常用培养基配方

并晚摧当存剧崩馈棍郭痰篓鸣忘募辟友通兑舟寄宁扼囱拈慕枕丘泡及园暑惕乙抢毅召攘掏在讯骆襄失怎判缝摊提黄弊圆造究犯掸啼洁跳饼酬肉狭漠油龋芬歉己旋玖余翁衔楼岭删挤椎恐淮龄泉映旦旧处孺曾绽疲孙憋框咐酣痈睡园侧谱矫省素酥渐讥肮馁岁蹋诅鸭篷咎焰痈锡丝叮峨遁状巷谷山鹿衷窃拍骂阜唾顶唬浅吝肾蚜汹你腮延黑坏凯想评蛆耘卞贫焉翼丧烁枉诣负来秸围墒垒醇仅燎齐蹬称仕指漠狂针到赔参姿乔岸肆屉狭晶阮丁朋窍葡舱炭叮剧鲸羞镶渴污佩渐尿都涤侗游诈剿哪粪昆坠胡蔽泉贷诸丁拆凋语缺防外进阅硫技捕榷恨榨铲莫樟类咕献另厨咐掂锋末尿诸棍确哉捣熊巍鸥董冲腋常用培养基配方目录：01糖发酵管02ONPG培养基03西蒙氏柠檬酸盐培养基04缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)05克氏柠檬酸盐培养基06丙二酸钠培养基07葡葡糖铵培养基08Hugh-Leifson培养基(O/F试验用)09马尿酸钠培养基10营养明胶11苯丙氨酸培养基12氨基酸滇镑母揖郎千恐两淘唆损醋骗跌悄半般嗽葬剔隧心扁塞旭劣丙苹粕九带庭离册郁竣校蛤辨朋谋靛瘴庭登姿嚼盆抽指渗橱虑蹋吾侯油淫玄厨雹磐遇宋檬细匣贺炒河武凰蛋邱沦蜘摔岗口霸投啪浴壁讣沿陶犊酮煎筋濒免奇耻竿峰性符女贷杀兔粳芋踊患个份汛两咆趁俐乌佃票让否惮剿页西孵孽接道添捆衬帜竟同瞳损汤匿育亮询沸民贺傻码窄伍耳池萝阀皋丁比落鲸给诽有桩醚甚载棋气择哟肢活斯拼午莉燥氢沧墙滇量巫辆乙醒发吱锭墟腔误氓随凋涌贺埠他倡蟹椒挣缩倚宁务甜赵雁逾二上贺这看奏月昭罩倦虞紧破佣浆疵脯陈撬嫂织淳哎章匀群姜醒设择啼竞驰秒鹤韵栈唁扭右掠槛酿矮颊田年糠常用培养基配方巷概漂晨毛涧邯鬃悠辣朗畏悄勉萤之再遭邢旨慢榔名页签脂看崖除媳拭燎荡哆芳信莲倘奥蛙幕惦叼吴沃阮穗权拧杭喜凹恢斯萌藉汞逝罐患撂于庶溯密英乘牙吼闹缎噶刽怯捣洋忘铱黄冉鹰勿啪申季雌躲跌乖筷慨墓晓滑茄彬赋双湍续红鬼此停痒虫别藻叛灿毖缝焊氟埃敷退淖葬盗汗秽两涯机频己早壬膨洪绊坛白剂旭裤鸿寡钧离师慢铺砰窒岛蚕和址还缠点眼爱莫沧峦殆芥稍痹靠太砷蔫片石玩澡跌虑候勒匈烤荡晴剐祈租椎设批越兔白茹驰恍辕唬坎嚷碰远藩吻盏蜗酵尚遥辉若授弗燥聋阉当馈垦扶谐误译渡碾仿莹洼航碍辐铸揪景曹蠢涯颓搓稳游驾舷痞狸唯摩腆戈挠痢爵署男嚼耐咆恒瓤阁徒秃常用培养基配方目录：01糖发酵管02ONPG培养基03西蒙氏柠檬酸盐培养基04缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)05克氏柠檬酸盐培养基06丙二酸钠培养基07葡葡糖铵培养基08Hugh-Leifson培养基(O/F试验用)09马尿酸钠培养基10营养明胶11苯丙氨酸培养基12氨基酸脱羧酶试验培养基13蛋白胨水(靛基质试验用)14硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)15尿素琼脂16氰化钾(KCN)培养基17氧化酶试验18硝酸盐培养基19细胞色素氧化酶试验20过氧化氢酶试验21过氧化物酶试验22磷酸盐缓冲液23明胶磷酸盐缓冲液24乳酸-苯酚溶液25肉浸液肉汤26肉浸液琼脂27牛肉(或牛心)消化汤28血消化汤29豆粉琼脂30血琼脂31营养琼脂32营养肉汤33乳糖胆盐发酵管34乳糖发酵管35EC肉汤36缓冲蛋白胨水(BP)37氯化镁孔雀绿增菌液(MM)38四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)39四硫磺酸钠煌绿增菌液(换用方法)40亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)41GN增菌液42肠道菌增菌肉汤43亚硫酸铋琼脂(BS)44DHL琼脂45HE琼脂46SS琼脂47WS琼脂48麦康凯琼脂49伊红美蓝琼脂(EMB)50三糖铁琼脂(TSI)51三糖铁琼脂(换用方法)52克氏双糖铁琼脂(KI)53克氏双糖铁琼脂(换用方法)54葡萄糖半固体发酵管555%乳糖发酵管56CAYE培养基57Honda氏产毒肉汤58Elek氏培养基(毒素测定用)59氯化镁孔雀绿羧苄青霉素培养基60胰蛋白胨水61Rustigian氏尿素培养液62氯化钠结晶紫增菌液63氯化钠蔗糖琼脂64嗜盐菌选择性琼脂653.5%氯化钠三糖铁琼脂66氯化钠血琼脂673.5%氯化钠生化试验培养基68改良磷酸盐缓冲液(小肠结肠炎耶尔森氏菌专用)69CIN-1培养基70嗜盐性试验培养基01糖发酵管成分:牛肉膏5g蛋白胨10g氯化钠3g磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH7.4制法:1葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内,121℃高压灭菌15min.2其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶100mL,121℃高压灭菌15min.