细胞生物学技术(1)

细胞生物学技术第一部分电子显微镜技术第二部分细胞化学技术第三部分分析细胞学技术第四部分培养细胞技术第一部分电子显微镜技术第一章绪论第二章电子显微镜的基本理论第三章透射电子显微镜第四章扫描电子显微镜一电子显微镜的诞生和发展二电镜样品制备技术三电镜技术在医学领域的应用第一章绪论一电子显微镜的诞生和发展（一）电子显微镜诞生的理论基础：1任何快速运动的粒子都伴有电磁辐射电子辐射波波长约为0.05Å(比可见光的波长短十万倍)2高速运动的电子在电场或磁场的作用下会发生折射并聚焦（二）电子显微镜的发展30年代第一台电子显微镜诞生（1931年）60年代电镜种类增多80年代电子显微学90年代电镜计算机一体化二、电镜样品制作技术电镜样品制作技术是制作电镜标本的综合技术1、基本样品制备技术超薄切片技术负染色技术常规扫描样品制备技术2、特殊样品制备技术电镜酶细胞化学技术电镜放射自显影技术免疫电镜技术电镜原位杂交技术三、电子显微镜技术在医学领域的应用电镜技术广泛应用于医学各个学科细胞生物学微生物学组织学病理学等学科从显微水平提高到亚显微水平，为阐明组织细胞的结构和功能发挥了巨大的作用了解生物大分子合成和代谢情况研究抗原抗体反应以及定位基因表达（一）在细胞生物学和分子生物学中的应用▲观察感染细胞内病毒形态结构▲协助病毒性疾病的诊断▲研究原虫、细菌、真菌、螺旋体等的超微结构（二）电镜是直接观察病毒结构的唯一工具不仅能看到骨表面的微细形貌，而且可以看到骨细胞的超微结构和骨基质中钙盐在胶原纤维间的沉积过程揭示了肌细胞内肌微丝的排列和结构骨组织肌系统（三）电镜技术在组织学中的应用电镜是病理学研究和疾病诊断的重要手段在基础实验病理的研究中得以广泛应用在临床疾病的诊断中发挥重要作用特别在肾脏疾病、肿瘤的诊断及鉴别诊断中电镜已成为不可缺少的工具之一（四）电镜技术在病理学中的应用区别低分化鳞癌和腺癌◆低分化鳞癌特征—张力微丝和桥粒◆低分化腺癌特征—细胞间的紧密连接连接复合体，微绒毛粗面内质网等电镜在确定肿瘤的组织发生类型和分化程度上起重要作用1．电镜技术在肿瘤诊断中的应用对神经内分泌肿瘤的诊断各种神经内分泌肿瘤中,无论其分化程度如何,是原发的还是转移的，在电镜下均可发现神经分泌颗粒。对黑色素瘤的诊断在无色素性黑色素瘤细胞中可找到未成熟的前黑色素小体（这种前黑色素小体只有电镜下观察到）由于各种肾脏疾病的超微结构病变各具特点，所以肾脏活检的电镜观察对疾病的早期诊断有十分重要的意义，是目前肾脏疾病诊断不可缺少的手段，特别是在遗传性肾炎性疾病的诊断中电镜起着决定性的作用2.电镜技术在肾脏病中的应用基底膜增厚、撕裂，颗粒状物质沉积和节段性的基底膜变薄基底膜弥漫变薄为其特征，厚度相当于正常厚度的2/3—1/3，肾小球脏层细胞质中有大量髓鞘样小体Alport综合症薄基底膜肾病（良性家族性血尿）Fabry病◆凋亡细胞形态学变化及其发展过程主要是通过透射电镜和扫描电镜观察到的，电镜可以较准确地判定单个的凋亡细胞◆凋亡细胞在电镜下具有一定的超微结构特征，细胞凋亡过程中出现一系列特征性的形态学变化大致可分为三个阶段3.电镜技术在细胞凋亡研究中的应用一、电镜技术包括：电子显微镜和样品制备技术二、电子显微镜是以电子束做光源，电磁场做透镜，具有高分辨率，高放大倍率的显微镜三、样品制备技术是制作电镜标本的综合技术包括普通样品制备技术和特殊样品制备技术四、电子显微镜技术是研究细胞超微结构最重要的手段,广泛应用于医学各学科.第一章小结