三氮测定方法之一：N-(1-萘基)-乙二胺光度法测量亚硝酸盐氮

1N-（1-萘基）-乙二胺光度法测量亚硝酸盐氮1.方法原理在磷酸介质中，pH值为1.8±0.3时，亚硝酸盐与对-氨基苯磺酰胺反应，生成重氮盐，再与N-（1-萘基）-乙二胺偶联生成红色染料。在540nm波长处有最大吸收。2.干扰及消除氯胺、氯、硫代硫酸盐、聚磷酸钠和高铁离子有明显干扰。水样呈碱性（pH≥11）时，可加酚酞溶液为指示剂，滴加磷酸溶液至红色消失。水样有颜色或悬浮物，可加氢氧化铝悬浮液并过滤。3.方法的适用范围本法适用于饮用水、地表水、地下水、生活污水和工业废水中亚硝酸盐的测定。最低检出浓度为0.003mg/L；测定上限为10.0mg/L亚硝酸盐氮（以NO2-N）。4.仪器分光光度计。5.试剂实验用水均为不含亚硝酸盐的水。（1）无亚硝酸盐的水：于蒸馏水中加入少许高锰酸钾晶体，使呈红色，再加氢氧化钡（或者氢氧化钙）使呈碱性。置于全玻璃蒸馏器中蒸馏，弃去50mL初馏液，收集中间约70%不含锰的馏出液。（亦可于每升蒸馏水中加入1mL浓硫酸和0.2mL硫酸锰溶液（每100mL水中含36.4gMnSO4·H2O），加入1～3mL0.04%高锰酸钾溶液至呈红色，重蒸馏。）（2）磷酸ρ=1.70g/mL。（3）显色剂：于500mL烧杯内，加入250mL水和50mL磷酸，加入20.0g对-氨基苯磺酰胺，再将1.00gN-（1-萘基）-乙二胺二盐酸盐（C10H7NHC2H4NH2·2HCl）溶于上述溶液中，转移至500mL容量瓶中，用于稀释至标线，混匀。此溶液贮于棕色瓶中，保存在2～5℃，至少可稳定一个月。注意：本试剂有毒性，避免与皮肤接触或摄入体内。（4）亚硝酸盐氮标准贮备液：称取1.232g亚硝酸钠（NaNO2）溶于150mL水中，转移至1000mL容量瓶中，用水稀释至标线。每毫升含约0.25mg亚硝酸盐氮（ρNO2--N=0.25mg/mL）。本溶液贮于棕色瓶中，加入1mL三氯甲烷，保存在2～5℃，至少可以稳定一个月。贮备液的标定如下：①在300mL具塞锥形瓶中，加入50.00ml0.050mol/L的高锰酸钾标准溶液，5mL无分度吸管，使下端插入高锰酸钾溶液下面，加入50.00mL亚硝酸钠标准贮备液，轻轻摇匀。置于水浴上加热至70～80℃，按每次10.00mL的量加入足够的草酸钠标准液，使红色褪去并过量，记录草酸钠标准溶液用量（V2）。然后用高锰酸钾标准溶液滴定过量草酸钠至溶液呈微红色，记录高锰酸钾标准溶液总用量（V1）。②再以50mL水代替亚硝酸盐氮标准贮备液，如上操作，用草酸钠溶液标定高锰酸钾溶液的浓度（C1）.按下式计算高锰酸钾标准溶液浓度：C1(1/5MnO4)=0.0500×V4/V3按下式计算亚硝酸盐氮标准贮备液的浓度：亚硝酸盐氮（N，mg/L）=（V1C1－0.0500V2）×7.00×1000/50.00=140V1C1－7.00×V2式中：C1——经标定的高锰酸钾标准溶液的浓度（mol/L）；V1——滴定亚硝酸盐氮标准贮备液时，加入高锰酸钾标准溶液总量（mL）；V2——滴定亚硝酸盐氮标准贮备液时，加入草酸钠标准溶液量（mL）；2V3——滴定水时，加入高锰酸钾标准溶液总量（mL）；V4——滴定空白时，加入草酸钠标准溶液总量（mL）；7.00——亚硝酸盐氮（1/2N）的摩尔质量（g/mol）；50.00——亚硝酸盐标准贮备液去用量（mL）；0.0500——草酸钠标准溶液浓度（1/2Na2C2O4，mol/L）。（5）亚硝酸盐氮标准中间液：分取50.00mL亚硝酸盐标准贮备液（使含12.5mg亚硝酸盐氮），置于250mL容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每毫升含50.0μg亚硝酸盐氮（ρNO2--N=50.0μg/mL）。