特异性高大于90%，但是敏感性只有30-40%•2002年，采用ELISA法检测（96孔板，手工）的第二代的Anti-CCP产品产生，在保持特异性的情况下，敏感度显著提高•ElecsysAnti-CCP是采用电化学发光法全自动环瓜氨酸肽第二代检测方法,特异性高达97%，敏感度68%。Anti-CCP类风湿关节炎早期诊断的特异性指标参数Anti-CCPRF灵敏度87%*50-80%*50-80%*78%*81%*特异性85-99%*55-85%*98%*90%*1.KarayevD,MorrisRI,MetzgerAL,RheumatologyDiagnosticsLaboratory,LosAngeles,CA2.Schulze-KoopsHetal.Dtsch.Med.Wochenschrift2006131264-2713.DataEurodiagnosticaElecsysAnti-CCP检测性能IgG捕获法电化学发光全自动18分完成检测，样本随时检测，不需等待足够样本数ElecsysAnti-CCP性能参数所需血液标本量少15μL适合不同的血液标本血清、肝素锂或K3-EDTA抗凝的血浆检测范围宽7-500U/ml试剂稳定性高2-8度保存12个月/试剂盘与冰箱交替保存4周卓越的精密度批内检测精密度离散系数CV值5%多中心检测精密度离散系数CV值约为1%Cut-off值17U/ml临床敏感度68%临床特异性Non-RA：97%健康人高达99%一份标本解决多个问题同时检测Anti-CCP、RF、CRPElecsysAnti-CCP–溯源性溯源至商品化的第二代的Anti-CCP检测Datasource:ElecsysAnti-CCPRefStandB005/07MPkitCS=CalSetMK=MasterCalibratorPK=humanserameasuredwithacommerciallyavailableAnti-CCP2assayElecsysAnti-CCP不同平台结果的可比性好数据来源：ElecsysAnti-CCPRefStandB029/07P2kit回归曲线y=-04836+0.9708*xn=47Rangeupto200U/mL欧洲5个机构参与的多中心评估研究，N=2119研究目的：检测技术（精密度，方法学比较）和临床评估（敏感性和特异性）临床诊断样本量RA792SLE84Sjögren17Systemicsclerosis33PM/DM16Otherconnectivetissuediseases16Vasculitides47Psoriaticarthritis86Otherspondyloarthropathies60Osteoarthritis35Otherrheumaticdisorders73临床诊断样本量IBD52Autoimmunethyroiditis/hepatitis31HepatitisB/C*79Livercirrhosis26Renalfailure31Borreliosis*56Bacterialinfections*57Parvovirus*50Viral/fungalinfections*58健康人420ElecsysAnti-CCP:评估研究ElecsysAnti-CCP评估研究批内的不精密度CV约为1%瑞士德国意大利法国西班牙ControlA-CCP1(Target24.50)SD0.1470.1600.1680.2290.249CV%0.60.60.70.91.0ControlA-CCP2(Target157.0)SD0.9380.8001.0090.6451.146CV%0.70.60.70.40.8Samplepool1(Target17.20)SD0.1420.0870.2060.0970.127CV%0.90.51.20.50.7Samplepool2(Target363.0)SD5.2563.6603.0473.3236.032CV%1.51.01.30.91.6CV2-Limit(range25-200U/mL)CV3-Limit(range200-1000U/mL)CV1-Limit(range7-25U/mL)02468101210.00100.001000.00平均值CV[%]Samplepool1(Target17,2)ControlAQ-CCP1(Target24,5)ControlAQ-CCP2(Target157,0)Samplepool2(Target363,0)ElecsysAnti-CCP研究评估批内不精密度红色线代表不同anti-ccp浓度区间的CV值ElecsysAnti-CCP评估研究总体不精密度瑞士德国意大利法国西班牙ControlA-CCP1(Target24.50)Mean24.643624.6425.4626.03CV%3.01.52.23.76.2ControlA-CCP2(Target157.0)Mean137.1136.8147.1141.8141.15CV%2.51.92.33.45.4Samplepool1(Target17.20)Mean16.8817.6217.1216.5817.30CV%3.12.24.64.49.9Samplepool2(Target363.0)Mean356.0370.1348.3361.8367.6CV%4.52.26.83.48.6ElecsysAnti-CCP评估研究总体不精密度CV2-Limit(range25-200U/mL)CV3-Limit(range200-1000U/mL)CV1-Limit(range7-25U/mL)02468101214161810.00100.001000.00平均值CV[%]Samplepool1(Target17,2)ControlAQ-CCP1(Target24,5)ControlAQ-CCP2(Target157,0)Samplepool2(Target363,0)ElecsysAnti-CCP抗干扰能力高γ球蛋白血症的患者，Anti-CCP会出现假阴性！影响因素抗干扰最高浓度是否影响检测胆红素25mg/dL×溶血0.5ng/dL×脂血1500mg/dL×生物素30ng/mL×类风湿因子150IU/mL×ElecsysAnti-CCP方法学比较1,0010,00100,001000,0010000,001,0010,00100,001000,0010000,00EurodiagnosticaImmonoscanRA[U/mL]ElecsysA-CCP[U/mL]Elecsyscut-off17U/mlEurodiagnosticacut-off25U/mln=27n=42n=549n=1501•检测结果一致性95.9-97.5%ElecsysAnti-CCP方法学比较N=2119Elecsysanti-CCP检测和欧洲诊断检测1501例同时阴性Elecsysanti-CCP检测和欧洲诊断检测549例同时阳性27例欧洲诊断阴性患者，Elecsys检测阳性（临床证实：12例RA，15例非RA患者）42例欧洲诊断阳性患者，Elecsys检测阴性（临床证实26例非RA患者，16例RA患者）ElecsysAnti-CCP方法学比较•ElecsysAnti-CCPROC曲线下面积为0.85(95%可信区间:0.83-087)•ELISA方法Anti-CCPROC曲线下面积为0.82(95%可信区间为0.80-0.84)Anti-CCP竞品分析ElecsysAnti-CCP全自动检测，只需18分钟公司罗氏欧盟雅培AxSYMArchitect方法电化学发光法酶免分析法MEIACMIA自动化全自动手工全自动全自动定标2点5点66点检测时间18分钟至少2小时20分钟16分钟样本量15ul1:101预稀释1:100预稀释-检测范围7-500U/ml1-200U/ml1-200U/ml0.5-200U/ml试剂稳定性+++++++++离散