红外分光光度计

紫外分光光度计的使用原理和方法紫外-可见吸收光谱朗伯-比耳定律紫外-可见分光光度计分析条件的选择测定方法在医学检验中的应用紫外-可见分光光度法(ultraviolet-visiblespectrophotometry,UV-VIS)按所吸收光的波长区域不同，分为紫外分光光度法和可见分光光度法，合称为紫外-可见分光光度法。它是利用物质的分子或离子对某一波长范围的光的吸收作用，对物质进行定性分析、定量分析及结构分析,所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。紫外-可见分光光度法的特点：1与其它光谱分析方法相比，其仪器设备和操作都比较简单，费用少，分析速度快;2灵敏度高;3选择性好;4精密度和准确度较高;5用途广泛。§1.紫外-可见吸收光谱1.物质对光的选择性吸收物质对光的吸收是选择性的，利用被测物质对某波长的光的吸收来了解物质的特性，这就是光谱法的基础。通过测定被测物质对不同波长的光的吸收强度（吸光度），以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得出该物质在测定波长范围的吸收曲线。如图3-1；在吸收曲线中，通常选用最大吸收波长λmax进行物质含量的测定。红移和紫移在有机化合物中，常常因取代基的变更或溶剂的改变，使其吸收带的最大吸收波长λmax发生移动。向长波方向移动称为红移(表3-3)，向短波方向移动称为紫移。红外分光光度计一、红外光谱的作用1．可以确定化合物的类别（芳香类）2．确定官能团：例：—CO—，—C＝C—，—C≡C—3．推测分子结构（简单化合物）4．定量分析二、基本原理1、FT-IR光谱仪的组成2、干涉仪3、红外光谱仪采集背景和样品的步骤1、FT-IR光谱仪的组成光源、干涉仪、样品室、检测器、计算机2、干涉仪动镜定镜光源分束器相长相消3、红外光谱仪采集背景和样品的步骤红外光谱仪采集背景和样品的步骤1、液体样品的制备液体样品可用液体池来测试。液体池分为：固定池、可卸池两种。另外，液体样品也可用液膜法来测试，即将待测样品直接滴加在一张压制好的KBr薄片上，然后进行测试。2、气体样品的制备气体样品用气体池来测试四、红外谱图四、红外谱图四、红外谱图有机物谱图无机物谱图五、NicoletNexus470FT-IR操作流程1、打开电源开关和电脑，输入用户名和密码。开启仪器的电源进行预热。2、打开OMNIC→→→自检→→→OK，打勾通过。五、NicoletNexus470FT-IR操作流程3、实验参数设置:打开collect→→→实验参数。3.1NO.ofscans→→→32，最多64。3.2Resolution分辨率→→→4个波数,稍差一点可选择8个波数。3.3纵坐标Finalformat→→→习惯选择Transmittance,非Absorbance。3.4BackgroundHandingcollect→→→习惯选择64(背景扫描次数≥NO.ofscans,以提高信噪比)五、NicoletNexus470FT-IR操作流程3.5调用图谱Exit→→→options→→→putopenedspectruminnewwindow处在打勾位置。3.6view→→→小数点位数，Numberofdecimalplaces→→→0，一般整数。3.7print→→→spectra，linethickness→→→23.8collect→→→collecttoanewwindow每次放在新新窗口。3.9Process→→→Samplinginformation→→→companyname→→→spectrumtitle，一般不打勾3.10collectbackground→→→Enter→→→打勾CollectStatueKBr五、NicoletNexus470FT-IR操作流程4、制备样品5、测试本底：单击Collect菜单选择collectbackground6、测试样品：单击Collect菜单选择collectsample五、NicoletNexus470FT-IR操作流程7、图谱处理7.1基线校正:单击Absorb→→→AutomaticBaselineCollect→→→清除未校正好的图谱→→→Transmittance7.2光谱标峰:单击Analyze菜单选择findpeaks命令可获得光谱标峰。五、NicoletNexus470FT-IR操作流程8、文件保存：原谱用SPA保存；再存另一个CSV保存（数据格式）。9、打印光谱：单击print菜单选择print对话框打印所得光谱。10、光谱检索：单击Analyze菜单选择librarysetup命令打开对话框，选择谱库检索。11、结束操作：先退出操作系统，双击屏幕快捷菜单Stop。六、仪器的保养⑴要保持仪器室的相对湿度70%⑵仪器室温度18——25℃⑶样品仓内要放干燥剂，并定期更换⑷实验结束时，要将压片模具清洗干净，清洗方法为：热水浸泡→冷水清洗→无水乙醇浸泡→红外灯下干燥谢谢！