SBF制备

模拟体液制备一、实验目的制备模拟体液1000ml二、实验原理表1人类血浆与模拟体液中离子浓度离子离子浓度血浆模拟体液Na+142.0142.0K+5.05.0Mg2+1.51.5Ca2+2.52.5Cl-103.0147.8(HCO3)-27.04.2(HPO4)2-1.01.0(SO4)2-0.50.5PH7.2-7.47.4表2OrderReagentAmountContainerPurityFormulaweight1NaCl8.035gWeighingpaper99.558.44302NaHCO30.355gWeighingpaper99.584.00683KCl0.225gWeighingpaper99.574.55154K2HPO4·3H2O0.231gWeighingpaper99.0228.22205MgCl2·6H2O0.311gWeighingpaper98.0203.303461.0M-HCl39mlGraduatedcylinder---7CaCl20.292gWeighingpaper95.0110.98488Na2SO40.072gWeighingpaper99.0142.04289Tris6.118gWeighingpaper99.0121.1356101.0M-HCl0-5mlSyringe--三、仪器与药品1、实验仪器电子称（±0.1mg）、PH计（±0.01）、水浴磁力搅拌器、1l聚乙烯烧杯、称量纸、搅拌棒、1l烧瓶、量筒、注射器2、实验药品离子交换蒸馏水、氯化钠（NaCl）、碳酸氢钠NaHCO3、氯化钾KCl、三水磷酸氢二钾K2HPO4·3H2O、六水氯化镁MgCl2·6H2O、氯化钙CaCl2、硫酸钠Na2SO4、三羟甲基氨基甲烷Tris、1M（mol/l）盐酸1.0M-HCl、pH标准溶液四、实验步骤第一步借助搅拌棒往1l聚乙烯烧杯中倒入700ml离子交换蒸馏水。将烧杯放置于磁力搅拌器水浴中，如图4.1所示，并用玻璃盖盖住，并把烧杯中的水加热至36.5±1.5°C，加热过程中不断用搅拌棒搅拌。图4.1水浴磁力搅拌器第二步按表2所述顺序将药品溶解于36.5±1.5°C的溶液中。第三步溶解三羟甲基氨基甲烷Tris前，在溶液中插入pH计电极。溶液PH值应为2.0±1.0。第四步将溶液加热到36.5±1.5°C。如果溶液少于900ml，则向溶液中加入蒸馏水使其达到0.9l。第五步使溶液温度保持在35°C至38°C之间，最好为36.5±0.5°C，往溶液中慢慢加入Tris，并注意溶液的PH值变化。加入少量Tris后，停止加入，直到加入的试样完全溶解，PH值不再变化。然后再加入少量的Tris，使溶液的PH值逐渐上升。当PH值为7.30±0.05时，确保溶液温度为36.5±0.5°C。在溶液36.5±0.5°C环境下，加入更多的Tris，使PH值接近7.45。第六步当PH值升到7.45±0.01后，停止加入Tris，然后使用注射器往溶液中加入1M-HCL，使PH值降到7.42±0.01，并注意PH值不低于7.40。在PH值降到7.42±0.01后，慢慢溶解剩下的Tris，并使PH值接近7.45。如果还有Tris剩下，交替加入1M-HCL和Tris。重复这个过程，直到所有的Tris溶解到溶液中，溶解过程中保持PH值在7.42-7.45之间。在溶解完所有的Tris后，调整溶液的温度到36.5±0.2°C。通过缓慢滴入1M-HCL，使溶液在36.5±0.2°C条件下PH值为7.42±0.01，最后将溶液PH值调整为36.5°C下7.40，其中调整过程中温度的升降速率低于0.1°C/min。第七步从溶液中移出PH计电极，用离子交换和蒸馏水冲洗电极，并将冲洗液倒入溶液中。第八步把PH调整后的溶液从烧杯中倒入1000ml容量瓶中。用离子交换和蒸馏水多次冲洗烧杯表面并将冲洗液倒入容量瓶中，并用搅拌棒引流放置溶液掉入容量瓶中。第九步往溶液中加入离子交换和蒸馏水，使其到达刻度线（不需要精确控制，因为冷却后量会变少），在烧瓶上放置一个盖子，并用塑料膜封闭。