中间液贮于棕色瓶内，保存于2～5℃，至少可稳定一周。（6）亚硝酸盐氮标准使用液：取10.00mL亚硝酸盐标准中间液，置于500mL容量瓶中，用水稀释至标线。每毫升含1.00μg亚硝酸盐氮。此溶液使用时，当天配制。（7）氢氧化铝悬浊液：溶解125g硫酸铝钾（KAl(SO4)2·12H2O）或硫酸铝胺（NH4Al(SO4)2·12H2O）于1000mL水中，加热至60℃，在不断搅拌下，徐徐加入55mL浓氨水，放置约1h后，移入1000mL量筒内，用水反复洗涤沉淀，最后至洗涤液中不含亚硝酸盐为止。澄清后，把上清液尽量全部傾出，只留稠的悬浮物，最后加入100mL水，使用前应振荡均匀。（8）高锰酸钾标准溶液（1/5KMnO4）=0.050mol/L：溶解1.6g高锰酸钾于1200mL水中，煮沸0.5～1h，使体积减少到1000mL左右，放置过夜。用G-3号玻璃砂芯滤器过滤后，滤液贮存于棕色试剂瓶中避光保存，按上述方法标定。（9）草酸钠标准溶液（1/2NaC2O4）=0.0500mol/L：溶解经105℃烘干2h的优级纯无水草酸钠3.350g于750mL水中，移入1000mL容量瓶中，稀释至标线。（10）酚酞指示剂(C=10g/mL):0.5g酚酞溶于95%乙醇50mL中。6.步骤（1）校准曲线的绘制在一组6支50mL比色管中，分别加入0、1.00、3.00、5.00、7.00和10.00mL亚硝酸盐氮标准使用液，用水稀释至标线。加入1.0mL显色剂，密塞，混匀。静置20min后，在2h以内，于波长540nm处，用光程长10nm的比色皿，以水为参比，测量吸光度。从测得的吸光度，减去零浓度空白管的吸收度后，获得校正吸光度，绘制以氮含量（μg）为校正吸光度的校准曲线。（2）水样的测定当水样PH≥11时，可加入1滴酚酞指示液，边搅拌边逐滴加入（1+9）磷酸溶液至红色刚消失。水样如有颜色和悬浮物，可向每100mL水中加入2mL氢氧化铝悬浮物，搅拌、静置、过滤，弃去25mL初滤液。分取经预处理的水样于50mL比色管中（如含量较高，取分取适量，用水稀释至标线），加1.0mL显色剂，然后按校准曲线绘制的相同步骤操作，测量吸光度。经空白校正后，从校准曲线上查得亚硝酸盐氮量。（3）空白试验用水代替水样，按相同步骤进行测定。7.计算亚硝酸盐氮（N，mg/L）=m/V式中：m——有水样测得的校正吸光度，从校准曲线上查得相应的亚硝酸盐氮的含量（μg）；V——水样的体积（mL）。38.精密度和准确度三个实验室分析含0.0257～0.0816mg/L亚硝酸盐氮的加标水样，单个实验室的相对标准偏差不超过9.3%；加标回收率为90%～114%。五个实验室分析含0.083～0.18mg/L亚硝酸盐氮的加标水样，单个实验室的相对标准偏差不超过2.8%；加标回收率为96%～102%。9.注意事项①如水样经预处理后，还有颜色时，则分取两份体积相同的经预处理的水样，一份加1.0mL显色剂，另一份改加1mL（1+9）磷酸溶液。由加显色剂的水样测得的吸收度，减去空白试验测得的吸光度，再减去改加磷酸溶液的水样所测得的吸光度后，获得校正吸光度，以进行色度校正。②显色试剂除以混合液加入外，亦可以分别配制和依次加入，具体方法如下：对氨基苯磺酰胺溶液：称取5g对氨基苯磺酰胺（磺胺），溶于50mL浓盐酸和约350mL水的混合液中，稀释至500mL。此溶液稳定。N-（1-萘基）-乙二胺二盐酸盐溶液：称取500mgN-（1-萘基）-乙二胺二盐酸盐溶液于500mL水中，贮于棕色瓶内，置冰箱中保存，当色泽明显加深时，应重新配制，如有沉淀，则过滤。于50mL水样（或标准管）中，加入1.0mL对氨基苯磺酰胺溶液，混匀。放置2～8min，加入1.0mLN-（1-萘基）-乙二胺二盐酸盐溶液，混匀。放置10min后，在540nm波长测量吸收度。