第七章 植物快速繁殖和脱毒

第七章植物快速繁殖和脱毒植物快速繁殖就是应用组织培养技术，快速繁殖名优特新品种，使其在较短的时间内繁衍较多的植株；快速繁衍珍稀濒危植物，使物种得以保存。植物病毒是通过无性繁殖传递的，病毒在母体内逐代积累，危害越来越严重。目前在生产上尚无特效药物可彻底除去病毒，而快繁则可以达到脱毒的目的。第一节植物快速繁殖的途径和方法人们可根据不同植物，采用不同类型和方式进行快速繁殖。各种器官的分化途径受下列因素影响：1）培养材料的种类、外植体的部位和生理状态；2）培养基的种类和植物激素的配比和浓度；3）培养环境，如温度、湿度、光照时间和强度、通气状况等。植物快速繁殖的类型和事例器官型器官发生型胚状体发生型原球茎型球茎芽型块茎型鳞茎型孢子型根茎型微枝扦插型甘蔗、香蕉、香石竹烟草、油菜甘蓝、胡萝卜兰花观叶海棠花叶芋百合、郁金香、贝母地钱、狼尾蕨肾蕨、裂叶蕨葡萄、杨树第二节继代培养当初代培养的试管苗在瓶内长满到瓶塞，或培养基养分利用完时就要转瓶，进行继代培养，以便迅速获得试管苗。在试管苗继代培养过程中，产生两种现象，即驯化现象和衰退现象。文心兰试管苗继代增殖一．驯化现象植物组织经过长期继代培养，发生一些变化。开始继代培养要加入生长调节物质，其后加入少量或不加入生长调节物质就可以生长，这种现象称为“驯化”（acclimation）。二．衰退现象除了驯化以外，长期继代培养得材料也会逐渐衰退（recession），丧失形态发生能力，具体表现生长不良，再生能力下降等。主要与下列因素有关：1）植物材料；2）培养基和培养条件；3）继代培养次数；4）季节。第三节快速繁殖中茎尖培养脱毒一．植物病毒在植物体内的分布病毒侵染植株的叶片后，经过一段时间，即向附近的细胞增殖转移。转移速度很慢，每小时只有几微米。当叶片内病毒浓度增大到一定量时，就转移到韧皮部，随后通过维管束转移到其它部分。由于病毒转移速度慢，加上茎尖分生组织无维管束，病毒只能通过胞间连丝传递，赶不上细胞分裂和生长的速度，所以生长点的病毒数量极少，几乎检测不出。茎尖培养时，切取的茎尖越小，带病毒的可能性就越小。——茎尖脱毒的基本原理必须指出的是，所谓无病毒，只是相对的，不是绝对的。二．无病毒苗的获得材料的培养和灭菌茎尖剥离（详见实验）茎尖培养三.提高脱毒效果高温处理又称温热疗法低温处理化学处理（一）高温处理又称温热疗法,某些病毒受热以后不稳定，失去活性。根据这个原理，把植物放在高于正常温度的环境下，组织内部的病毒受热后部分或全部钝化，但寄主植物的组织很少或不会受到伤害。具体方法有：第一，温汤浸渍处理，适用于切下的材料，在50度左右的温水中浸渍数分钟至数小时，方法简便易行但材料易受伤。第二，热风处理，将生长的盆栽植物移入室内或生长箱内，处理温度因植物种类、生理状况而异。一般为35~40度，短则几十分钟，长达数月。（二）低温处理亦称冷疗法。例如菊花在摄氏5度条件下分别处理4个月或7.5个月，无菊花矮化病毒苗分别是67%和73%。无菊花褪绿斑驳病毒苗占22%和49%，未经处理的茎尖则无脱毒效果。（三）化学处理又称化学疗法。一些化学药品如嘌呤和嘧啶类似物、氨基酸、抗生素处理，可在某种程度上抑制植物体内或离体叶片内病毒的合成，但仍不能使病毒失活。第四节其它途径脱毒一．愈伤组织脱毒二．珠心胚培养脱毒三．茎尖微体嫁接技术四．培育抗病毒栽培种第五节脱毒苗的鉴定一．直接测定法：直接观察植株茎叶有无某种病毒引起的可见症状。二．指示植物法：利用病毒在其它植物上出现症状特征作为鉴别种类的标准。三．酶联免疫吸附法四．电子显微镜检查法五．免疫吸附电镜法六.抗血清鉴定法：植物病毒是由核酸和蛋白质组成的核蛋白复合体，因而也是一种抗原，注射到动物体内即产生抗体，抗体存在于血清之中，称为抗血清。由于不同病毒产生的抗血清都有特异性，用特定病毒的抗血清来鉴定该种病毒，具有高度的专一性和特异性，几分钟至几小时即可完成，方便简易，为常用方法之一。