第二章食品微生物检验常用的仪器-第二章食品M检验常用的仪

一、常用仪器及其使用•显微镜•冰箱•超净工作台、杀菌锅•离心机•水浴锅、培养箱•烘箱或干燥箱•匀质器•各种玻璃器材（一）显微镜普通显微镜的保养1、观察完后，移去观察的载玻片标本。2、用过油浸镜的，应先用擦镜纸将镜头上的油擦去，再用擦镜纸蘸着擦镜液擦拭2—3次，最后再用擦镜纸将二擦镜液苯擦去。3、转动物镜转换器，放在低倍镜的位置。4、将镜身下降到最低位置，调节好镜台上标本移动器的位置，罩上防尘套。数字显微镜（二）、培养箱1.智能隔水恒温培养箱2.隔水培养箱3.电热培养箱4.生化培养箱卧式恒温振荡培养箱电热恒温培养箱1、普通恒温培养箱智能培养箱•微电脑智能化双目控温系统具有控温保护、准确、可靠。工作温度任意调节并具有偏差报警功能，镜面不锈钢内胆，外门内层用一层门，观察箱内情况时不影响箱内温度。9000系列隔水式加热方式，具有温度均匀且断电后仍能保持较长时间恒温。隔水式培养箱•隔水式培养箱数字控温，不锈钢内胆，俗称水夹套培养箱。温度均匀，断电后仍能保持较长时间恒温。电热恒温培养箱2、生化培养箱3、二氧化碳培养箱培养箱的配置和使用配置：22（℃）、30（℃）、37（℃）培养箱各一个使用注意事项：(1)箱内不能放入过热或过冷的物品，取放物品时应快速进行并做到随手关闭箱门。(2)内放一杯水，以保持湿度。(3)培养物不能放在最底层，也不得放置过于拥挤。(4)每月消毒一次，先用3%的来苏尔液涂布消毒，再用清水擦净。(5)不得当烘箱使用。4、水浴锅（1）37℃和42℃水浴锅24小时工作；（2）其余水涡锅用后关掉电源；（3）水浴锅内应注加蒸馏水而非自来水，使用时请注意水位。配置：37℃、42℃、56℃各一个匀浆机（三）匀质器高速匀浆机无菌均质器无菌均质器该均质器广泛用于动物组织、生物样品、食品、化妆品的均质处理，特别适合于微生物检测样本的制备，具有均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理、不需洗刷器皿的特点，样本装在特制的一次性无菌均质袋中，不与仪器接触，预防交叉污染。（四）、超净工作台三大类型：侧流式、直流式和外流式垂直流超净工作台水平单向流洁净工作台超净台的使用和注意事项1、使用前先打开紫外灯照射，紫外线照射时间40~60分钟；2、使用中，有机玻璃罩受到污染，严禁用酒精棉球擦拭，请用含水棉布檫拭；3、请保持超净台整洁，不要堆积杂物；4、使用完毕，勿忘关闭煤气开关或酒精灯；5、请做好使用记录。6、如遇故障，除记录在册外，还应及时与有关人员联系，尽早排除故障。7、学期开始做无菌试验一次，以保证净化台正常使用。平时可根据情况，定期做无菌试验，以测定净化台是否符合无菌要求。（五）、离心机•离心机的类型：•普通离心机•高速离心机•超速离心机类型普通离心机高速离心机超速离心机最大转速(r/min)600025000可达75000以上最大RCF（g）600089000可达510000以上分离形式固液沉淀固液沉淀分离密度梯度区带分离或差速沉降分离转子角式和外摆式转子角式、外摆式转子等角式、外摆式、区带转子等仪器结构性能和特点速率不能严格控制，多数室温下操作有消除空气和转子间摩擦热的制冷装置，速率和温度控制较准确、严格。备有消除转子与空气摩擦热的真空和冷却系统，有更为精确的温度和速度控制、监测系统、有保证转子正常运转的传动和制动装置等。应用收集易沉降的大颗粒（如RBC、酵母细胞等）收集微生物、细胞碎片、大细胞器、硫酸铵沉淀物和免疫沉淀物等。