第八章 实验室检验

兽医临床诊断技术讲稿兽医临床诊断技术第九章实验室检验兽医临床诊断技术讲稿血液检验血液样本的采取与抗凝血液样本的采取采血的部位和方法，根据检验的项目、所需血量和动物种类的不同，可分为毛细血管采血、静脉采血和心脏采血。毛细血管采血法除血沉测定和红细胞压积测定需较多量血液外，其他各项测定均可在耳尖、耳缘及耳静脉处按毛细血管采血。采血前先剪毛，酒精棉球消毒，待酒精挥发后，用消毒的干燥的针头迅速刺入2~3mm深，让血液自然流出，且勿挤压以免混入过多组织液。流出的第一滴血，可用于制作血片，然后用干棉球擦去局部的剩余血液，用流出的第二滴血液作红、白细胞计数和血红蛋白测定，若利用第三滴血时，仍要将第二滴血擦干，否则流出的血不能形成滴状，不易吸取。静脉采血法马、牛、羊可由颈静脉采血。鸡可由翼下静脉采血，即用细针头刺入翼下静脉后，任血液自行流出并接入试管中。犬、猫可于小腿外侧跖背外侧静脉或前臂内侧皮下静脉采血。局部剪毛消毒，用止血带扎住采血部上端，使静脉怒张，用消毒、干燥的注射器接上针头，针头斜上面刺入静脉采血，待抽至所需量后，先放松止血带，再用消毒棉球按住伤口，拔出针头。除去针头，将血液缓缓注入清洁的试管内。需抗凝血液时，试管内加抗凝剂，并立即混匀，以免凝固。心脏采血法多用于鸡及实验动物多量血液时，鸡可由胸腔入口处向心脏刺入由于心腔压力较静脉高，血液自然涌入注射器，兔及鸡亦可在左侧胸部第1、2肋间，心搏动明显处，针头与胸壁呈垂直方向缓缓刺入。兽医临床诊断技术讲稿血液检验血液的抗凝草酸钠是常用的抗凝剂，每1.5~2.0mg可抗凝1.0ml血液，可用于血液常规检验。因对红细胞大小有影响，故不能用红细胞压积测定，如测定红细胞压积时，可用双草酸盐抗凝剂或乙二胺四乙酸二钠。双草酸盐抗凝剂草酸钠0.8g草酸铵1.2g蒸馏水加至100ml溶解后吸取0.5ml，加入供采血试管或小瓶中，置干燥箱内（温度不超过80℃）烘干备用，可供5ml全血抗凝。兽医临床诊断技术讲稿血液检验乙二胺四乙酸二钠（EDTA－Na2）每10mg可使5ml全血抗凝；或配成10%的溶液，每2滴可使5ml全血抗凝。可适用于一般的血液学检查，特别是血小板计数，但因为影响血小板聚集和白细胞吞噬功能，不适合于血象及血小板功能检查。3.8%枸橼酸钠溶液每0.5ml可使5ml全血抗凝。常用于血沉、凝血因子和血小板功能检查。因其毒性小又可作为血液保养液。但不适用于血液化学检验。由于抗凝剂溶解缓慢，故只能配成溶液，不能用粉剂。血液的抗凝兽医临床诊断技术讲稿血液检验肝素肝素价格最贵，其优点是抗凝作用强，不影响血细胞的体积，不致溶血等，可用于多种血液生物化学分析和红细胞压积测定。但过量的肝素可引起白细胞聚集和血小板减少，故不适用于白细胞和血小板计数，也不适用于血涂片检查，因其在瑞氏染色时会出现蓝色背景，更不能用于凝血象的检查。血液的抗凝通常用肝素粉剂配成1g/L水溶液。取0.5ml置小瓶内，放于37～50℃中烘干后贮于冰箱内保存。能使5ml血液不凝固，肝素抗凝剂应及时使用，放置过久易失效。怀疑传染病时，采血应防止到处流散，检后残余血液及所用器皿应进行消毒处理。兽医临床诊断技术讲稿血液检验红细胞沉降率测定魏氏法魏氏血沉管长30cm，内径2.5mm管上有0~200的刻度，每一刻度的距离为1mm，其溶积为1ml。先向10ml刻度试管中加入3.8%枸橼酸1ml，再自静脉采血4ml，颠倒混合数次，然后用魏氏血沉管吸取抗凝剂至刻度0处，擦去管外血液，在室温条件下，垂直放于血沉管架上，经15、30、45、60min，分别观察并记录细胞沉降数值。兽医临床诊断技术讲稿血液检验红细胞沉降率测定“六五”型血沉管法“六五”型血沉管法内径0.9cm，全长17~20cm，管上有100个刻度容积为10ml。于血沉管中加入抗凝剂（草酸钠0.015~0.02g，枸橼酸钠粉末0.04~0.05g）,自颈静脉直接采血至刻度“0”处，立即充分混合，于室温垂直立于试管架上，镜15、30、45、60min各观察一次，并记录红细胞沉降的数值。