临床检验项目准入与新技术新项目申报概要

临床检验项目准入与新技术、新项目申报安徽医科大学第一附属医院检验科徐元宏一、临床检验项目（一）临床检验项目1、基本要求（1）国家质量目标（2）单位质量目标2、性能评价（1）定量项目（2）定性项目（二）临床检验项目准入临床检验项目有是符合无有通过医院临床检验质量管理委员会准入不符合否无国家目录三证齐全性能评价安徽收费二、临床检验新技术、新项目（一）新技术新项目分类：重大新技术新项目：是指代表本学科近年和未来十年发展方向的技术、方法，该技术的开展能够大力促进和带动学科发展；国内先进性新技术新项目：是指本学科近年来发展成熟的、在国内少数先进医院开展而本单位尚未开展的技术项目；省内先进性新技术新项目：是指本学科成熟的、在国内多数先进医院开展、省内尚未开展的技术项目；一般先进性新技术新项目：是指本学科成熟的、在省内多数先进医院开展、本单位尚未开展的技术项目；鼓励性新技术新项目：是指本学科成熟的、在省内外多数医院开展的技术项目，或为政策性鼓励开展新技术新项目。(二)新技术新项目基本要素：试剂有无注册证？本省有无收费价格？该检验项目对临床诊断及治疗决策能起到什么样的作用？该检验项目与其他项目相比，其优势表现在哪里（如方法学比较）？实验室有无条件开展该项试验？检测质量能否保证？患者能否接受（如经济承受力）？(三)新技术新项目评价指标：1、定量项目的评价指标方法的精密度线性分析范围与参考方法的比较结果的不确定度检出限抗干扰能力等，以满足预定用途或应用领域的需要。（1）精密度通常用不精密度表示。精密度评价的目的是评价检测设备的总不精密度，是设备在一定时间内的变异性。许多变异源可在不同程度上影响设备的精密度，通常在进行精密度评价时要充分考虑所有影响总不精密度的来源，但不必去评价每个来源的相对大小。用于描述与时间相关的不精密度的内容包括：批内、批间、日内和日间不精密度。其中，批内不精密度和总不精密度的内容最为重要。①一般实验要求为减少对结果的影响因素，全部实验过程中应使用同一批号的试剂和校准物。实验标本可采用稳定的、以蛋白质为基质、可模拟临床标本特性的产品。必要时，可采用稳定的混合冷冻血清。选择标本浓度时应考虑医学决定水平，推荐使用二个或二个以上浓度的标本。②实验程序精密度评价实验应在操作者完全熟悉实验过程和评价方案以后（通常需要5d时间）进行。每天分2批测定标本，各批实验至少间隔2h。每批测定2个浓度标本，每个标本重复测定2次。按表记录实验结果。表方法精密度实验数据汇总表天数j=1批(上午)j=2批(下午)XiXij1Xij2Xi1Xij1-Xij2（Xij1-Xij2)2Xij1Xij2Xi2Xij1-Xij2（Xij1-Xij2）213.03.23.10.20.043.13.33.20.20.043.1523……1920合计0.80.8批内不精密度计算I=总实验天数(一般为20天)J=每天测定的批次(一般为2批)Xij1=第i天j批实验第一次结果Xij2=第i天j批实验第二次(重复)结果③结果计算方差计算：日间方差批间方差A值计算I=实验天数(通常为20天)Xi1=第i天第一批实验结果的平均值(通常重复2次)Xi2第i天第二批实验结果的平均值(通常重复2次)B值的计算I=实验天数Xi=第i天全部实验结果的平均值X=所有结果的平均值日间方差批间方差总不精密度(2)测定线性范围的评价线性是分析方法的一个特征，不同于准确度和精密度。线性范围（linearrange）是指系统最终的输出值（浓度或活性）与被分析物的浓度或活性成比例的范围。线性范围的测量既测定浓度曲线接近直线的程度，它反映整个系统的输出特性。线性检测系统反应，包括校准、线性化技术、系数和仪器反应。①一般要求执行分析过程的试验人员必须掌握仪器操作和维护程序、标本准备方法和校准。对较简单的设备需要5d或更少的时间，对较复杂的多通道设备需要5d或更长的时间。在完成仪器熟悉过程后开始实验并收集数据。