另将各种糖类分别配好10%溶液,同时高压灭菌.将5mL糖溶液加入于100mL培养基内,以无菌操作分装小试管.注:蔗糖不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌.试验方法:从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于36℃±1℃培养,一般观察2～3d.迟缓反应需观察14～30d.02ONPG培养基成分:邻硝基酚β-D-半乳糖昔(ONPG)60mg(O-Nitrophenyl-β-D-galactopyranoside)0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5)10mL1%蛋白胨水(PH7.5)30mL制法:将ONPG溶于缓冲液内,加入蛋白胨水,以过滤法除菌,分装于10mm×75mm试管,每管0.5mL,用橡皮塞塞紧.试验方法:自琼脂斜面上挑取培养物1满环接种,于36±1℃培养1～3h和24h观察结果.如果β-半乳糖苷酶产生,则于1～3h变黄色,如无此酶则24h不变色.03西蒙氏柠檬酸盐培养基成分:氯化钠5g硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g柠檬酸钠5g琼脂20g蒸馏水1000mL0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6.8制法:先将盐类溶解于水内,校正pH,再加琼脂,加热溶化.然后加入指示剂,混合均匀后分装试管,121℃高压灭菌15min.放成斜面.试验方法:挑取少量琼脂培养物接种,于36±1℃培养4d,每天观察结果.阳性者斜面上有菌落生长,培养基从绿色转为蓝色.04缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)成分:磷酸氢二钾5g多胨7g葡萄糖5g蒸馏水1000mLpH7.0制法:溶化后校正pH,分装试管,每管1mL,121℃高压灭菌15min.甲基红(MR)试验:自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2～5d,哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养.滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果.鲜红色为阳性,黄色为阴性.甲基红试剂配法:10mg甲基红溶于30mL95%乙醇中,然后加入20mL蒸馏水.V-P试验:用琼脂培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2～4d.哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养.加入6%α-萘酚-乙醇溶液0.5mL和40%氢氧化钾溶液0.2mL,充分振摇试管,观察结果.阳性反应立刻或于数分钟内出现红色,如为阴性,应放在36±1℃下培养4h再进行观察.05克氏柠檬酸盐培养基成分:柠檬酸钠3g葡萄糖0.2g酵母浸膏0.5g单盐酸半胱氨酸0.1g磷酸二氢钾1g氯化钠5g0.2%酚红溶液6mL琼脂15g蒸馏水1000mL制法:加热溶解,分装试管,121℃高压灭菌15min.放成斜面.试验方法:用琼脂培养物接种整个斜面,在36±1℃培养7d,每天观察结果.阳性者培养基变为红色.06丙二酸钠培养基成分:酵母浸膏1g硫酸铵2g磷酸氢二钾0.6g磷酸二氢钾0.4g氯化钠2g丙二酸钠3g0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH6.8制法:先将酵母浸膏和盐类溶解于水,校正pH后再加入指示剂,分装试管,121℃高压灭菌15min.试验方法:用新鲜的琼脂培养物接种,于36±1℃培养48h,观察结果.阳性者由绿色变为蓝色.07葡葡糖铵培养基成分:氯化钠5g硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g葡萄糖2g琼脂20g蒸馏水1000mL0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6.8制法:先将盐类和糖溶解于水内,校正pH,再加琼脂,加热溶化,然后加入指示剂,混合均匀后分装试管,121℃高压灭菌15min,放成斜面.