土壤全磷的测定

LOGO土壤全磷含量的测定2014年3月10-13日了解土壤中磷的存在形式及来源。2.通过对土壤全磷含量的测定，掌握土壤全磷测定的原理和方法。土壤全磷的存在形式磷酸钙、镁（如磷酸八钙、十钙等）磷酸铁、铝（如红磷铁矿）其他复合磷酸盐（如氟磷灰石）正磷酸盐（磷酸一钙、磷酸二钙等）无机磷：占全磷的50%-80%有机磷：占全磷的20%-50%磷脂核酸、核蛋白植素（如肌醇六磷酸钙镁等）岩石风化而来。2.人为施入土壤的含磷肥料。实验原理土壤样品经浓硫酸和高氯酸高温消化，使土壤中有机磷、无机磷经脱水碳化、氧化还原等一系列作用，最终转化成正磷酸盐。溶液中的正磷酸盐磷在钼酸铵和酒石酸锑钾的作用下，形成磷钼锑三元杂多酸，然后被抗坏血酸还原为磷钼蓝，可用比色法测定。仪器与设备：土壤筛：孔径0.149mm分析天平分光光度计消化炉试剂：硫酸（密度1.84g.ml-1,分析纯）氢氧化钠溶液（c=4mol.L-1）硫酸（c=1mol.L-1）高氯酸（c=60%）二硝基酚指示剂硫酸钼锑储备液钼锑抗显色剂分光光度计消化炉待测液的制备（已备好）称取通过100目筛孔的烘干土样1.0g置于100ml消化管底部（勿将样品黏附在瓶颈上）。先滴入少许水润湿样品，在加浓硫酸5ml，摇匀放置30min（或放置过夜，可缩短消煮时间），然后加入60%高氯酸10滴，摇匀。消化炉上加热消化，直至消化液转为白色，表示消化完全，继续消化20min（如长时间消化，溶液仍为黑色或棕色，则可将消化管取下，冷却，补加高氯酸1~2滴置消化炉上继续消化），全部消化时间约2.5小时，取下，冷却，将消化液无损的转移至100ml容量瓶，冷却至室温后定容，放置澄清后吸取清液供磷的测定。同时做空白试验。）吸取澄清后的消化液2.00~10.00ml（含P5~25g），放入50ml容量瓶中，加水稀释至约30ml。2）加2~3滴二硝基酚指示剂，用4mol.L-1的NaOH溶液和1mol.L-1稀硫酸调节pH至溶液刚呈微黄色（指示剂酸方色为无色，在显色酸度时，指示剂本身不会带来颜色干扰），摇匀。3）加入钼锑抗显色剂5ml，用水定容至刻度，摇匀。4）在室温高于15℃的条件下放置30min后，在分光光度计上用1cm光径比色皿700nm的波长比色，以空白试验溶液作为参比液调零点，读取吸收值，利用标准曲线上计算出显色液Pmg.L-1数，溶液颜色在8h内可保持稳定。标准曲线的绘制（已备好）分别准确吸取5mg.L-1磷标准溶液0、1、2、3、4、5、6ml于50ml容量瓶中，加水稀释至约30ml。加入钼锑抗显色剂5ml，摇匀定容。即得含磷(P)量分别为0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6mg.L-1的标准溶液系列。摇匀，于15℃以上温度放置30min后，1cm光径比色皿700nm波长比色，用0mg.L-1磷标准系列显色液作参比液，调节吸收值到零，由稀到浓测标准系列显色液的吸收值，以吸收值为纵坐标，磷浓度(mg.L-1)为横坐标，绘制标准准曲线。=0.7339x+0.006R2=0.999300.050.10.150.20.250.30.350.40.450.500.20.40.60.8磷标准液浓度（mg.L-1）吸光度值、结果计算ρ——从校准曲线求得的显色液中磷的浓度，mg.L-1m——烘干土样质量，gV——显色时溶液定容的体积，ml10-3——将g数换算成每kg土壤中含磷的g数ts——分取倍数，ts=消煮待测液定容体积/测定时吸取待测液的体积Vm××土壤全磷含量测定（g/kg）=ρ×10-3ts)最后显色液中含磷量在20-30g最好，可通过称样重和最后显色时吸取待测液体积进行控制。2)样品批量测定时，加入浓硫酸后放置数小时，甚至过夜，可缩短消化时间。3)钼锑抗法要求显色温度为15~60℃，如果室温低于15℃，可放置在30~40℃烘箱中保温30min，取出冷却后比色。4)钼锑抗法要求显色液中硫酸的浓度为0.23~0.33mol.L-1。如果酸度小于0.23mol.L-1，虽然显色加快但稳定时间较短，如果酸度大于0.33mol.L-1，则显色变慢。列出影响实验结果的因素或者关键步骤，且根据结果对土壤样品做出评价。2.比较不同样地土壤全磷含量的差异并作简要分析。实验数据表格土壤样品重复吸取待测液体积（ml）OD值全磷含量（g/kg）平均值±标准误差123123分析日期：个容量瓶（1个做空白，3个测定A待测液，3个测定B待测液）待测液的制备（已备好）吸取澄清后的消化液2.00~10.00ml（含P5~25g），放入50ml容量瓶中，加水稀释至约30ml加2~3滴二硝基酚指示剂，调节pH，溶液刚呈微黄色加入钼锑抗显色剂5ml，用水定容至刻度，摇匀室温高于15℃的条件下放置30min700nm的波长比色录数据入表附：实验流程注意I:显色液中含磷量在20-30g最好，可通过称样重和最后显色时吸取待测液体积进行控制。建议量取2-3ml注意II:钼锑抗法要求显色液中硫酸的浓度为0.23~0.33mol.L-1。如果酸度小于0.23mol.L-1，虽然显色加快，但稳定时间较短，如果酸度大于0.33mol.L-1，则显色变慢。注意III:钼锑抗法要求显色温度为15~60℃，如果室温低于15℃，可放置在30~40℃烘箱中保温30min，取出冷却后比色。