②实验标本线性实验应使用与病人标本相似的标本或注明标本的基质类型，最少使用4个浓度水平，推荐5个水平。高值标本应高于线性上限30％，低值标本应低于线性低限。线性实验可使用的标本混合病人血清（理想的标本基质）；加入待测物的混合人血清，在没有干扰物存在时不需高纯度的加入品；经过、特殊处理的混合人血清，用于降低分析物浓度，如：透析、热处理、层析；对盐水透析过的混合人血清，在线性实验中使用此类标本可掩盖不同的基质效应；商品质控品或校准品，此类标本由于不是正常的生理形式，可掩盖实际的线性结果；水溶液，一般无基质效应。实际工作中，可准备如下血清：低浓度X1混合血清；高浓度X5混合血清；血清X2：3份“X1”+1份“X5”；血清X3：2份“X1”+2份“X5”；血清X4：1份“X1”+3份“X5”。浓度由低到高顺序：X1,X2,X3,X4,X5配制溶液浓度的计算X为标本浓度，V为标本体积③实验程序全部实验和数据采集应在同一工作日内完成。分析序列应为随机排列。有显著携带污染时，应用空白隔开标本。每个浓度标本重复测定4次纪录测定结果。线性实验记录表标本浓度测定次数X1Y1-1Y1-2Y1-3Y1-4X2Y2-1Y2-2Y2-3Y2-4X3Y3-1Y3-2Y3-3Y3-4X4Y4-1Y4-2Y4-3Y4-4X5Y5-1Y5-2Y5-3Y5-4观察结果有无明显的数据错误，若有明显异常时，应判断是否为离群点。判断离群点的方法对于特定浓度Yi值的离群点进行检测时，需将其4个重复值从大到小排列（Yi-1到Yi-4）。计算级差D=Yi-1－Yi-4。若Yi-1可能是离群点，计算：D1=（Yi-1－Yi-2）/D。若Yi-4可能是离群点，计算：D4=Yi-3－Yi-4）/D。计算结果（D1或D4）如果大于0.765（0.05）或0.889（0.01），则该点判为离群点。全部数据中的离群点如果有2点或以上，则应保留全部数据或重新进行实验。离群点2个或者以内，保留全部数据。离群点2个以上，重新实验。④数据的处理以分析物浓度为X轴，反应值或仪器输出值（均值）为Y轴，绘制X-Y线性图（Y=aX+b）。目测线性和进行统计学分析，判断是否符合要求。线性分析:直线相关回归曲线直线化扩展试验:对于线性结果的分析，应当注意统计学标准和临床可接受限不同；应慎用方法学线性范围从0开始；有临床意义的浓度应在线性评价中，如最低线性浓度、医学决定水平及最高线性浓度。(3)方法学比较实验室中使用的检测方法，随着科学技术的发展不断更新，在引进新方法前或用一种方法替代另一种方法时为保证实验室检测结果的连续性，通常要进行偏差分析，以比较不同的分析方法在测定同一分析项目时结果的差异。①标本要求用于方法学对比实验的标本，应来源于健康人或患者，无明显干扰因素，并应尽量避免使用储存标本。全部标本在医学决定水平范围内均匀分布，标本至少40例。增加标本数可提高可信性。②对比方法可采用厂家要求的实验室常规方法或公认的参考方法。对比方法应具有好的精密度，没有已知的干扰物，与评价方法单位相同，相对国家标准或参考方法的偏差为已知。③实验程序操作者应有足够的时间熟悉仪器操作、保养程序及评价方案。在全部实验过程中，都必须建立适当的质量控制程序。进行方法学对比实验，每天应测定8份标本，每份标本都用评价方法和对比方法进行双份测定，至少连续测定5d，共40份标本。测定时先对标本排序，再按顺序1至8测定第一次，顺序8至1测定第二次，按表收集数据。方法学比较实验记录表标本号评价方法（Y）对比方法（X）|Yi-Xi||Yi1-Xi1||Yi2-Xi2|Yi1Yi2YiDYiXi1Xi2X1DXi1|Yi1-Yi2||Xi1-Xi2|234……3940平均值DYDXE④结果绘图实验结果可绘制6张图，第1张图是XiVsYi的散点图，第2张图是XiVsYij散点图，第3张图是XiVsYi-Xi散点图，第4张图是XiVsYij-Xij散点图,第5张图是（Yi+Xi)/2VsYi-Xi散点图,第6张图是（Yi+Xi)/2VsYij-Xij散点图。