但不能有效沉淀病毒、小细胞器（如核糖体）、蛋白质等大分子。主要分离细胞器、病毒、核酸、蛋白质、多糖等甚至能分开分子大小相近的同位素标记物15N-DNA和未标记的DNA。台式高速冷冻离心机差速沉降（沉淀）法：密度梯度离心法：转子许多离心机可以配用不同大小的离心管，只需要改变转子或使用一个与不同的吊桶/适配器相配的转子。•1．水平转子：盛样品的离心管放在吊桶内，以转子的加速度运转。水平转子用于低速离心机，其主要缺陷是延长了沉淀的路径。同时，减速过程中产生的对流会引起沉淀物的重新悬浮。•2．角式转子：许多高速离心机及微量离心机安装。由于沉降路径短，沉淀颗粒时角式转子比水平转子的效率更高。•3．垂直管转子：用于高速及超高速离心机进行等密度梯度离心时。这种转子在沉淀没有形成之前不能用来收集悬浮液中的颗粒。转子：（a）水平转子；（b）固定转角转子；（c）垂直离心管转子（六）、灭菌器•干热灭菌器•湿热灭菌器1、电烘箱（干燥箱）用途：用于玻璃器皿等耐热物品的烤干和灭菌。玻璃器皿等物的灭菌，温度160~165℃，灭菌2小时。玻璃器材的干热灭菌方法(1)将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥后，用报纸包好，或装入特制的铁筒中。(2)将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中，彼此间留有一定的空隙以便流通空气。(3)关紧箱门，打开排气孔接上电源。(4)待箱内空气排出到一定程度时，关闭上排气孔，继续加热至一定温度后，调节温度控制旋钮固定温度，在160℃—165℃保持2小时即可。(5)待自然降温冷却后(60℃以下)才能开门取出玻璃器皿。2、高压灭菌锅•用途：培养基、生理盐水、废弃物、采样器、纱布、衣物的灭菌。•种类：手提式、立式、卧式杀菌锅不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器（电热）全自动高压灭菌器大型高压蒸汽杀菌锅的基本操作方法1.放干消毒锅内的剩余水，加入纯净水至最高水位；2.放入物品，关上消毒锅门；冷凝阀开1圈；消毒钮顺时针拨至“关”；3.选择所需的杀菌压力0.07、0.11或0.14Mpa后；开启电源；4.当温度达到100℃左右时就可将消毒钮顺时针拨至“消毒”及冷凝阀关至刚好有冷凝水和蒸气冒出为止；5.当消毒室温度达到所需温度时开始计时，到时间后关闸。使用高压蒸汽杀菌锅的注意事项A：为避免烫伤，只有当温度降低到70℃以下时放可小心的打开消毒锅门。B：为避免消毒锅冷却后消毒室内产生负压而打不开消毒锅门，所以当消毒室温度低于70℃时就可慢慢把门打开。C：根据消毒物品选择排气方式：（1）.如有液体（营养液等）请选择慢排。（2）.如只有废品等可选择快排。手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法（1）、关好排水阀门放入清水至标度为止。（2）、将要灭菌的物品用牛皮纸盖好后放入灭菌锅中，关上器盖。（3）、通电加温，同时打开排气活门，排尽锅内的空气，再关闭活门。（4）、当达到所需温度时开始计时，并在此温度下保持所需的时间。（5）、稍微打开一点排气活门，使锅内蒸气缓慢排除。（6）、当压力表指针降到零、锅内蒸气完全排尽时，立即打开锅盖取出物品。（7）、最后将高压灭菌器内的剩余水排出。思考题•干热灭菌和高压蒸汽法适用范围如何?