沪科版-区公开课-培养基与微生物的分离

培养基与微生物的分离食品工业：酵母菌酵母菌菌落啤酒酵母面包制药工业：青霉菌青霉素环境保护：好氧微生物群污水处理池微生物的营养物质碳源：氮源：无机盐生长因子：水为微生物提供碳素来源。主要用于合成细胞中的蛋白质、核酸等含氮物质。某些微生物自身不能合成或合成量不足，但又是这些微生物生长和代谢所必须的一些小分子有机物。例：某同学在做微生物实验时，不小心把蓝细菌、硝酸细菌和大肠杆菌混在一起。该同学寻求您的帮助，请您根据下表确定培养基配方将蓝细菌、硝酸细菌和大肠杆菌分离。项目微生物氮源无机盐生长因子水蓝细菌需要需要不需要需要硝酸细菌需要需要不需要需要大肠杆菌需要需要不需要需要碳源能源亚硝酸盐氧化过程中释放的化学能CO2光能CO2有机物有机物的氧化过程中释放的化学能1.分离原理：蓝细菌能利用作为其生长所需的能量并以为唯一碳源进行生长,属于光能自养型微生物；硝酸细菌能利用的氧化过程中释放的化学能作为其生长所需的能量并以作为唯一碳源进行生长，属于化能自养型微生物；大肠杆菌生长所需的能量来自氧化过程释放的化学能，生长所需要的碳源主要是，属于化能异养型微生物。光能CO2亚硝酸盐CO2有机物有机物2.确定选择培养基成分和培养环境：一种用以分离；一种用以分离；一种用以分离。不加碳源和亚硝酸盐，含水、无机盐和氮源的培养基并给予光照蓝细菌不加碳源，添加亚硝酸盐，含水、无机盐和氮源的培养基并在黑暗环境中培养硝酸细菌不加亚硝酸盐，含碳源、水、无机盐和氮源的培养基并在黑暗环境中培养大肠杆菌1.分离原理：蓝细菌：光能、C02、光能自养型硝酸细菌：亚硝酸盐氧化、CO2、化能自养型大肠杆菌：有机物氧化、有机物、化能异养型选择培养分离的思路：A（目标菌株）BCD（其他杂菌）取其所抗：投其所好：对目标菌株：对其它杂菌：促进或0抑制或0【若为抑制，可直接分离；若为0，需进一步划线或稀释分离】无论是哪种选择培养基，都必须允许特定微生物的生长同时抑制或阻止其他微生物的生长（包括通过竞争而间接抑制）配制选择培养基的策略：，。-0扣除某些营养物质+0添加某些营养物质+-特殊物理环境耐受-0添加抑制性物质基因工程中用“插入失活”检测重组DNA氨苄青霉素抗性基因四环素抗性基因思考题：迁移训练1：1.观察比较说明正常质粒与重组质粒有何不同点？2.经导入过程后，可得到几种大肠杆菌细胞？分别是什么？这几种大肠杆菌细胞在A、B培养基上的生长状况如何？如要获得目标菌株，应再如何操作？导入迁移训练2：所有的生物都需要氮元素，但绝大多数生物都不能直接利用大气中的N2，只有固氮微生物能将大气中的分子氮还原成氨。固氮微生物主要分为自生固氮微生物和共生固氮微生物。在土壤中存在多种自生固氮菌，它们对于增加土壤中的氮素有重要意义。从土壤中分离自生固氮菌，并制成菌肥施入土壤中能增加土壤肥力。如何从土壤中分离得到自生固氮菌？请简单说说您的设计思路。在不添加氮源，含碳源、无机盐、水的选择培养基上接种土壤浸出稀释液，其中的微生物只有自生固氮菌能生长，因而可将其分离出来。抗生素与细菌抗药性：一个永恒的话题①抗生素属于微生物的次级代谢产物；对产生菌自身无明显作用，也不会危害产生菌自身；小知识：抗生素②抗生素虽然并非自身生长繁殖所必需，但因能杀死或抑制周围其他微生物而对自身的生存有利。③抗生素的抑菌和杀菌具有特异性，但是抗生素对病毒不起作用。④抗生素使用的主要副作用：一是因为选择而增强菌群的抗药性；二是杀死消化道黏膜表面的正常菌群而失去了对一些病原菌的拮抗作用，降低人的免疫能力和维生素等的供应。（相互对照）结论：抗药性原本已存在，青霉素只起选择作用。如何证明抗药性个体不是细菌接触了青霉素之后才产生的？请说说您的设计思路。迁移训练3：思考题：1.细菌群体抗药性增强与微生物进化之间有何联系？2.细菌有抗药性，研究发现抗生素对细菌的选择效率较高，临床上还能用抗生素治疗相关疾病么？使用中有哪些注意事项？接种到含青霉素的培养基上（它们没有接触过青霉素）●●●●●正常培养基上培养作业:请设计分离以下两种微生物：1.放线菌与人类的生产和生活关系极为密切，目前广泛应用的抗生素约70%是各种放线菌所产生。一些种类的放线菌还能产生各种酶制剂（蛋白酶、淀粉酶、和纤维素酶等）、维生素（B12）和有机酸等。请将其分离。提示：酚能抑制大多数细菌和霉菌的生长，放线菌对酚不敏感。2.利用高性能纤维素酶分解纤维素可以代替化石燃料，解决能源紧缺问题。自然界中的某些纤维素分解菌能产生纤维素酶分解纤维素为其生命活动提供能源。请将其分离。