食源性疾病标本的正确采集及送检规范

食源性疾病事件样本采集方法及时、准确、有代表性地采集食源性疾病有关样本，对疾病的明确诊断、病人的急救治疗、查明有毒食品来源及毒性具有重要意义应认真准备好采样器材(灭菌采样容器，运送培养基、无菌棉签、采血针筒、试管等)采样应做到及时、正确操作。样品采集采样用容器和试剂1.采样容器应采用洁净、无色、无毒的聚乙烯塑料或硬质玻璃（又称硼硅玻璃）。样品瓶必须专瓶专用，切不可用实验室装过试剂的瓶作采样瓶。2.用于微生物检验容器基本要求是选耐用材料制成，容器包装好后可防渗漏，能承受空中或地面运送过程中可能发生的温度和压力变化。所有采样用具、容器需严格灭菌，并且不能存放过长时间，防止污染影响检验结果。３、采样用的生理盐水、运送培养基及有关试剂等都应该满足新鲜、无菌的要求，同时应符合采样所需要的试剂量，如运送粪便的培养基为5ml/管为宜．采集标本的基本原则1、用于分离培养的病人标本，尽量在抗菌药物使用之前采集标本。2、对微生物检测样品，应避免采样时对微生物的杀灭作用和引入新的抑菌物质，如容器是否有消毒剂的残留，或使用刚烧灼未冷却的采样工具。注意保护目的微生物．同时避免杂菌污染．3、注意采样部位，要在疾病发生的确切部位采样，也就是病原菌最多的地方。如细菌性痢疾的大便，采样要采取脓血部份送检。采集标本的基本原则4、采集的标本要有足够的量。要根据标本中病原菌的含量、分离要求和标本的性质而定。一般脓液标本要1～2毫升，血液标本5～10ml．如肛拭采样至少要用2根棉拭，食品采样应尽量多于25g（ml）以上5、采集标本时应注意与病程的关系。如伤寒病人第一周血培养阳性率高，2～4周则大便培养阳性率高，败血症高热寒战时血培养阳性率高，用药前血培养阳性率高。采集标本的基本原则6、标本采集后应立即送至实验室。一般要求不超过4h。床旁接种可提高病原菌检出率。7、以棉拭子采集的标本如咽拭子、肛拭或伤口拭子，宜插入运送培养基或生理盐水中送检。8、做好样品标记，填写采样单。应详细填写检样名称、来源、采样时间、采样方法、中毒情况、患者主要临床症状、检测项目等，使实验室能准确及时接种相应的培养基和适宜的培养环境，提高阳性检出率采集标本的基本原则9、根据不同样品的性状，检验项目要求，合理保存和运送样本。夏秋季最好用冷藏方法运送样品。1.食品样品采集（1）尽量采取中毒患者食用后的剩余食品；（2）无直接剩余食品时，采集可疑中毒食品的包装或者用灭菌生理盐水洗涤盛过可疑中毒食品的容器，取洗涤液；（3）采集同一加工场所加工的其它直接入口食品；（4）半成品或原料，若是化学性、有毒动植物食物中毒采集食品原料尤为重要；（5）调查人员应对食品加工场所进行认真全面搜查，以客观结果判断是否还存在剩余食品或者原料。2.涂抹样品采集这类采样主要针对细菌性食物中毒；包括对刀、墩、容器、冰箱、水池、下水道口、设备、工具等可能直接或间接接触可疑中毒食品的物品表面进行涂抹采样,也可用刀刮物品表面取样。3.粪便标本采集（1）粪便标本应在发病早期并且尽量在用抗生素治疗前采集，在急性期（3天以内）采集标本，可以提高检出率。（注：无论中毒病人是否已经服药，均应进行大便采集。）（2）粪便标本中含有很多杂菌，但也应该在标本采集过程中注意无菌操作，防止杂菌污染。为提高检出率，最好采集新鲜粪便，采集脓血便或粘液便，陈旧标本影响检出率。（3）应采集严重腹泻中毒病人的大便。3.粪便标本采集（4）液状粪便采集水样便或含絮状物的液状粪便2～5ml；成形粪便至少取蚕豆大小粪便1块（约5g）放于灭菌容器内，若无法获得粪便时，可用保存液或增菌液湿润过的棉拭子插入肛门4～5cm深处（小儿2～3cm）轻轻转动一圈，取直肠表面的黏液后取出，盛入运送培养基或保存液中送检，为保证多个检验项目的开展，同一患者应至少采集2支肛拭。采样时注意勿将尿液或水混入粪便或容器内，采样后尽快塞紧或旋紧容器。3.粪便标本采集（5）用于厌氧菌培养的标本，应尽量避免接触空气，最好立即培养。