11DNA重组技术的基本工具知识点

1.1DNA重组技术的基本工具1、（a）基因工程的诞生（一）基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在水平上进行设计和施工的，又叫做。2、（a）基因工程的原理及技术原理：基因重组技术：（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——（1）来源：主要是从中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种的核苷酸序列，并且使每一条链中部位的两个核苷酸之间的断开，因此具有性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：和。2.“分子缝合针”——(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合键。②区别：E·coliDNA连接酶来源于，只能将双链DNA片段互补的之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合，但连接平末端的之间的效率较。(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接的末端，形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”——（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中。②具有限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是,它是一种裸露的、结构简单的、独立于，并具有能力的双链DNA分子。（3）其它载体：一．知识网络概念：又叫DNA重组技术，是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品来源：主要从原核生物分离纯化限制性核酸内切酶（限制酶）作用：识别双链DNA中某种特定的核苷酸序列，并使特定部位的磷酸二酯键断开结果：产生黏性末端或平末端基来源：大肠杆菌本作用：连接黏性末端工来源：T4噬菌体具作用：可连接两种末端常用载体：质粒能在受体细胞中复制并稳定保存基因进入受体细胞的载体必备条件具有一至多个限制酶切点（“分子运输车”）具有标记基因E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶（“分子手术刀”）DNA连接酶“分子缝合针”基因工程