10毛细管电泳

毛细管电泳的基本原理和主要应用BasicPrinciplesandMainApplicationofCapillaryElectrophoresis0前言1基本原理2主要应用3前景与展望TheendThankyou•高效毛细管电泳（HPCE），又称毛细管电泳（CE）•1981年，Jorgenson和Luckas，用75μm内径石英毛细管进行电泳分析，柱效高达40万/m•是经典电泳技术和现代微柱分离的有机结合，是凝胶电泳技术的发展，是高效液相色谱分析的补充•可以分析的成分小至有机离子、大至生物大分子如蛋白质、核酸等，分离效率高，分析速度快，样品用量少，容易实现自动化，已逐步成为生物样品分析中的一种常用手段。0前言返回1基本原理•以高压电场为驱动力，可达30KV•以石英毛细管为分离通道，常用直径为20~70μm、有效长度为50~75cm•依据样品中各组分之间的电泳淌度和分配系数的差异而实现分离基本原理电泳1基本原理电渗流（EOF）迁移速度等于电泳和电渗流的矢量和1基本原理•毛细管区带电泳（CapillaryZoneElectrophoresis，CZE）•毛细管凝胶电泳（CapillaryGelElectrophoresis，CGE）•毛细管胶束电动色谱（MicellarElectrokineticCapillaryChromatography，MECC）•毛细管等电聚焦电泳（CapillaryIsoelectricFocusing，CIEF）•毛细管等速电泳（CapillaryIsotachophoresis，CITP）•毛细管电色谱（CapillaryElectrochromatography，CEC）•非水毛细管电泳、亲和毛细管电泳、免疫毛细管电泳等改良的形式•以毛细管电泳为核心技术、以芯片为操作平台的芯片毛细管电泳（chip-CE）•1992年美国的Mathies等首先提出阵列毛细管电泳新方法，将毛细管电泳和板凝胶电泳的优势相结合，大大提高了测样的效率。分离模式1基本原理•两项重要技术改进•CE比HPLC有更高的分离能力•CE的不足之处特点电压一般为0～30KV1基本原理分离柱不需要涂敷任何固定液使用紫外或激光诱导荧光检测器，可检测到10-19～10-21mol/l仪器装置返回2主要应用•对蛋白质表达模式（或蛋白质组成）的研究和对蛋白质功能模式的研究•用于蛋白质肽图的构建和蛋白质鉴定、物化常数分析、蛋白质结构动力学研究、样品定性、定量检测和微量制备等•应用较为广泛的有毛细管区带电泳（CZE）、毛细管等电聚焦（CIEF）和毛细管电色谱（CEC）蛋白质的分离分析2主要应用DNA分析•包括碱基、核苷、核苷酸、寡核苷酸、引物、探针、单链DNA、双链DNA（DNA片段、PCR产物）分析及DNA序列测定基因突变分析、核酸定量与基因表达分析等•CZE和MECC通常用来分离碱基、核苷酸等；CGE则用于较大的寡核苷酸、ssDNA、dsDNA和DNA序列分析•使用纳米粒子填充的毛细管电泳（NFCE）分离长双链DNA2主要应用手性分离•合成获得单一手性化合物相当困难•市售和临床使用的化学合成药物75%以上为外消旋体，对映异构体功能不同，如R-反应停是安眠药，S-式致胎儿畸形•检测分析也相当困难•加入不同的手性试剂来实行对映体的分离•常用手性试剂2主要应用其他应用•环境监测•单分子检测•毛细管电泳芯片返回3前景与展望•微型化（芯片化）、集成化、自动化•仪器联用，如CE-MS•阵列毛细管电泳•交叉学科返回