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食品安全快速检测技术初级农产品(果蔬)农残检测控制点关键技术灵敏(sensitive)简洁(simple)安全(safe)福州佳宸生物科技有限公司地址:福州市中山路23号电话:0591-88503867传真:0591-88503857手机:13806016385E-mail:zh.yunzh@163.com试剂管理关键点要求错误操作错误操作的影响1:试剂未配制成液体前保质期为1年,配制后酶的保质期为4周;使用超出保质期的试剂;•空白对照失败,检测结果无意义;2:试剂配制前可保存在冷冻或冷藏(4-8℃)的冰箱里,试剂配制后只能保存在冷藏的冰箱中,缓冲液则应放在常温环境中;•试剂放在常温环境中•当天检测后未及时冷藏•配制后放在冷冻环境中;•保质期缩短试剂管理关键点要求错误操作错误操作的影响3:按说明书配制方法使用纯净水配制所有试剂;酶试剂按需配制,底物和显色剂一次性配制,酶在使用前配制1小瓶,配置30分钟后使用;•使用非纯净水配制试剂,或加入纯净水的量未按要求进行;•一次把所有试剂盒内的酶全配成液体•配制后马上使用•试剂变质或保质期缩短;•保质其变短•空白对照失败,检测结果无意义4:检测前从冷藏冰箱中取出,升温至检测要求的温度再使用;•从冷藏环境取出后立即使用;•空白对照失败,检测结果无意义;试剂管理关键点要求错误操作错误操作的影响5:保存时应拧紧试剂瓶盖•试剂瓶盖未拧紧,被环境污染•保质期缩短;样品处理关键点要求错误操作错误操作的影响1:取样应为正常部位腐烂变质、破损;(抑制率)偏高2:样品头中尾分布均匀;只取叶、茎或根;(抑制率)偏高或偏低3:将样品剪成1cm见方大小将样品剪得太碎;(抑制率)偏高4:去除样品有色汁液;有色汁液进入浸泡溶液;(抑制率)偏高;样品处理关键点要求错误操作错误操作的影响5:阳性结果应复检,含植物次生物质的样品出现阳性时还应采用整株浸提法或表面测定法确认;检测结果为阳性时不复检;抑制率出现假阳性(偏高)6:称取2克破碎后的样品;重量偏差超过±0.1克;抑制率偏高或偏低;7:使用缓冲液10ml浸泡样品;使用非缓冲液浸泡样品;抑制率偏高或偏低;8:浸泡时间为10分钟(±1分钟),超过规定间时应将浸泡液倒出备检;浸泡时间短于(长于)要求的时间;抑制率出现偏低(偏高)样品检测关键点要求错误操作错误操作的影响1:反应液:应按依顺序加入2.5ml缓冲液(空白)或2.5ml样品浸泡液,再加入100ul酶和100ul显色剂,摇匀后在35±2℃的环境中预反应10分钟;•加入的液体体积不对或漏加某一种试剂•加完试剂后末摇匀•末在规定范围温度内反应•预反应时间过短或过长空白对照失败,检测结果无意义;2:开机预热,并按规定设置反应时间;•开机时通道中有物体•设置的反应时间过短•设置的反应时间过长•空白对照失败;•空白对照失几•偏低样品检测关键点要求错误操作错误操作的影响3:预反应后加入底物100ul,摇匀并立即倒入比色皿中,马上放入仪器内启动检测;•加入的液体体积不对或漏加某一个样品管或空白管;•加完试剂后末摇匀•加试剂并摇匀时间过长同时末及时放入仪器通道•空白液末放入1号孔内•空白对照失败或样品检测为阳性;•抑制率偏高或偏低•抑制率偏高•抑制率环境控制关键点要求错误操作错误操作的影响1:冰箱内不要放杂物;污染试剂空白对照失败或样品检测为阳性;2:环境中不要喷洒杀虫药水;污染试剂空白对照失败或样品检测为阳性;3:不宜使用新家具;污染试剂空白对照失败或样品检测为阳性;工具管理关键点要求错误操作错误操作的影响1:工具及时清洁使用不洁工具;空白对照失败或样品检测为阳性。2:试剂不能由工具返回试剂瓶中;•吸出不用的试剂返回试剂瓶中•试剂瓶内反复吸放空白对照失败或样品检测为阳性。3:处理空白和样品的吸头或容器应分开;试剂或反应液发生交叉污染;空白对照失败或样品检测为阳性。4:工具使用完后应妥善保存;与反应液或试剂接触的工具暴露在空气中,被污染。空白对照失败或样品检测为阳性。故障分析-----空白对照失败分析及排除方法显色时间为3分钟时,吸光度△A值小于0.3时,则空白对照失败,检测结果无意义,请按以下顺序分析和排除故障:仪器检查1:检查仪器通道内有无比色皿或其它物体,取出后重新启动仪器;2:待仪器自检完成后,按B键启动空白测试,再将一个空比色皿的毛面朝左右两侧,依次放入每个通道,观察放入比色皿通道的吸光度值是否变化,如变化则仪器正常,如无变化则为仪器故障,请联系厂家;故障分析-----空白对照失败分析及排除方法试剂与环境1:观察检测结束时比色皿中空白反应液的颜色,如无色或黄色非常浅,则表明反应液中试剂变质、工具被污染或环境异常;2:如重新配制酶试剂反应3分钟后为黄色,则之前那瓶酶已经被污染变质,更换酶试剂即可,在之后的三天内注意观察空白液的颜色,如有规律性变浅的情况,有可能为环境污染;如新配制酶试剂仍为无色或浅黄色,请重新配制缓冲液后,再用新配的缓冲液配制酶试剂,再按第4)步骤操作一遍,如结果仍为无色或浅黄色,则整套酶试剂已经失效,请更换检测试剂;故障分析-----空白对照失败分析及排除方法3:工具或环境受污染时需对工具和环境进行彻底清洁。工具受污染时往往试剂配制出来已经是受污染,空白液为无色或黄色较正常偏浅,环境污染时则常常在刚配制好酶液的时候能够进行空白测试,但在短时间(如10-30分钟)内酶试剂的活性快速下降,即再次做空白液时黄色有明显变浅。常见可能含有植物次生物质的蔬菜:•葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇、蕃茄汁液。说明:1)有明显特异性气味;2)破碎后汁液粘性较大谢谢观看
本文标题:农药残留检测技术问题
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