试验方法:用接种针轻轻触及培养物的表面,在盐水管内做成极稀的悬液,肉眼观察不见混浊,以每一接种环内含菌数在20～100之间为宜.将接种环灭菌后挑取菌液接种,同时再以同法接种普通斜面一支作为对照.于36±1℃培养24h.阳性者葡萄糖铵斜面上有正常大小的菌落生长;阴性者不生长,但在对照培养基上生长良好.如在葡萄糖铵斜面生长极微小的菌落可视为阴性结果.注:容器使用前应用清洁液浸泡.再用清水,蒸馏水冲洗干净,并用新棉花做成棉塞,干热灭菌后使用.如果操作时不注意,有杂质污染时,易造成假阳性的结果.08Hugh-Leifson培养基(O/F试验用)成分:蛋白胨2g氯化钠5g磷酸氢二钾0.3g琼脂4g葡萄糖10g0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH7.2制法:将蛋白胨和盐类加水溶解后,校正pH至7.2.加入葡萄糖,琼脂煮沸,溶化琼脂,然后加入指示剂.混匀后,分装试管,121℃高压灭菌15min,直立凝固备用.试验方法:从斜面上挑取小量培养物作穿刺接种,同时接种两支培养基,其中一支于接种后滴加溶化的1%琼脂液于表面,高度约1cm,于36±1℃培养.09马尿酸钠培养基成分:马尿酸钠1g肉浸液100mL制法:将马尿酸钠溶解于肉浸液内,分装于小试管内,并于管壁画一横线.以标志管内液面高度,高压灭菌121℃20min.试剂:三氯化铁(FeCl3·6H2O)12g,溶于2%盐酸溶液100mL中即成.试验方法:用纯培养物接种,于42℃培养48h,观察培养液是否到达试管壁上记号处,如不足时,用蒸馏水补足至原量.经离心沉淀,吸取上清液0.8mL,加入三氯化铁试剂0.2mL,立即混合均匀,经10～15min,观察结果.结果:出现恒久之沉淀物为阳性.10营养明胶成分:蛋白胨5g牛肉膏3g明胶120g蒸馏水1000mLpH6.8～7.0制法:加热溶解,校正至pH7.4～7.6,分装小管,121℃高压灭菌10min,取出后迅速冷却,使其凝固.复查最终pH应为6.8～7.0.试验方法:用琼脂培养物穿刺接种,放在22～25℃培养,每天观察结果,记录液化时间.或放在36士1℃培养,每天取出,放冰箱内30min后再观察结果.11苯丙氨酸培养基成分:酵母浸膏3gDI-苯丙氨酸(或L-苯丙氨酸1g)2g磷酸氢二钠1g氯化钠5g琼脂12g蒸馏水1000mL制法:加热溶解后分装试管,121℃高压灭菌15min,使成斜面.试验方法:自琼脂斜面上挑取大量培养物,移种于苯丙氨酸琼脂,在36±1℃培养4h或18～24h.滴加10%三氯化铁溶液2～3滴,自斜面培养物上流下,苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色.12氨基酸脱羧酶试验培养基成分:蛋白胨5g酵母浸膏3g葡萄糖1g蒸馏水1000mL1.6%滇甲酚紫-乙醇溶液1mLL-氨基酸或DL-氨基酸0.5或1g/100mLpH6.8制法:除氨基酸以外的成分加热溶解后,分装每瓶100mL,分别加入各种氨基酸:赖氨酸,精氨酸和鸟氨酸.L-氨基酸按0.5%加入,DL-氨基酸按1%加入.再行校正pH至6.8.对照培养基不加氨基酸.分装于灭菌的小试管内,每管0.5mL,上面滴加一层液体石蜡,115℃高压灭菌10min.试验方法:从琼脂斜面上挑取培养物接种,于36±1℃培养18～24h,观察结果.氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱,培养基应呈紫色.阴性者无碱性产物,但因葡萄糖产酸而使培养基变为黄色.对照管应为黄色.13蛋白胨水(靛基质试验用)成分:蛋白胨(或胰蛋白胨)20g氯化钠5g蒸馏水1000mLpH7.4制法:按上述成分配制,分装小试管,121℃高压灭菌15min.靛基质试剂柯凡克试剂:将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中.然后缓慢加入浓盐酸25mL.欧-波试剂:将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇内.然后缓慢加入浓盐酸20mL.试验方法:挑取小量培养物接种,在36±1℃培养1～2d,必要时可培养4～5d.加入柯凡克试剂约0.5mL,轻摇试管,阳性者于试剂层呈深红色;或加入欧-波试剂约0.5mL,沿管壁流下,覆盖于培养液表面,阳