•电热烘箱和高压锅如何操作?各有哪些使用注意事项?3、滤菌器MF75快速抽滤器方便过滤1000ml容量的培养液、缓冲液等，可直接保存和分装。可高温灭菌。Nalgene可反复用抽滤装置（七）、普通冰箱冰柜1、取用冰箱冰柜内物品尽可能快，取完后及时将有用物品放回原处；2、关冰柜门时应轻轻合上，同时将门轻轻往外拉一下检查是否关好;3、冰柜内的不要样品应及时清理。菌落计数器自动细菌菌落测定分析仪1、可直接测读菌体本身在培养液中造成的导电度变化，或利用菌体在代谢过程中的产物所造成的导电度变化，快速测定样品中细菌含量数目。2、适用于各种食品，制药，石化工厂的微生物品质管理，取代传统方法将侦测时间由3-5天减到几个小时。亦可用于做样品的抗菌性试验。快速自动菌数导电测定仪细胞的总数、细胞的直径、平均直径、细胞浓度等。仪器全自动操作，避免人工操作的误差，数据精确，省时省力。是您作细胞研究的好助手，是研究细胞的更高层次的选择细胞/颗粒分析计数仪空气微生物检测仪适合CGMP药厂,食品加工厂,医院手术防,无尘无菌室室Class100~100000之等级微粒子落塵计数器二、常用玻璃仪器及用具1、移液管1ml，2ml，5ml，10ml，25ml（一）量器类2、容量瓶50ml，100ml，250ml，500ml，1000ml3、量筒容量（ml）10、25、50、10、25、500、1000、2000固定体积移液器数字型可调移液器P型4、微量取样器（二）、其他常用玻璃器皿3.5cm,7cm，9cm，15cm1、培养皿2、试管各种试管的使用•13mmX100mm：生化反应及凝集反应•15mmX150mm：斜面培养•18mmX180mm：检样稀释型号150ml，200ml，250ml，500ml，1L，2L，3L3、三角瓶烧杯容量（ml）：30、50、100、150、250、400、600、1000、2000、3000三、玻璃器皿的清洗和灭菌(一)、新购的玻璃器皿1、先用热肥皂水刷洗，流水冲净。2、再浸泡于１～２％的盐酸中数小时，最后用流水冲净。(二)、用过的玻璃器皿1、含油脂器材的清洗（1）、单独高压灭菌；（2）、趁热倒去污物；（3）、倒放在铺有吸水纸的篮子上，置100℃烘箱中烤0.5h;（4）、再用5%的碳酸氢钠水煮两次，再用肥皂水刷洗干净。2、含菌试管的清洗•高压灭菌后，肥皂水刷洗干净，烘干或晾干备用。3、含菌平皿的灭菌（1）、底盖分开放，放入桶中，高压灭菌；（2）、趁热倒去污物；（3）、肥皂水刷洗干净，烘干或晾干备用。4、含菌吸管的清洗（1）、把含菌吸管投入3%的来苏尔液内浸泡30min以上杀菌；（2）、用肥皂水洗涤一次；（3）、最后用清水冲洗干净即可。5、载玻片及盖玻片的清洗（1）将载玻片及盖玻片分别浸入5%的来苏尔液内浸泡过夜，取出水洗干净；（2）盖片用软布擦干即可；（3）染色用的载玻片要放入肥皂水中煮沸10min，再用肥皂水刷洗干净，最后用95%的酒精浸泡片刻，晾干备用。（三）、玻璃器材的灭菌（1）清洗后烘干；（2）加塞包扎；（3）灭菌:干热灭菌:160~165℃烘箱中烤2h湿热灭菌:121℃20min思考题1、在微生物实验室中如何配置培养箱,使用中要注意哪些问题?2、在微生物实验室中如何配置水浴锅,使用中要注意哪些问题?3、如何正确使用超净台?4、如何正确使用干热灭菌方法对玻璃器材进行灭菌?5、简述手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法6、如何进行玻璃器皿的清洗和灭菌?