第十步在烧瓶中混合溶液后，将其置于水中冷却至20°C。第十一步在溶液冷却至20°C后，往其中加入蒸馏水使溶液达到刻度线。五、数据处理与模拟体液保存1、数据处理2、模拟体液保存制备的模拟体液应保存在塑料瓶中，并用盖子盖紧，置于5-10°的冰箱中。模拟体液应在制备后的30天内使用。六、注意事项1、需要保证制备的溶液保持无色透明且瓶底没有沉积。如果出现沉淀，应停止制备模拟体液，倒掉溶液，并重新洗涤容器制备模拟体液。2、在模拟体液制备中，避免使用玻璃容器，推荐使用表面光滑且没有裂纹的塑料容器，因为玻璃容器表面和裂纹边缘会诱导磷灰石成核。更换有裂纹的容器。3、不能同时溶解几种试样。只有在前一种试样完全溶解后才能溶解下一种试样。4、由于试样氯化钙通常为颗粒状，对于磷灰石沉淀出现具有重要影响，而且颗粒溶解依次需要花很长时间，所以在下一次溶解开始前使其完全溶解。5、使用量筒量取1M-HCL前应使用1M-HCL清洗量筒。6、量取像KCl、K2HPO4·3H2O、MgCl2·6H2O、CaCl2和Na2SO4易受潮试样时应尽可能快。7、不要一次加入过多的Tris，因为溶液PH的突然变化会导致磷酸钙沉淀的出现。如果溶液温度没有在36.5±0.5°C内，加入Tris使PH值升到7.30±0.05，停止加入，并等待溶液温度达到36.5±0.5°C。8、考虑到PH值随着温度的升高而降低（在36.5±1.5°C下，每摄氏度PH值变化0.05），在36.5±0.5°C下，溶液PH值不应该超过7.45。1M盐酸配置般市售浓盐酸质量分数为36%-38%，以37%含量举例，其密度为1.19g/ml，1L浓盐酸其摩尔数为37%*(1.19*1000)/36.5=12mol，摩尔浓度即为12mol/L。现在要配置1M盐酸，就是要配置1mol/L盐酸，按公式C1*V1=C2*V2,12*1=1*V得V＝12L，V=V（浓盐酸）+V（水），所以V（浓盐酸）＝1L，V（水）＝11L，意思就是将1L浓盐酸加入到11L水中稀释所得到的稀盐酸，它的浓度就是1Mol/L，要用多少1M盐酸，按相应比例配就可以了。赞同SBFisanaqueoussolutionwithinorganicionconcentrations(Na+213,K+7.5,Mg+2.25,Ca+3.75,Cl-222,HCO3-27,PO4-1.5,SO42-0.75innM)nearly1.5timestothoseofhumanbloodplasma.Thepreparationprocedureis:1.Accuratelyweighfollowinginorganiccompoundsintoabeaker(1000mL):NaCl10.776g,KCl0.3356g,K2HPO4·3H2O0.3423g,MgCl2·6H2O0.4676g,CaCl2·2H2O0.5586g,andNa2SO40.1065g.2.Add986mLdeionizedwaterintothebeaker,andthenstirfor5min.3.Add10.5mLHClsolution(1.0M)intothebeaker.Stirthemixturetoallowalltheinorganiccompoundstobedissolvedcompletely.4.AddNaHCO32.2683gintothebeaker.StirituntilallNaHCO3wasdissolved,andthenaddtheother10.5MlHClsolutionintothebeaker.5.Putthebeakercontainingthesolutionintoawaterbathat37oC.Addtris(hydroxymethyl)aminomethane[(CH2OH)3CNH2]slowlytoallowthePhofthesolutiontoget7.4at37oC.6.Transferthesolutionintoaglassbottle.