201504HPV感染与宫颈癌

HPV感染与宫颈癌HumanPapillomavirus(HPV)andCervicalCancer看看这位英年早逝的艺人，她死于宫颈癌……主要内容1.什么是宫颈癌？2.关于HPV3.宫颈病变与HPV感染有什么关系？4.HPV实验室检测5.宫颈癌的筛查6.如何预防宫颈癌？一、什么是宫颈癌？什么是子宫颈癌？子宫颈癌又称宫颈侵润癌，简称宫颈癌，由癌前病变逐步发展而来的。是目前唯一病因明确、可以预防的恶性肿瘤。子宫颈癌现状女性第二大常见恶性肿瘤全世界每年新病例数为56.5万在发展中国家宫颈癌的发生率为发达国家6倍，有50%的病例发生在中国和印度中国每年新病例为18.15万中国每年有3万多的妇女死于宫颈癌发展中国家的新发病例多是晚期患者•未能早期诊断•细胞学检查未能普及•阴道镜应用条件受到限制•民众对宫颈癌的防范意识欠缺发病年龄•原位癌的发病年龄为35-39岁•浸润癌为40-49岁宫颈癌的新动向近年来由于生活方式的改变发病率:有上升趋势发病年龄:趋向年轻化哪些妇女更容易患宫颈癌•性生活过早•早孕多产或多次人工流产•自己或性伴侣有多个性伴侣•曾经或正患有生殖道HPV感染•有或曾经患有其它性病•吸烟、吸毒和营养不良•内分泌紊乱或免疫力低下的妇女现在基本明确宫颈癌的病因就是高危型HPV的持续性感染感染HPV病毒到发展成浸润癌需要大约十年的历程，只要定期进行妇科健康检查，就可以及早发现子宫颈癌癌前病变并加以治疗，就可预防子宫颈癌的发生宫颈癌可以预防和治愈二、关于HPV(humanpapillomavirus,人乳头状瘤病毒)电镜下HPV乳多空病毒科A属成员直径50-55nm无被摸正20面体构成的病毒壳体HPV•乳头瘤病毒科属小DNA病毒•乳头瘤病毒的基因组主要编码三组基因–三个癌基因，包括E5、E6和E7，负责调节癌细胞转化过程；–两个调节基因，包括E1和E2，负责调节转录和病毒基因组的复制；–两个结构蛋白基因，包括L1和L2，组成病毒颗粒HPV具有正常细胞永生化能力及高度种属特异性和特殊嗜上皮性，病毒DNA以整合形式存在于宿主细胞中病毒DNA储存于具生发活性的基底细胞，呈隐性状态HPV仅限于在人上皮中具有一定分化程度的角质形成细胞内才能增殖皮肤、粘膜的柱状上皮和鳞状上皮是HPV侵犯最敏感之处HPV不进入血液，不产生病毒血症HPV传染•属于常见的性传播感染•直接的皮肤-皮肤接触是传播的最有效途径•病毒不通过血液或体液传播（例如精液）HPV感染10－30％成人感染HPV,性活跃人群甚至更高（50％－80％）好发年龄20-29岁(40%)潜伏期:3周–8月(平均2.8月)HPV感染转归1%－2%发生临床可见的湿疣大多数感染无症状，成为潜伏感染或亚临床感染(SPI),与机体天然免疫有关一般1－2年内自行清除,70%女性可以于二年内通过自身免疫消除SOURCE:GRAPHADAPTEDFROMR.L.WINERETAL.,AMERICANJOURNALOFEPIDEMIOLOGY157,218(2003)美国某大学467女性大学生常规妇检:HPV的PCR检测结果：生殖道HPV检出率46%5年后60％的女性被查出过HPV感染70％女性一年内生殖道HPV自行清除HPV分型•最重要的分类学单元是型(type)•与宫颈癌相关程度较为清楚的HPV型归为高危型HPV（16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,68,73）和疑似高危型HPV（26,53,66）•与尖锐湿疣等良性疾病相关的HPV被归入低危型HPV（6,11,40,42,43,44,54,61,70,72,81，89），一般认为这类HPV的感染不会诱导宫颈癌的发生三、宫颈病变与HPV感染有什么关系？HPV致宫颈癌进展示意8—10年（100%治愈）2—5年（死亡）正常低度病变高度病变原位癌侵润癌宫颈癌前病变宫颈上皮细胞内瘤变（CIN）；包括宫颈非典型增生和宫颈原位癌，反映宫颈癌发生、发展的过程。