临床生化检验校准与检验结果溯源性

临床生化检验校准与检验结果溯源性陈文祥卫生部临床检验中心卫生部北京医院老年医学研究所临床生化检验校准(分析校准)临床检验量值的计量学溯源(ISO17511)参考系统关于临床检验量值溯源常规方法需具有足够的特异性参考物质需具有互通性建立的溯源性需进行验证临床检验校准(溯源)的“理想”情况校准物质定值程序实施uc(y)a)CGPM的SI单位定义b)一级参考测量程序BIPM,NMIa,ARMLac)一级校准物BIPM,NMIaj)用户常规测量程序厂家和/或终用户常规样品终用户结果终用户校准物质定值程序实施uc(y)a)CGPM的SI单位定义b)一级参考测量程序BIPM,NMIa,ARMLac)一级校准物BIPM,NMIaj)用户常规测量程序厂家和/或终用户常规样品终用户结果终用户“基质效应”临床检验中的“基质效应”关于“基质效应”(互通性问题)目前多数常规方法基于生物化学原理，适合作用于实际生物样品作用于基质不同的“样品”（纯物质溶液、冻干样品、含添加成分样品等）的能力或程度可能不同参考物质(校准物)的互通性用两程序测量此物质所得结果的数字关系，与用这两个程序测量实际样品所得结果的数字关系一致(无“基质效应”)020406080100120020406080100120方法I方法II新鲜样品参考物质A参考物质BCharacteristicsofDifferentTypesofReferenceMaterialsPrimarystandardsCRMRoutinecalibratorsControlsPurity++++--Stability+++++++++++Accuracyofthetarget+++++++++(*)++(*)Commutability-+(+++)(+++)+(+++)*NotnecessarilycoincidentwiththeeffectiveanalytecontentCommutabilityofaMaterial•Thedegreetowhichagivenmaterialdemonstratesinter-methodchangesinresponse(fortwoormoremeasurementprocedures)comparabletothechangesinresponseobservedforfreshhumansamples.•Thispropertydependsuponspecificmaterial–methodinteraction.•Itcanbedemonstratedonlyexperimentally.临床生化检验校准有关问题(1)如何校准？按厂家说明，使用配套试剂-校准物(2)能否试剂A，校准物B？除非通过实验验证(或重新定值)试剂-校准物的完整性考虑厂家技术支持考虑(3)配套试剂-校准物不准怎么办？换用其他试剂-校准物临床生化检验校准有关问题(4)其他校准影响因素？空白方式(试剂、样品、双波长)测定方式和条件(终点vs.速率，时间)“程序”与“方法”(5)校准频率？按厂家说明取决于系统(仪器、试剂)稳定性或重现性多与少，多少与误差，系统误差与随机误差临床生化检验校准有关问题(6)如何判断准不准？实际样品方法对比室间质评和室内质控的作用(6a)选择何种方法作对比方法？参考方法(理想情况，很难实现)可靠方法(经验、研究结果或技术文件)临床生化检验校准有关问题(7)多准才叫准？临床检验分析质量指标设定：-评估分析质量对具体医学决定的影响-评估分析质量对一般医学决定的影响A.根据生物学变异；B.根据医生意见-专业指南A.国家或国际专家指南；B.个人或机构专家指南-管理规定或EQAS规定A.管理规定；B.EQAS规定-当前技术水平A.EQAS或PT结果；B.方法学研究结果溯源性(Traceability)测量结果或标准量值通过连续的比较链与给定的标准相联系的属性，给定的标准通常是国家或国际标准，比较链中的每一步都有给定的不确定度。为什么溯源性？