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1真菌毒素检测产品介绍2主要内容常见真菌毒素检测技术原理及特点2快灵真菌毒素检测产品介绍3霉菌毒素现场快速检测操作注意问题4真菌毒素简介13由真菌产生的具有毒性的次生代谢产物,广泛污染农作物、食品及饲料等植物性产品。迄今发现已有300种真菌毒素,其中具有代表性的真菌毒素有黄曲霉毒素(AFT)、赭曲霉毒素A(OTA)、麦角生物碱、单端孢霉烯族毒素(如DON)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、伏马毒素(FB)、展青霉素(PAT)、烟曲霉震颤素(FT)、杂色曲霉菌素(ST)等。AspergillusClavicepsPenicilliumFusarium一、真菌毒素简介4真菌毒素中毒症及其特点定义人、畜禽食用被真菌毒素污染的食品或饲料后发生的中毒现象,称为真菌毒素中毒症,包括肝脏毒性、肾脏毒性、神经毒性、光过敏性皮炎毒性以及其他毒性等。真菌毒素中毒症的特点中毒与某些食物有联系中毒发生有季节性和地区性机体对真菌毒素不能产生抗体,也不能免疫5•中世纪的欧洲麦角中毒•1913年俄罗斯东西伯利亚食物中毒•中国50年代甘薯黑斑病中毒华南的霉甘蔗中毒长江流域的赤霉病中毒•1960年英国火鸡X病•1974年印度西部流行肝炎•2005年5月美国肯尼亚黄曲霉素污染事件真菌毒素中毒大事件6粮食中主要真菌毒素及其特点黄曲霉毒素(Aflatoxins,AFT)脱氧雪腐镰刀菌烯(Deoxynivalenol,DON)玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN(F-2))•来源由黄曲霉、寄生曲霉等产生的代谢产物。•分布存在于土壤、动植物、各种坚果、谷物、调味品、奶制品、食用油等制品中。一般在热带和亚热带地区食品中黄曲霉毒素的检出率比较高2020/1/297黄曲霉毒素(AFT)水果肉类蔬菜粮食中主要真菌毒素及其特点8紫外线对低浓度黄曲霉毒素有一定的破坏性.pH9-10的强碱溶液中分解迅速易溶于油,甲醇,丙酮和氯仿等有机溶剂理化性质相对分质量312-346粮食中主要真菌毒素及其特点黄曲霉毒素(AFT)产毒条件:毒性温度范围12~42℃,最适产毒温度33℃。最适Aw值为0.93~0.98粮食水分为18.5%菌体形成孢子黄曲霉毒素(AFT)粮食中主要真菌毒素及其特点10强烈的致癌物质,能使人体或动物的免疫功能丧失,诱导畸形、癌症的发生。急性中毒症状主要表现为呕吐、厌食、发热、黄疸和腹水等肝炎症状。“三致”(致突变、致癌、致畸性)危害性对人及动物的肝脏组织有很强的毒害作用,严重时可导致肝癌,甚至死亡。危害:粮食中主要真菌毒素及其特点黄曲霉毒素(AFT)11各国食品饲料中黄曲霉毒素允许量标准品名中国标准μg/kg(ppb)美国标准μg/kg(ppb)欧盟μg/kg(ppb)玉米、花生、坚果和干果(核桃、杏仁)≤20≤20≤2、4、5、8、10、15玉米及花生仁制品(按原料折算)≤20≤20≤2、4、5、8、10、大米、其它食用油(香油、菜子油、)≤10≤10≤2、4其它粮食(麦类、面粉、薯干)、发酵食品(酱油)≤5≤5不得检出牛乳及其制品≤0.5≤0.5≤0.05粮食中主要真菌毒素及其特点黄曲霉毒素(AFT)脱氧雪腐镰刀菌烯醇镰刀菌属的二级代谢产物。大多在低温、潮湿和收割季节时在谷物庄稼中慢慢生长。一般在大麦、小麦、玉米、燕麦中含有较高的浓度。具有很高的细胞毒素及免疫抑制性质,特别是对免疫功能具有明显的影响。当人摄入了被DON污染的食物后,会导致厌食、呕吐、腹泻、发烧、站立不稳、反应迟钝等急性中毒症状,严重时损害造血系统造成死亡。大多数国家一般要求动物饲料中的DON不得超过2mg/kg,而人类消费品中的含量不得超过1mg/kg。12粮食中主要真菌毒素及其特点玉米赤霉烯酮即F—2雌性发情毒素,从有赤霉病的玉米中分离得到。产毒菌主要是镰刀菌属(Fusarium)的菌株,主要污染玉米、小麦、大米、大麦、小米和燕麦等谷物。其中玉米的阳性检出率为45%。