兽医临床诊断技术讲稿血液检验红细胞沉降率测定各种动物的正常血沉值动物种类15分30分45分60分测定方法马驴黄牛水牛奶牛山羊猪31329.80.33497530.80.785396.7650.752055110.70.891.61.20.630六五型法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法六五型法①测定血沉时必须用新配制的抗凝血；②血液与抗凝剂混合要充分，柱面上不应有气泡，它可使血沉变慢；③用魏氏法测定时，事先应检查血沉架是否好用，以防漏用；④测定时室温以20℃左右为宜，温度过低可以减慢血沉。血沉加快，见于马传染性贫血、梨形虫病、结核、鼻疽、猪瘟、化脓性炎症、风湿症等。血沉减慢，见于大出汗、多尿、剧烈腹泻、马流行性脑脊髓炎、破伤风、牛瓣胃阻塞、腹痛症等。兽医临床诊断技术讲稿血液检验血红蛋白测定红细胞遇酸溶解，游离出血红蛋白，并被酸化为褐色的酸性血红素，稀释后与标准色柱比色，即可求得血红蛋白的含量。血红蛋白试纸测定法器材应备有测定血红蛋白试纸和4g%~15g%血红蛋白标准比色板。测定时，取试纸一条，吸附被检血液一小滴，待血完全浸透后，立即置于所附标准色板的小孔下，肉眼与色板色泽进行比较，选择颜色相同或近似者，即得100ml血液所含血红蛋白的克数。沙利氏血红蛋白测定法沙利氏血红蛋白计由比色架、标准比色柱、血红蛋白测定管及血红蛋白吸管组成。测定管有两个刻度标志，一侧的2~24刻度表示100ml血液中含有的血红蛋白克数；另一侧有20~160刻度，表示100ml血液中所含血红蛋白的百分数。兽医临床诊断技术讲稿血液检验血红蛋白测定动物种类血红蛋白值（克/100毫升）马、骡11.0（9.0~13.0）牛10.0（9.0~11.0）水牛8.3（8.0~9.0）羊9.8（7.8~11.6）猪10.5（9.5~12.0）鸡12.5（10.0~14.5）血红蛋白增高见于各种原因引起的血液浓缩，如腹泻、呕吐、大汗、多尿及肠梗阻等。血红蛋白减少见于各种贫血，如马鼻疽、牛结核、牛羊肝片吸虫病、仔猪蛔虫等。兽医临床诊断技术讲稿血液检验红细胞计数红细胞计数是将一定量的供检血液经一定倍数稀释后，计数一定容积的红细胞数，并换算为每立方毫米血液内含量。兽医临床诊断技术讲稿血液检验红细胞计数健康动物红细胞数（万/立方毫米）动物种类平均数值变动范围马650600~700牛（包括水牛）600550~700绵羊900800~1100山羊13001000~1600猪600500~700鸡350250~500红细胞增多可见于因各种原因引起的血液浓缩，如大出汗、胸膜炎和腹膜炎的渗出期等。红细胞减少多见于各种类型贫血，如马传染性贫血、牛梨形虫病、仔猪营养性贫血、新生幼畜溶血病、牛血红蛋白尿病等。兽医临床诊断技术讲稿血液检验白细胞计数用冰醋酸将红细胞破坏后，计算每立方毫米内白细胞总数。健康动物白细胞数（个/立方毫米）动物种类平均数值变动范围马80007000~9000黄牛、奶牛75007000~8000水牛88008000~9000绵羊85008000~9500山羊100007000~13000猪1300011000~16000鸡2000018000~30000白细胞增多可见于多数细菌性感染和炎症，如猪丹毒、猪肺疫、结核、马鼻疽、马腺疫、肺炎、胸膜炎、腹膜炎等。白血病时以白细胞的显著增多为特征。白细胞减少主要见于某些病毒性传染病，如猪瘟、流感等；某些重度疾病的后期；长期应用某些药物（如氯霉素等）；梨形虫病等。兽医临床诊断技术讲稿血液检验白细胞分类计数以百分率表示各种类型白细胞间的数量关系，称为白细胞分类计数。健康动物各类白细胞分类数值（%）动物种类嗜碱性细胞嗜酸性细胞嗜中性细胞淋巴细胞大单核细胞幼稚型杆状核分叶核马牛水牛猪羊0.50.50.50.50.54.54.010.02.55.50.51.04.04.04.55.01.053.033.035.035.033.035.056.047.053.057.03.02.03.03.03.0兽医临床诊断技术讲稿血液检验临床意义白细胞增多嗜中性白细胞增多：见于猪、牛巴氏杆菌病、马腺疫、肺炎及化脓性感染等。