各种测量质量保证的基本原理欧盟体外诊断器具指令(诊断试剂生查厂家)医学实验室认可准则(ISO15189)(临床实验室)关于体外诊断器具的欧洲指令校准物和/或质控物定值的溯源性必须通过已有的较高级的参考测量程序和/或参考物质予以保证Directive98/79/ECThetraceabilityofvaluesassignedtocalibratorsand/orcontrolmaterialsmustbeassuredthroughavailablereferencemeasurementsand/oravailablereferencematerialsofhigherorderISO151895.6检验程序质量保证......5.6.3应设计并实施测量系统校准和正确性验证程序，以保证结果可溯源至SI单位，或可参比一个自然常数或其它规定的标准。如果以上都无法实现或不适用，应采用其他可提供结果可信性的方法，包括但不限于下列方法：a)参加适当的实验室间比对计划；b)使用合适的有证书说明其特性的参考物质；c)以其它程序进行检验或校准；d)进行比率型或互易型的测量；e)使用明确规定的各方接受的协议标准或方法；f)供应商或制造商提供的溯源性文件。欧洲指令与ISO15189欧盟指令：校准物和/或质控物定值的溯源性必须通过已有的较高级的参考测量程序和/或参考物质予以保证ISO15189：5.6检验程序质量保证……5.6.3应设计并实施测量系统校准和正确性验证程序，以保证......临床检验项目分类A类检验项目化学定义明确有完整溯源链，结果可溯源至SI单位电解质、代谢物、非肽激素、多数药物/维生素、少数蛋白质；酶催化浓度B类检验项目化学定义不明确或很难明确用约定单位表示量值，不可溯源至SI单位多数蛋白质、核酸(“溯源”不一定就是“SI”)关于临床实验室“溯源”使用参考方法？缺乏可行性目前国际上仅限于个别实验室的个别检验项目使用有证参考物质？品种、数目、性质有局限性目前国际上主要用于参考方法的质量控制若用于常规方法校准或评价，需满足互通性等性质要求目前仅限于个别检验项目临床实验室分析质量保证有关技术文件、研究结果或经验进行基本方法评价(方法对比)参加室间质评，做好室内质控ISO151895.6检验程序质量保证......5.6.3应设计并实施测量系统校准和正确性验证程序，以保证结果可溯源至SI单位，或可参比一个自然常数或其它规定的标准。如果以上都无法实现或不适用，应采用其他可提供结果可信性的方法，包括但不限于下列方法：a)参加适当的实验室间比对计划；b)使用合适的有证书说明其特性的参考物质；c)以其它程序进行检验或校准；d)进行比率型或互易型的测量；e)使用明确规定的各方接受的协议标准或方法；f)供应商或制造商提供的溯源性文件。溯源的作用溯源理论上解决的是准确性问题(校准问题)准确性不足是重要的临床检验质量问题影响结果“临床准确性”的因素是多方面的方法：校准、特异性、线性、精密度、灵敏度等样品采集与处理，病人准备，(生物变异)，人为错误许多检验指标尚难实现真正意义的溯源几点思考：“理想”与“现实”“善待”我们的行业(临床实验室和厂家我国临床检验参考系统谢谢大家的时间欢迎批评指正临床检验量值溯源参考系统量值溯源或传递常规检验临床检验参考系统ISO15193:2003体外诊断医学器具——生物样本中量的测量——参考测量程序表述ISO15194:2003体外诊断医学器具——生物样本中量的测量——参考物质描述ISO15195:2003临床检验医学——参考测量实验室要求关于参考系统参考方法是关键参考物质由参考方法定值参考物质基质效应鉴定和溯源性确认需要参考方法无参考方法，则无参考实验室参考物质及其作用品种、数目、性质有局限性(主要用于参考方法的质量控制)若用于常规方法校准或评价，需满足互通性等性质要求参考方法需在参考实验室运行技术要求，人员、环境、设备要求，管理要求关于临床检验量值溯源常规方法需具有足够的特异性参考物质需具有互通性建立的溯源性需进行验证020406080100120020406080100120参考方法常规方法新鲜样品常规方法特异性(1)——特异、有校准偏差020406080100120020406080100120参考方法常规方法新鲜样品常规方法特异性(2)——“无”校准偏差、不特异溯源性的验证足够代表性的实际样品分别用参考方法和常规方法测定溯源性是指全测量范围内的溯源性，而不是“单点”溯源性；是测量范围内各点的溯源性，而不是平均值的溯源性谁应该溯源？体外诊断试剂/系统生产厂家ISO17511、18153临床实验室方法对比、参考物质，室内质控/室间质评校准在规定条件下建立由测量仪器或测量系统所指示的量值，或一种实物量具或参考物质所代表的值，与由测量标准所复现的相应量值的关系的一组操作