食品中亚硝酸盐的测定1

食品中亚硝酸盐的测定（盐酸萘乙二胺分光光度法）实验目的1.明确亚硝酸盐在食品中的作用以及限量标准。2.掌握盐酸萘乙二胺法测定食品中亚硝酸盐的原理、操作步骤、注意事项。实验原理样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色的染料，产生的颜色深浅与亚硝酸根含量成正比，可以比色测定。与标准系列比较定量。722分光光度计组织绞碎机分析天平500mL容量瓶恒温水浴锅50mL具塞比色管实验步骤1.样品的处理2.标准曲线的绘制3.试样的侧定样品的处理（1）取样：取适量的火腿肠，放入搅碎机内搅碎。准确称取5.0克经绞碎、混匀的样品，置于50毫升烧杯中。（2）沉淀蛋白质：①加12.5mL硼砂饱和溶液，搅拌均匀，以70℃左右的水约300mL将样品洗入500mL容量瓶中，置沸水浴中加热15min，取出后冷却至室温。②一面转动一面加入5毫升亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质，（3）过滤：加水定容，放置0.5h，除去上层脂肪，清液用滤纸过滤，弃去初滤液30mL，滤液备用。标准曲线的绘制精密吸取0.00,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00,1.50,2.00,2.50mL亚硝酸钠标准使用液(相当于0、1、2、3、4、5、7.5、10、12.5µg亚硝酸钠)，分别置于50mL比色管中。各加2ml对氨基苯磺酸溶液(4g/l)，混匀，静置3-5min后各加入1ml0.2％盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15min，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度A，绘制标准曲线。试样的测定精密吸取40.0ml样液于50ml比色管中。以下按标准曲线测定方法依次加入其它试剂。加水稀释至刻度，混匀，静置15min，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度A。同时做试剂空白。数据处理X—试样中亚硝酸盐的含量，mg/kg；V1—测定时所取溶液体积，mL；V2—试样处理液总体积，mLm—试样质量，g；A—试样测定液中亚硝酸盐的质量，µg；AX=———————×1000v1m×——×1000V2评价品名限量标准mg/kg食盐（精盐）、牛乳粉≤2香肠（腊肠）香肚、酱腌菜、广式腊肉≤20鲜肉类、鲜鱼类、粮食≤3肉制品、火腿肠、灌肠类≤30蔬菜≤4其他肉类罐头、其他腌制罐头≤50婴儿配方乳粉、鲜蛋类≤5西式蒸煮、烟熏火腿及罐头、西式火腿罐头≤70722分光光度计的使用方法722分光光度计的使用方法1、预热为使仪器内部达到热平衡，开机后预热时间不小于30分钟（波长调至538nm处）。注意：由于仪器检测器（光电管）有一定的使用寿命，应当尽量减少对光电管的光照，所以在预热的过程中应打开样品室盖，切断光路。722分光光度计的使用方法2、改变波长通过旋转波长调节手轮可以改变仪器的波长显示值(顺时针方向旋转波长调节手轮波长显示值增大，逆时针方向旋转则显示值减少)。调节波长时，视线一定要与视窗垂直。722分光光度计的使用方法3、置0%(T)打开样品室盖，切断光路（或将黑体置入四槽位样品架中，用样品架拉杆来改变四槽位样品架的位置，使黑体遮断光路）后，按“0%ADJ”键即能自动置0%(T)，一次未到位可加按一次)。722分光光度计的使用方法4、置100%(T)将用作参比的样品置入样品室光路中，关闭掀盖后按“100%ADJ”键即能自动置100%(T)，一次未到位可加按一次。注意：置100%(T)时，仪器的自动增益系统调节可能会影响0%(T)，调整后请检查0%(T)，若有变化请重复调整0%(T)。722分光光度计的使用方法5、样品测定将待测溶液置于光路中，盖上箱盖，由此由显示屏读得待测溶液的A值。注意：用蒸馏水冲洗比色皿（用拇指和食指捏取毛面），并用待测溶液润洗，将待测溶液移入比色皿使液面至比色皿容积的2/3处，用滤纸吸去比色皿外壁残液，用镜头纸将比色皿擦拭干净，轻轻置于样品室中，关闭样品室盖，读数。722分光光度计的使用方法6、测量完毕关闭开关取下电源插头，取出比色皿洗净擦干，放置安全处。盖好比色皿暗箱，盖好仪器。