0609-放疗科-外照射热疗及超激光对荷VX2瘤兔TNFIGFCA-50的影响

外照射、热疗及超激光对荷VX2瘤兔TNF、IGF、CA-50的影响Effectsofteletherapy，bcaledhyperthermiaandSUPERLIZERonVX2rabbits'TNF，IGF，CA-50《现代肿瘤医学》2006年9月14卷第9期P1056~1058作者：刘建国，韩秋菊，尉继伟LIUJian-guo，HANQiu-ju，YUJi-wei（大同市第七人民医院放疗科，山西大同037005）(DepartmentofRadiationOncology，DatongRailwayCentralHospital，Datong037005，China)【摘要】目的观察外照射(teletherapy)、局部热疗(hyperthermia)、超激光(SUPERLIZER，SL)对荷VX2瘤兔的治疗作用，及其细胞因子的改变情况。方法:将健康雄性3年的新西兰大白兔80只，分成4组，外照射组(外放组)、体外高频热疗组(热疗组)、超激光治疗组(激光组)和对照组，各20只。观察肿瘤直径，生存期、同时检测肿瘤坏死因子(TNF)、胰岛素样生长因子(IGF)、血型类肿瘤抗原标志物CA-50，在VX瘤移植前后、和治疗1、3、4周后的变化。结果经治疗肿瘤直径从大到小和生存期从长至短依次为激光组、对照组、热疗组、外放组；VX2瘤移植成功后细胞因子的变化为TNF、IGF、CA-50逐渐增高，治疗4周后TNF、IGF、CA-50逐渐增高。激光组各细胞因子与对照组差异无显著性(P0.05)，但激光组和对照组与外放组和热疗组比较有显著性差异。结论VX2种植成功后对宿主细胞免疫产生明显的抑制作用。外照射对其疗效明显好于热疗，且较明显地改变其免疫过程。超激光治疗对VX2瘤治疗无效。【Abstract】Objective:Toobserveteletherapy，localedhyperthermiaandSUPERLIZEReffectsonVX2carcinomarabbits'lytokines.Methods:Eightymalewhitehealthrabbitswereselected，anddividedintofourgroups20foreach.Tumors'diameter，timeofsurvivalwereobservedandchangesofTNF，IGF，CA-50beforeandafterVX2carcinomareplantedandtreatedafterone，three，fourweekswereexamined.Results:Thediametersoftumorsandtimeofsurvivalfromlarge(short)tosmall(long)inorderwereSUPERLIZERgroup，comparisongroup，hyperthermiagroupandteletherapygroup.AfterVX2carcinomareplantedTNF，IGF，CA-50increased.AfterbeingtreatedfourweeksTNF，IGF，CA-50increasedinothergroups.Therewasnosignificantdifferencebetweensuperlizergroupandcomparisongroup(P0.05)，buttherewassignificantdifferencebetweentheobovetwogroupsandhyperthermiagrouporteletherapygroup(P0.01).Conclusion:VX2carcinomareplantedobviouslychangescell'simmunity.Thetreatedeffectofteletherapyisbetterthanhyperthermia.Teletherapycanobviouslychangethecourseofimmunity.SUPERLIZERhavenoeffectonVX2carcinoma.【关键词】放射治疗；外照射；热疗；超激光；VX2；瘤细胞因子【Keywords】radiotherapy；teletherapy；hyperthermia；SUPERLIZER；VX2；carcinomalytokineVX2瘤是Shope病毒诱发的乳头状瘤恶变后经兔传代而取得的实验性肿瘤，近似于人的实质器官原发恶性肿瘤，将其接种于兔的各个部位进行动物实验研究模型的制作，迄今有报道[1，2]。关于外照射、热疗及超激光对荷VX2瘤大白兔治疗作用的对比性观察在国内未见报道。现将我们的实验情况报道如下。1、材料与方法1.1材料：动物模型制作:选用动物品种为健康雄性3年的新西兰大白兔80只，实验动物由山西医科大学大同医学院动物饲养中心提供，体重5(5±0.35)kg，随机分为外照射组(外放组)，热疗组，激光治疗组(激光组)，对照组各20只。由中国医学科学院细胞中心提供VX2瘤大白兔，断颈处死荷瘤兔，在无菌条件下取出肿瘤，机械匀浆制备成单细胞悬液(每毫升含108个细胞)，选择大白兔的右后肢肌肉内注射已制备好的单细胞液1ml。接种后10~12天，实验动物均可触及(2.5~3)cm的肿瘤，为种植成功。1.2治疗与方法：外照射采用SIEMENSPRIMUS-M直线加速器产生的6MV-X射线，将野中心对准兔右腿处肿瘤采用SSD照射，野边界在肿瘤边缘外放(3~5)cm，照射剂量200cGy/F，DT2000cGy/10F/20d。常规分割治疗，将动物固定于木板之上。热疗采用珠海产的HG-2000型体外高频热疗机，输入电压220V，温度控制在42.5℃~43.0℃，机控输入功率在90%~95%，计算机控制其与温度相关，大于此值温度达45℃，小于此值温度低于42℃。