嗜酸性白细胞增多：见于某些蠕虫病、过敏性疾病及湿疹等。淋巴细胞增多：见于结核、鼻疽、布氏杆菌病、猪瘟及牛梨形虫病。单核细胞增多：见于败血性疾病，某些梨形虫病及李氏杆菌等。白细胞减少嗜中性白细胞减少：见于病毒性传染病、药物中毒（如长期服用抗生素）、各种疾病的垂危期。嗜酸性白细胞减少：见于败血症、某些病毒病及牛梨形虫病等。淋巴细胞减少：多为嗜中性白细胞增多而造成的相对性变化。兽医临床诊断技术讲稿血液检验在分析嗜中性白细胞增、减变化时，还应注意嗜中性白细胞的成熟情况。若未成熟的嗜中性白细胞增多，即出现嗜中性髓样细胞、幼稚型和杆状核嗜中性白细胞的比例增多，则称为核左移。若血液内分叶核嗜中性白细胞大量增多，而且核的分叶数目也增多，则称为核右移。白细胞总数增多的同时，出现核左移，表示骨髓造血机能加强，机体处于积极防御阶段；而白细胞总数减少时见有核左移，则表示骨髓造血机能减退，机体的抗病力降低。至于核右移，乃骨髓造血功能衰退的标志，多因机体高度衰竭而引起，常提示预后慎重。临床意义尿液检验尿液检验兽医临床诊断技术讲稿尿液常规检查注意事项1.供检尿应在清晨空腹采取的新鲜尿液为佳。因为这种尿液是在夜间形成的，受外界因素影响少。2.供检尿液最好是导尿管采集的尿液。因为这种尿液没有尿道、阴道污染物污染。3.采集尿液后，应立即检查，若不能及时检验，可加防腐剂，即每100ml尿液中加入福尔马林3~4滴或麝香草酚0.1g。尿液检验兽医临床诊断技术讲稿尿常规检查内容尿液一般物理性状的检查，包括透明度、尿色及气味等。尿液一般化学性状的检查，包括酸碱度、尿蛋白质、血液、血红蛋白的检查。透明度盛尿液于玻璃容器内，透光观察。正常的马尿因含有碳酸钙及不溶性碱性盐，故马尿混浊不清；牛及其他家畜因碳酸钙及不溶性盐很少，故澄清透明。如马尿透明时，是喂精饲料过多或骨软症、胃肠炎的象征；牛尿变为混浊时，常是肾炎、尿路炎症的表现。尿液检验兽医临床诊断技术讲稿尿常规检查内容尿色正常尿为深黄色或淡黄色。病理情况下有红尿，是泌尿系统出血、肌红蛋白尿或血红蛋白尿；尿呈黄绿褐色是胆红质尿、尿胆素原尿的特征。尿气味尿发氨臭，是膀胱炎、膀胱麻痹的表现，是由于细菌作用，使尿液分解产生氨的结果；尿发腐败臭，是膀胱、尿道有溃疡、坏死或化脓性炎症，由于蛋白质腐败分解而发生；尿发大蒜臭，见于牛酮血病、绵羊妊娠病，由于尿中含大量酮体的结果。尿液检验兽医临床诊断技术讲稿尿酸碱度草食动物尿呈碱性反应，若尿呈酸性反应时，是软骨症或胃肠炎的象征。酸性尿液透明。尿蛋白质正常尿含微量蛋白质，但用一般方法检查不出来，若尿中证明含有蛋白质时称为蛋白尿。见于泌尿系统炎症及热性病。尿中血液尿中含有血液或血红蛋白，称为血尿。尿液中含有多量红细胞时，见于肾及尿路出血；含多量血红蛋白，见于新生幼畜溶血病、犊牛水中毒、焦虫病等。尿常规检查内容尿液检验兽医临床诊断技术讲稿尿沉渣检验尿沉渣检查，在临床上很重要，故一般住院病畜应作此项检查。检查时应特别注意识别尿液中各种有形成分，各种上皮细胞、脓球、细菌及无机盐等。尿常规检查内容尿中有机沉渣检查无机盐沉渣检查尿液检验兽医临床诊断技术讲稿有机沉渣检查红细胞：尿中出现红细胞，是泌尿系统出血的特征。红细胞的形态，在新鲜尿液呈圆形淡红绿色；酸性尿中，则红细胞皱缩，边缘呈锯齿状；碱性尿中，红细胞膨胀或破坏，呈现阴影。白细胞：正常尿中仅有白细胞，尿液中最常见的是中性白细胞，而淋巴细胞及单核细胞均少见。尿中出现白细胞是肾、膀胱的炎症。在新鲜尿中其形态比红细胞大有核，易识别；酸性尿中其形态比较完整，加稀醋酸后其核更明显；碱性尿中则膨胀而清晰。肾上皮细胞：比白细胞约大1/3，呈圆形，有一个较大的核，细胞质内有小颗粒，易识别。若尿中出现多量肾上皮细胞时，是肾实质性炎症。尾状上皮细胞：呈梨形或梭形，比白细胞