若不能立即培养，则将粪便标本置于无氧容器内，（６）不能及时分离培养的，用于细菌培养的样品可采用冷藏（4℃～8℃）保存。用于病毒培养或核酸检测的样品，应采用冷冻（-20℃～80℃）保存。不要超过2h4.胃内容物：通过收集患者呕吐物、洗胃液、胃内抽取液和尸体解剖获得。注意避免污染，洗胃液最好采集最初抽出的，用高锰酸钾洗胃后的胃液意义要小些。在收集尸检材料中的胃内容物时，要注意胃的底部胃液的收集，因为比重大、溶解度低的物质往往沉淀于底部，如毒鼠强。采集的胃内容物量较大时，可取出后倾倒入一较大的玻璃漏斗内，漏斗的出口先塞住，混杂在胃内容物中的结晶和粉末将沉淀在漏斗底部，然后将上层液体和下层固体分别收集。4.胃内容物：在尸检中，对中毒迁延一段时间后才死亡的患者或生前已经进行洗胃的患者，要注意收集肠内容物。胃内容物的收集时效性强，错过了时机不能弥补。所采集的样本可用玻璃、聚乙烯或聚四氟乙烯器皿盛装，避免使用金属器皿。采集量最好达到1OOg（ml）以上。5.血液采集（1）是确诊中毒最主要的样本，因为某些经常可能服用的药物，如镇静催眠药剂，胃内容物中查到不能确诊，只有从血中检测到超过中毒量及死亡量时才能够确定。血液采集应注意：①根据不同毒物在血液中的半减期决定采样时机；②选择恰当的盛装血样的容器，如疑为百草枯中毒患者的血液不能用玻璃试管，因为玻璃可以使百草枯钝化，钝化后的百草枯实验室不能检出；5.血液采集③注意密封，如疑为一氧化碳中毒者应尽早抽血5～15ml装满玻璃试管，必须用密封玻璃塞塞紧，避免瓶中残留空气，血液是分析一氧化碳中毒的惟一检材；对于其他易从样本中逸出的毒物也要密封保存，尽快检测，如氰化物；④尽量不加防腐剂和抗凝剂。5.血液采集（2）用于血清学检测时，需采集急性期(发病初期)和恢复期(2-4周后)静脉血3ml。副溶血弧菌为1-2日和1周。同时采集正常人静脉血作为对照。（3）作血液病原培养时，如伤寒病人第一周血培养阳性率高，败血症高热寒战时血培养阳性率高，用药前血培养阳性率高。严格无菌采静脉血，一般成人采血10～15ml，儿童2～5ml，婴儿0.5～2ml，放入无菌的加入抗凝剂的有螺口容器或培养瓶中送检。作血片、暗视野检查可采耳垂血或指尖血。6.食品加工人员带菌情况采样据食物中毒的情况要求，可采取售货员或制作食品的工作人员及直接或间接接触食品的有关人员肛拭、手、鼻、咽和有感染灶的皮肤等涂抹样，特别对那些在事件发生前或现正患有肠炎、发烧、化脓性及可疑带菌者进行重点采样7.尿液采集主要采用中段尿采集法，先用肥皂水清洗外阴部，再以无菌水洗净，一般取首次晨尿的中段尿100～200ml。用玻璃或塑料瓶盛装，不加防腐剂；注意采集时间，一些毒物在中毒初期尿检阴性，如百草枯一般要在口服后2小时采集。8.水样采集采集时最好采非日光直射处的表层水。表面水样的采集，必须将聚乙烯瓶插入水面以下0.5m处，样品应充满容器。采样后立即加盖塞紧，避免接触空气。测定水中金属元素或有机污染物时，必须更加小心注意采样器具的清洁问题。一般要在采样点用水样冲洗事先处理好的采样器2～3次，同时采集的样品中不要混入固体物质。如水中有余氯，在容器灭菌前应向内加入硫代硫酸钠以还原余氯。用于化学因子检测的水样盛装容器可以不灭菌，但应彻底清洗干净。9.其它采样对厨房、仓库、储藏室中发现的鼠及粪便、猫、狗等亦需采样。