CliniMACS 干细胞移植应用

CellSeparationSystem德国美天旎CliniMACSplus免疫磁性分选技术在干细胞移植中的应用TechnologyComponentsMicroBeadsColumnInstrumentPrincipleTubingSetsSoftwareReagentsKeyFeatures全国总代理：上海强智生物科技有限公司联系电话：[phone]CellSeparationSystemMACS技术－从实验室到临床研究用产品ISO13485质量体系指导下生产CE认证的产品（CliniMACS）性能标准•有活性的细胞•高性能•密闭、无菌系统•样本处理极为安全•标准化的、可控的、可靠的分选过程•易于操作CellSeparationSystemCliniMACS®系统细胞特异性的免疫磁性标记试剂管道CliniMACSPlus®仪器(含各种不同分选程序的软件)TechnologyComponentsMicroBeadsColumnInstrumentPrincipleTubingSetsSoftwareReagentsKeyFeaturesCellSeparationSystemMACS微珠超顺磁葡聚糖微球胶状基质(d50nm)特异性的鼠抗人单克隆抗体共价结合在磁珠上CellSeparationSystem直接标记MACS微珠右旋糖酐铁微粒直接包被在抗体上细胞特异性抗原TechnologyComponentsMicroBeadsColumnInstrumentPrincipleTubingSetsSoftwareReagentsKeyFeatures生物素分子间接标记右旋糖酐铁微粒直接包被在抗体上CellSeparationSystem»50纳米的右旋糖酐铁微粒»磁珠不需要解离»保持细胞原有功能可直接用于后续实验或细胞培养无毒性可生物降解MACS微珠的特点TechnologyComponentsMicroBeadsColumnInstrumentPrincipleTubingSetsSoftwareReagentsKeyFeaturesCellSeparationSystem»永久磁铁在MACS分选柱中可产生超强的磁场»标记的细胞(黑灰色)在铁磁结构附近被保留下来»未标记的细胞(浅灰色)可通过分选柱MACS分选柱TechnologyComponentsMicroBeadsColumnInstrumentPrincipleTubingSetsSoftwareReagentsKeyFeaturesCellSeparationSystem•1997.12欧共体批准上市，一年后进入中国市场•分选效率极高(如:CD34、CD133分选纯度90-99%,回收率60%以上,T细胞被动去除3.7-5Log）•无交叉污染•传染性血制品尤为安全(完全密闭的分选系统)•全球仪器近1000台，中国39台•目前全球已做数万例分选(50%为CD34分选）TechnologyComponentsMicroBeadsColumnInstrumentPrincipleTubingSetsSoftwareReagentsKeyFeaturesCellSeparationSystem115131134211212国内CliniMACS仪器分布(现存38台)CellSeparationSystem缓冲液袋细胞准备袋挤压阀控制液体流动蠕动泵控制管道中的液体流向靶细胞收集袋废液和非靶细胞袋容器仓预冲废液袋磁性分选单位产生永久磁场计算机软件系统CliniMACS®Plus仪器TechnologyComponentsMicroBeadsColumnInstrumentPrincipleTubingSetsSoftwareReagentsKeyFeaturesCellSeparationSystem细胞分选原理：富集分选细胞准备袋磁场分选柱阴性成分袋细胞收集袋用CliniMACS®试剂标记的细胞通过磁性分选柱磁场在“ON”位置磁性标记的细胞留在分选柱中未标记的细胞流入阴性成分袋磁场在“OFF”-位置磁性标记的细胞(靶细胞)被释放并收集在细胞收集袋内（阳性成分）TechnologyComponentsMicroBeadsColumnPrincipleInstrumentTubingSetsSoftwareReagentsKeyFeaturesCellSeparationSystem分选原理：去除分选细胞准备袋磁场分选柱非靶细胞成分在阴性成分袋内细胞收集袋用CliniMACS®试剂标记的细胞通过磁性分选柱磁场在“ON”位置磁性标记的细胞留在分选柱中未标记的细胞（靶细胞）流入细胞收集袋磁场在“OFF”-位置磁性标记的细胞被释放并收集在阴性成分袋内（非靶细胞成分）TechnologyComponentsMicroBeadsColumnPrincipleInstrumentTubingSetsSoftwareReagentsKeyFeaturesCellSeparationSystemCliniMACS®试剂»仅限一次性使用»储存2-8°C»严禁冷冻»效期：3-4个月StemCellsCD133RationaleApplicationsSpecificationHandlingRel.productsPerformanceCD133FlowchartDataCellSeparationSystemCD25CD4CD8CCSBDCA1BDCA4CD34CD133CD3CD56CD19CD14Anti-BiotinCD6CD105CD271CD137CE认证尚无CE认证CliniMACS试剂的研发CD45RATCRMARRSMACSiBeadsCellSeparationSystemCliniMACS®富集管道系统Clinical管道系统研究用管道系统管道CliniMACS管道CliniMACSLS管道CliniMACS管道600*CliniMACS管道150*REFno.