从细胞学分为CINI、Ⅱ、III级，包含宫颈鳞状上皮细胞内病变和腺细胞内病变。HPV感染多数不发展成为宫颈癌，可以在9-16(8-10)个月消失;间隔半年2次HPV（＋）为HPV持续感染;28%的持续感染者,在2年内发展为CIN1；70%的持续感染者4年内发展为CIN2;宫颈病变与HPV感染的关系HPV感染是宫颈癌发生的必要条件，其相对危险度或危险度比值比高达250。归因危险百分比超过95%；HPV阴性者几乎不会发生宫颈癌四、HPV实验室检测临床常用的HPV检测方法•病理学检查•细胞学检查•免疫组化检测•原位杂交技术检测•聚合酶链反应(PCR)技术•DNA芯片分型检测•杂交捕获DNA分析病理学检查•鳞状上皮疣状乳头状增生•表皮角化不全•棘层不规则增厚•基底层增生•上皮脚延长•中表层出现灶状分布的挖空细胞等。细胞学检查•凹空细胞、角化不良及湿疣外底层细胞•细胞学诊断HPV感染敏感性较差免疫组化检测•检测HPV的衣壳抗原来进一步明确HPV感染•所得阳性反应定位明确,判断可靠•必须在HPV-DNA复制成熟后才有衣壳装备•敏感性较低原位分子杂交用来测定基因或特定核苷酸序列在核酸分子的所在部位，检测重组体DNA。通过非放射性探针对石蜡组织进行检测,能作定位检测,假阳性率低,但灵敏度不高,大大降低了临床使用价值。杂交捕获DNA分析•标本中的HPV-DNA与液相中的RNA探针结合,形成特异性的RNA-DNA杂交体,被微孔板内的特异抗体所捕获,然后被所加的发光底物检测,其发光的强度与标本中的DNA量成比例,因而可对HPV进行半定量检测•效率高,适于大量人群检测,临床上操作简便DNA裂解→RNA-DNA杂交→抗体捕获→化学发光→计算机判读裂解加入探针杂交加入二抗和发光剂聚合酶链反应(PCR)技术•设计与HPV-DNA互补的一对特异性核苷酸引物,以HPV-DNA为模板以指数增长的速率进行体外扩增•敏感性最高,可对HPV进行分型,测定病毒载量,发现新基因型,对基因进行序列分析•缺点为样品间易交叉污染导致假阳性聚合酶链反应(PCR)技术•原理：采用HPV13种型别的特异性引物及荧光探针，应用聚合酶链式反应（PCR）结合Taqman技术，对HPV13种型的特异性DNA核酸片段进行分型定性检测。•最低检测限：1.00E+04copies/mL。聚合酶链反应(PCR)技术•感染生殖道的HPV可分为两种：低危型和高危型。本试剂对生殖道泌尿道分泌物及宫颈细胞中的人乳头瘤病毒（Humanpapillomavims，HPV）16型、18型、31型、33型、35型、39型、45型、51型、52型、56型、58型、59型68型这13种型别的特异性DNA核酸片段进行荧光PCR分型定性检测，可用于临床对高危型人乳头瘤病毒感染引起的宫颈癌等疾病的辅助诊断。五，宫颈癌的筛查筛查对象•21岁以上有性生活史或具有性生活三年以上的任何妇女。•高危人群：有多个性伴侣、性生活过早、HIV/HPV感染、机体免疫功能低下、卫生条件差/性保健知识缺乏。•某些情况无需进行筛查，如因良性疾病摘除子宫的妇女。•起始年龄：在我国经济发达地区为25－30岁；经济欠发达地区为35－40岁。对于高危妇女人群，筛查起始年龄应适当提前。•终止年龄：65岁后患子宫颈癌的危险性极低，故一般不主张对65岁以上的妇女进行子宫颈癌筛查。筛查间隔•1、每年一次细胞学检查，连续2次（-），可3年一次•2、连续2次HPV（-），细胞学检查（-）可5～8年一次•3、高危人群：最好每年一次（CIN及以上、特殊职业、30岁以上高危HPV感染者）六，子宫颈癌的生物学预防HPV疫苗预防性疫苗：针对健康人群。靶向病毒衣壳蛋白L1和L2，刺激机体产生保护性中和抗体，以阻断HPV感染。治疗性疫苗：应用对象为已感染人群。靶向病毒的E6、E7蛋白。主要用于清除在上皮基底细胞内复制的病毒和HPV导致的异常细胞。“子宫颈癌是第一个有望可以预防的妇科癌肿(WHO/IARC)”“我们不可以阻断子宫颈癌的发生，但可以防止死于子宫颈癌”原因：位置表浅病因明确疾病演变时间长有较成熟的干预方法