03微生物的分离与纯化

实验三、微生物的分离与纯化附加实验菌落计数自然界中各种微生物混合生活在一起，即使取得很少量的样品也是许多微生物共存的群体。人们要研究某种微生物的特征，首先须使该微生物处于纯培养状态。微生物的平板分离技术为人类获得丰富的微生物资源以及在工、农、医、环境、动植物细胞培养等方面做出了巨大贡献。一、实验目的：掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术。基本原理：从混合的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程——即为微生物的分离与纯化。常用方法：1、单细胞挑取法：运用专业性研究；涂布：先倒平板，后加样再涂布；2、平板分离法混合：先加样，后倒平板混合均匀；划线：挑取菌种，也可挑取土壤悬液。二、采集样品：1、土壤中微生物及其丰富，是微生物多样化的重要场所。作为科研或毕业课题要有目的到尽可能分离到的地方去采集土样。☆举例：2、制备土壤稀释液：称取10g土样，放入90ml的水，在三角瓶中充分摇匀——细胞分散▲梯度释稀：9ml水9ml水9ml水9ml水9ml水土壤10g△1ml∪1ml∪1ml∪1ml∪1ml∪0.1ml〇〇37℃培养〇〇28℃培养※见《微生物实验》P72三、教师演示：1、涂布2、混合3、划线..\微生物\MPEGAV\AVSEQ01.DAT(19min).\微生物\MPEGAV\AVSEQ02.DAT实验结果示例1：☆涂布实验结果示例2：☆划线四、实验内容：一皿涂布。1、细菌培养基一皿划线（下次）。一皿混合。★把上述三皿平板放入37℃培养培养箱培养。一皿涂布。2、察氏培养基一皿混合。★把上述三皿平板放入28℃培养培养箱培养。※同学每人做两皿涂布、两皿混合、一皿划线共五套平板倒置培养五、实验材料：涂棒、接种环、培养皿、酒精灯火机、酒精棉球六、下次实验：微生物的生长与平板计数下次实验准备：每组同学配100mL牛肉膏蛋白胨固体培养基：分装好灭菌，倒斜面，一切完毕，值日生做值日，其他同学离开实验室七、实验报告：1、统计结果，计算出1g土壤的微生物含量；2、思考题：P741(1)(2)