标记细胞与应用有关与应用有关总细胞数(WBC)162-01161-01166-01167-010.6x10960x1091.2x109120x10920x10910x109TechnologyComponentsMicroBeadsColumnInstrumentPrincipleTubingSetsSoftwareReagentsKeyFeatures*仅限研究用CellSeparationSystemCliniMACS®去除管道管道CliniMACS去除管道(DTS)REFno.标记细胞总细胞数(WBC)261-0140x109120x109TechnologyComponentsMicroBeadsColumnInstrumentPrincipleTubingSetsSoftwareReagentsKeyFeatures162-0120x109120x109CliniMACSLS管道40CellSeparationSystemCliniMACSplus分选程序富集程序:TechnologyComponentsMicroBeadsColumnInstrumentPrincipleTubingSetsSoftwareReagentsKeyFeaturesCD34SELECTION1and2标准容量(1)及大容量(2)富集CD34+造血干细胞CD133SELECTION1and2标准容量(1)及大容量(2)富集CD133+造血干细胞CellSeparationSystemCliniMACSplus分选程序富集程序:ENRICHMENT1.1抗原表达5%的细胞(如.CD14,CD56,CD8)ENRICHMENT2.1抗原低度表达的细胞(如.CD133)ENRICHMENT3.1抗原中度表达的细胞(如.CD34)ENRICHMENT5.1抗原表达很弱的细胞(仅限科研用)CellSeparationSystemCliniMACSplus分选程序去除程序:DEPLETION1.2研究用去除分选程序，不能用于临床DEPLETION2.1临床级去除分选程序，包括低、中度抗原表达细胞的去除DEPLETION3.1快速去除大容量细胞，如动员后白细胞采集物中CD3/CD19+细胞的联合去除TechnologyComponentsMicroBeadsColumnInstrumentPrincipleTubingSetsSoftwareReagentsKeyFeaturesCellSeparationSystemCliniMACS®Plus仪器:灵活的应用平台主要特性封闭的细胞分选过程全自动的分选程序良好的性能»不会引起交叉污染，适用于传染性血制品»标准化»高度的可重复性和可靠性»纯度»回收率»去除效率TechnologyComponentsMicroBeadsColumnInstrumentPrincipleTubingSetsSoftwareReagentsKeyFeaturesCellSeparationSystemCliniMACS细胞分选CellSeparationSystemCliniMACS细胞分选所需消耗品CliniMACS试剂CliniMACS管道TechnologyComponentsMicroBeadsColumnInstrumentPrincipleTubingSetsSoftwareReagentsKeyFeaturesCellSeparationSystemCliniMACS细胞分选所需消耗品Ph5CliniMACSPBS/EDTA缓冲液八爪袋600ml转移袋细胞收集袋取样连接器Pall过滤器无菌管道连接器人血白蛋白免疫球蛋白各种型号注射器及其针头CellSeparationSystemCliniMACS细胞分选所需配套设备Ph6可调零的电子天平软管热封口器记时器三维摇床分浆夹低速大容量离心机超净台流式细胞仪CellSeparationSystemCliniMACS细胞分选步骤Ph2采集单个核细胞血浆稀释及体积调整抗体孵育准备CliniMACS仪器洗涤多余的抗体CliniMACSplus富集或去除收集靶细胞时间[min]总时间2－5hrs45－10030－6015－3045（检测细胞数、细胞活性）(离心15min,300g)（检测总细胞数、细胞纯度、活性）CellSeparationSystem临床应用•1.血液系统恶性肿瘤•2.血液系统非恶性肿瘤（再障、地中海贫血等）•3.实体瘤（神经母细胞瘤、肾母细胞瘤等）•4.自身免疫病、神经系统疾病•5.再生医疗:心肌缺血性疾病、脊髓损伤、糖尿病足•6.病毒感染（AIDS、病毒性肝炎等）•7.HSCT＋器官移植CellSeparationSystem细胞治疗造血系统应用再生医疗CellSeparationSystem细胞治疗血液系统再生医疗胚胎干细胞成体干细胞间充质干细胞血管重建心脏肝脏肌肉CD133脑…CD271CellSeparationSystem异基因干细胞移植•工具：相关的干细胞标志物•CD34,CD133,CD3/CD19,CD56–CEMark•CD6(indevelopment),•TCR(indevelopment)•应用领域:•造血系统疾病：–常规量化疗的成人和儿童半相和CD34或CD3/CD19移植–RIC的成人和儿童CD3/CD19MUD及IdSib移植•自身免疫病：–RIC的成人CD3/CD19移植–异基因移植治疗AID尚在临床试验中CellSeparationSystemCliniMACSCD34试剂•阳性分选CD34＋造血干、祖细胞（纯度95％，回收率60％）•被动去除T、B淋巴细胞（3.7–5Log）•被动去除肿瘤细胞（4－5Log）•一支试剂最多标记6x108CD34