在肉毒中性毒素中毒时，对做食品的原料和周围的土壤亦需采样使用卫生部统一制定的采样记录文书，经有关责任人员签字后送检；注意样品采集样品采集数量学校等集体单位至少采集新发病人或具有典型的临床症状、未经过抗生素治疗的样品（粪便或肛拭）10份可疑食品应采集5份（留样食品、原配料、半成品）食品容器、用具和加工设备等环节采样5－10份食堂或盒饭公司从事食品从业人员进行肛拭采样肛拭采样至少要用2根棉拭，食品采样应尽量多于25g（ml）以上样品名称采样数量肉及制品500g（不同部位）流体及半流体食品200g（充分搅拌后）呕吐物50~100g（每人）粪便5~10g（每人）尿液100~200ml（每人）血液5~10ml（每人）容器洗涤水100~200ml（每件）尸体标本10~20g（每种脏器）食物中毒采样数量采多少份所有标本在采集时立即分装，一式N份(不同检验项目、重复实验、其它实验室复核、留样)采什么食源性疾病病原菌或其毒素常见食品潜伏期病程（d）主要症状重点检查材料沙门氏菌肉类、鸡蛋产品最短6~8h，长可达2~3d，平均12~24d3~7恶心、呕吐、腹痛、腹泻、发热（38~40℃）、出冷汗、头痛、全身痛粪便食品血液志贺氏菌冷盘、凉拌菜短6h，长24h，一般10~20h3~7剧烈腹痛、腹泻、水样便、伴有血液和黏液、里急后重粪便食品血液副溶血性弧菌水产品、腌制品8~24h，平均10h1~3恶心、呕吐、腹痛（以上腹部为主）腹泻、多为水样便粪便食品变形杆菌、普罗威登氏菌、摩根菌肉、蛋、水产品短1~3h长60h，一般12~16h1~3呕吐、腹痛、腹泻、发热（约38℃）、摩根菌可有血便或纯血液食品粪便血液小肠结肠炎椰尔森菌乳、蛋、肉水产品一般约10d左右，经饮水和食物型爆发多为3~5d3~14恶心、呕吐、腹痛、腹泻、头痛、发烧、结节性红斑粪便食品大肠埃希菌（急性胃肠炎型）凉拌菜、肉类食品短6h、长72h、一般10~15h1~3恶心、呕吐、腹痛、腹泻、水样便或粘液便、发热不超过39℃粪便食品血液大肠埃希菌（急性菌痢型）凉拌菜、肉类食品48~72h1~3腹痛、腹泻、发烧少数呕吐、血便、里急后重粪便食品血液空肠弯曲菌家禽、肉、牛奶、水1~10d，平均3~5d12h~7d发烧、头痛、眩晕、背痛、肌肉痛、战栗、呕吐、腹痛、腹泻家禽肉牛奶、水等椰毒假单孢菌、酵米面亚种酵米面、变质银耳1~48h，一般1~10h1~14恶心、呕吐、发热、黄疸、昏迷、谵语、四肢抽搐、少尿、血尿、尿闭、休克、酵米面、变质银耳醋、凉粉蜡样芽胞杆菌（呕吐型）米饭、肉、乳、淀粉类食品短0.5h、长5h、一般1~3h约1h呕吐、腹痛为主、其次是腹泻、发热食品呕吐物蜡样芽胞杆菌（腹泻型）米饭、肉、乳、淀粉类食品短6h、长16h、一般10~12h约1h腹痛、腹泻为主、少数呕吐、不发热食品粪便呕吐物葡萄球菌（肠毒素）肉、乳、淀粉类食品30min~6h1~2d恶心、呕吐（频繁而剧烈）、腹痛、腹泻食品呕吐物溶血性链球菌肉类（特别是猪头肉）6~12h2~7d恶心、呕吐、腹痛、腹泻、尿急、尿频、关节炎、膝关节痛、头痛、中度发热、咽头及扁桃体红肿有白膜食品咽拭子肠球菌肉、乳、水产品、冷冻食品短者2~3h、长者20h、一般5~10h1~2d上腹不适、恶心、呕吐、腹痛（多呈痉挛性疼痛）、腹泻、少数发热食品呕吐物、粪便肉毒梭菌（肉毒毒素）罐头、香肠、鱼类、豆制品2h~14d、平均1~2d2~20d咽食困难、复视、失音、呼吸困难食品呕吐物产气荚膜梭菌肉类食品8~22h，平均1~2d1~2d腹痛、腹泻、少数呕吐食品粪便河弧菌水产品、腌制品短6h、长19h，一般13~14h1~3d腹痛、腹泻、呕吐、发热、类似霍乱病的表现食品粪便呕吐物气单孢菌水产品、水短1.5h，长20h，一般8~13h1~3d以腹泻为主，其次呕吐、腹痛、发热食品粪便呕吐物类志贺菌水、水产品、禽畜肉短2.5h，长19h，一般7h1~2d腹痛、腹泻、恶心、呕吐、伴有全身不适食品粪便李斯特菌生奶及奶制品、肉制品、水产品、果蔬？？腹痛、腹泻、败血症、脑膜炎、流产、死胎食品粪便呕吐物采什么样对照内对照外对照暴发性食源性疾病多途径传播疾病（大肠杆菌O157:H7）潜伏期长的疾病（伤寒10-14天、李斯特菌2-3周等）非消化道症状的疾病水源性传播疾病需注意什么时间采采样时间氟乙酰胺在体内数小时后就开始转化为氟乙酸，血中在十余小时或数天后就检不出了氟乙酰胺，这个阶段体内氟乙酸浓度仍较高，所以应该采集患者的血样或尿样来检测氟乙酸；毒鼠强在体内代谢缓慢，中毒后数月后采集的血样对病因确定仍有重要价值。恢复