判断离群点判断离群点：目测图中有无明显的离群点，如有明显的离群标本值，可对实验数据进行检查，若有差值Yi1-Yi24×DYXi1-Xi24×DXYi-Xi4×E视为离群点。数据的取舍：在全部40个数据中可允许一个（小于全部数据的2.5℅）离群点。若离群点多于一个，则应另增加8个实验数据。⑤线性回归计算线性方程Y=bX+a及相关系数γ。一般情况下，若γ≥0.975或γ2≥0.95，则认为X的取值范围合适，数据满足要求。但γ＜0.975或γ2＜0.95时，就必须增加测定标本数，以扩大数据范围。依据上述线性方程，可计算两种方法间的预期偏差及可信范围。⑥简单处理配对t检验：如果有显著性差异，表明实验方法之一存在问题；散点图：趋势一致，两者差别不明显。相差太远，可以比较优劣。直线相关回归，评判规则同上。配对技术资料的χ2检验：两种检测方法的结果有无相关关系两种检测方法的结果有无显著性差别评价指标的计算敏感度＝a/(a+c)特异度＝d/(b+d)阳性预测值＝a/(a+b)阴性预测值＝d+(b+d)诊断指数＝敏感度＋特异度诊断效率(准确度)＝(a+d)/(a+b+c+d)阳性似然比＝敏感度/(1－特异度)阴性似然比＝(1－敏感度)/特异度如果用百分数表示，可×100%表四格表的排列参考方法阳性阴性合计诊断性阳性真阳性(a)假阳性(b)a+b试验阴性假阴性(c)真阴性(d)c+d合计a+cb+da+b+c+d两种检测方法的结果有无相关关系：计算公式（|ad-bc|-n/2)2×nΧ2=——————————(a+b)(c+d)(a+c)(b+d)n=a+b+c+dΧ23.84,p0.05,存在相关关系。否则，不存在相关关系。两种检测方法的结果有无相关关系计算公式（|b-c|-1)2Χ2=———————b+c分子中的1为连续性校正数，b+c40时可省去。Χ23.84,p0.05,存在显著性差别。否则，不存在显著性差别。应注意的问题:患病率变化时，各指标的稳定性由于敏感度是病例组中的阳性率，而特异度是对照组中的阴性率，它们受患病率的影响不大，由这两个指标计算来的如诊断指数、阳性似然比、阴性似然比等影响也不大，即是稳定或相对稳定的指标。但阳性预测值指的是阳性结果中真阳性的百分比，阴性预测值指的是阴性结果中真阴性的百分比，这两个指标受患病率的影响较大。如某一地区某病的患病率（或就诊率）为10％，某诊断性试验敏感度为90％、特异度为80％，这时阳性预测值及阴性预测值分别为33.3%及98.6%。如扩大检测范围，患病率降为1％，仍使用上述试验，则阳性预测值及阴性预测值则发生了变化分别为4.3%和99.9%。对临床诊断的帮助的“具体性”、“可靠性”一般来说，上述指标都是从总体上对某一试验进行评价的，都是有用的指标。敏感度及特异度是两个基本的评价指标。但每一项试验敏感度及特异度都有一定限度，因此评价一个试验，应将敏感度、特异度综合起来考虑才较全面。诊断指数与诊断效率虽将敏感度、特异度综合在一起考虑了，但是只是将敏感度及特异度通过相加来分析。即只要敏感度特异度之和相等，而不管敏感度、特异度的变化有多大，这两个指标的结果是不变的，如甲、乙两个试验，敏感度分别为95%、80%，特异度分别为80%、95%，诊断指数都为175％，诊断效率为87.5%（疾病组与对照组例数相同时），但很明显这两个试验在临床应用上意义是不相同的。阳性预测值和阴性预测值在患病率固定的情况下，PPV和NPV与敏感度及特异度呈正相关。同时可以提示在阳性结果时真阳性的可能有多大，阴性结果时真阴性的可能有多少，显然对临床诊断的帮助很有意义。但阳性预测值及阴性预测值可由于受患病率的不同、实验设计时病例组和对照组的样本组成不同而发生变化，如病例组样本量大，阳性预测值则高，而对照组样本量大时阳性预测值则低。阴性预测值也有同样变化，所以其应用时必须考虑这一因素。所谓似然比（LR）表达的是患