每次热疗10min，1次/d，共15d。超激光设备为日本产SUPERLIZERHA-550(SL)直线偏振光近红外线治疗仪。照射方法直接接触病变处皮肤，输出功率90%，选用C型镜头，照射周期8:1即照射8秒停1秒，隔日1次，每次5min，15次。放射免疫监测，分别于移植前24h、种植成功后(移植后)、治疗后1、3、4周空腹状态下抽耳缘静脉血分离血清，检测项目为:TNF、IGF、CA-50。放免测定药盒及设备:细胞因子放免测定试剂由九鼎医学生物有限公司提供；使用上海原子能研究所日环仪器一厂SN-695B型智能放免γ-测量仪，测定均严格按照试剂说明书进行操作。对照组未行任何治疗。1.3统计学方法：计量资料(x_±s)表示，结果采用t检验、F检验和q检验。计数资料采用卡方检验。2、结果2.1肿瘤大小及转移、死亡情况2.1.1肿瘤大小：治疗前各组肿瘤直径大小无差异(P0.05)有均衡性，治疗结束比较各组肿瘤直径。外放组肿瘤直径(2.23±0.54)cm，其中有6/20例形成纤维硬结，破溃4/20例。热疗组肿瘤张力比较高，中心有液化，其直径为(7.65±2.78)cm。对照组肿瘤直径(10.23±3.01)cm，肿瘤张力比较高。激光组肿瘤直径(12.23±2.56)cm，破溃8/20是四个组中肿瘤最大、破溃最多的各组肿瘤直径相比较有高度显著性差异，(F=4.31P0.01)。2.1.2生存及转移情况：外放组生存天数为(68.58±5.35)d；热疗组生存天数(58.51±5.23)d；对照组生存天数为:(45.23±3.56)d，激光组生存天数(38.35±3.26)d。各组生存天数比较有高度显著性差异，(F=17.12，P0.01)。肺、肝转移情况:外放组肺转移1/20，肝转移1/20；热疗组肺转移3/20，肝转移1/20；对照组肺转移16/20，肝转移3/20；激光组肺转移11/20，肝转移2/20。各组肝肺转移比较有高度显著性差异(χ2=37.89，P0.01)。2.1.3死因：激光组、对照组以肺转移、肝转移为主，外放组、热疗组以恶液质为主。2.2细胞因子的变化情况2.2.1IGF的变化情况：治疗四周后外放组与热疗组比较有显著性差异，(q=3.99P0.05)，见表1。表1各组移植前后及治疗后的IGF的变化情况(ng/m，lx_±s)F处理组间=22.17P0.01与治疗前比较*q≥4.08P0.05**q≥7.28P0.01F单位组间=16.32P0.01与对照组比较Δq≥3.92P0.05ΔΔq≥6.99P0.012.2.2TNF的变化情况:见表2。治疗四周后外放组与热疗组比较有高度显著性差异(q=5.83P0.01)。表2各组移植前后及治疗后的TNF的变化情况(ng/m，lx_±s)组别移植前移植后治疗后1周治疗后3周治疗后4周外放组102.41±16.74208.13±52.78302.65±39.66Δ398.12±24.63ΔΔ516.51±28.31ΔΔ热疗组98.42±23.53302.01±100.75687.37±51.621004.03±108.61*Δ1183.56±170.25*Δ激光组111.80±21.51235.76±70.22888.23±36.85*1788.76±309.96**2025.24±451.35**对照组104.1±17.23251.51±40.54830.33±180.90*2045.59±318.35**2027.67±146.62**组别移植前移植后治疗后1周治疗后3周治疗后4周外放组4.45±0.56.39±0.8118.79±1.82*Δ30.54±2.83**ΔΔ40.92±2.76**ΔΔ热疗组4.54±0.895.61±1.017.99±1.4215.23±2.88*18.43±2.43*ΔF处理组间=13.47P0.01与治疗前比较*q≥3.94P0.05**q≥4.87P0.01F单位组间=8.61P0.01与对照组比较Δq≥3.51P0.05ΔΔq≥5.68P0.012.2.3CA-50的变化情况:见表3。表3各组移植前后及治疗后的CA-50的变化情况(u/m，lx_±s)F处理组间=10.01P0.01与治疗前比较*q≥3.61P0.05**q≥5.98P0.01F单位组间=7.89P0.01与对照组比较Δq≥3.87P0.05ΔΔq≥6.13P0.012.2.4移植前后骨细胞因子变化:各组移植前IGF、TNF、CA-50血清含量比较无差异(P0.05)有均衡性，移植后各组各细胞因子亦无差异(P0.05)有均衡性，移植前后各细胞因子比较有差异(P0.01)。激光组与对照组比较无显著性差异(P0.05)。3、讨论兔VX2瘤模型是一个成熟、稳定且应用广泛的肿瘤实验模型，种植在兔大腿上的VX2瘤，一般用作传种之瘤株，兔大腿肌肉血运丰富VX2瘤易于成活和观察，因此选择在兔大腿处接种。外放组、热疗组、激光组、对照组在移植前和治疗前(VX2种植成功后)所观察的TNF、IGF、CA-50增高。说明VX2瘤的生长对机体细胞因子的正常应答及肿瘤标志相关抗原的表达产生了影响。并产生一系列的损伤性的病理反应。在近几年的文献中已有大量的报道。全身热疗导致机体免疫的抑制，局部热疗则能提高免疫力。表现在增强T淋巴细胞、NK细胞和巨噬细胞的功能，NK细胞对癌细胞有直接杀伤作用，还对侵犯血管而造成转移的肿瘤细胞产生强大的杀伤作用，从而阻止肿瘤的扩散[3]。在本次实验中观察到外放组、热疗组肝肺转移均较对照组/激光组轻，与文献报道的相同[3]。外照射采用6MV-X射线，直接损伤细胞的DNA链，同时也通过间接作用对肿瘤产生杀伤作用。常规分割符合放射生物学“4R”原理，使肿瘤得到很好的控制，实验中外放组肿瘤DT2000cGy/10F/20d直径明显小于其它三组，可见VX2瘤对放射治疗高度敏感。IGF是肿瘤自分泌的一种细胞因子，促进肿瘤细胞的分裂、增殖，与肿瘤的转移、侵袭有关