,具有雌激素作用,主要作用于生殖系统,可使家畜,家禽和实验小鼠产生雌性激素亢进症。妊娠期的动物(包括人)食用含玉米赤霉烯酮的食物可引起流产、死胎和畸胎。13粮食中主要真菌毒素及其特点14二、常见真菌毒素检测技术原理及特点侧流式免疫吸附分析原理15与常规诊断方法相比优点缺点快速:全部检测过程仅需5-10分钟。简便:不需其它任何仪器设备,操作也极其简单,无需专业人员,携带方便,可随时随地进行。廉价:单个测试条成本极低可单份检测:对标本既能成批检测,又可单份检测,可立刻拿到结果,不必等待。稳定性好:金标试剂稳定,可长期保存。检测标本种类多定量问题灵敏度问题三、快灵真菌毒素检测产品介绍黄曲霉毒素B1快速检测卡呕吐毒素快速检测卡玉米赤霉烯酮快速检测卡171.胶体金快速检测卡黄曲霉毒素B1快速检测卡直接提取法•灵敏度:≧5ppb•检测样本:饲料、谷物,牛奶•前处理步骤:取样,提取,离心,取上清,调节PH,上样检测181.胶体金快检测卡产品优点:简便快速:样品处理时间非常短,5分钟出结果应用范围广:可处理多种复杂谷物及饲料样本携带方便,适用基层:无需复杂设备和专业知识,操作人员5min即可学会,即学即用可实现半定量检测:可以通过调整稀释倍数准确地检测多个浓度梯度191.胶体金快检测卡黄曲霉毒素B1快速检测卡残留限量(ppb)51020304050加入提取液体积(ml)00.51.52.53.54.5灵敏度:≧100ppb(梯度检测)检测样本:粮食谷物前处理步骤:1.取5g以上有代表性的谷物样品粉碎(过20目筛),准确称取1g均匀粉碎试样加入到离心管中。2.向离心管中准确加入稀释液(稀释液加量参照稀释液表),将瓶塞盖紧密封,用力振荡5分钟,4000rpm离心1分钟得上清液。201.胶体金快检测卡呕吐毒素快速检测卡优点局限性适用单位1.简便快速,5min出结果2.样品处理时间非常短3.应用范围广,可处理多种复杂样本。4.对样本基质进行多倍稀释,大大降低了杂质对检测结果的干扰。5.携带方便,适用基层6.无需复杂设备和专业知识,操作人员5min即可学会,即学即用7.可以通过调整稀释倍数准确地检测多个浓度梯度,可实现半定量检测定性检测,只判断是否超标,不给具体数据1.饲料生产加工企业2.粮食谷物粗加工企业3.工商质监部门用于快速检测4.畜禽养殖户自查5.其他需要检测真菌毒素的行业211.胶体金快检测卡呕吐毒素快速检测卡灵敏度:≧60ppb(梯度检测)检测样本:粮食谷物前处理步骤:1.取5g以上有代表性的样品粉碎(过20目筛),准确称取2g均匀粉碎试样加入到离心管中。2.向离心管中准确加入2ml稀释液1和8mL乙酸乙酯,将瓶塞盖紧密封,用力振荡5分钟(如上清不足3ml,4000rpm离心1分钟)。3.用吸管取3mL上清液到小玻璃杯中,吹干滤液,参照表格,根据残留限量量取相应体积稀释液2复溶杯底固体。此溶解液即为检测液。221.胶体金快检测卡玉米赤霉烯酮快速检测卡优点局限性适用单位1.检测样本范围非常广,2.整个操作过程所使用的试剂均无毒无害3.可以通过调整稀释倍数准确地检测多个浓度梯度,可实现半定量检测4.操作较简单,一般操作人员半小时即可学会,即学即用5.室温保存,保存期长1.操作较复杂,需要专业或经过培训人员操作2.操作时间较长3.操作步骤较繁琐4.一张检测条只能测一个样本1.饲料生产加工企业2.粮食谷物粗加工企业3.畜禽养殖户自查4.其他需要检测真菌毒素的行业2020/1/2923玉米赤霉烯酮快速检测卡1.胶体金快检测卡三、快灵真菌毒素检测产品介绍242.酶联免疫试剂盒黄曲霉毒素B1检测试剂盒呕吐毒素检测试剂盒玉米赤霉烯酮检测试剂盒灵敏度:0.025ppb线性区间:(0.025-2.025)ppb可检样本:(玉米、谷物、饲料)等回收率:80%-120%板内CV及板间CV:板内CV8%,板间CV15%.线性系数:R²≥0.98252.酶联免疫试剂盒黄曲霉毒素检测试剂盒灵敏度:0.15ppb线性区间:(0.15-12.15)ppb可检样本:玉米、谷物、饲料等回收率:80%-120%板内CV及板间CV:板内CV8%,板间CV15%.线性系数:R²≥0.98262.酶联免疫试剂盒玉米赤霉烯酮检测试剂盒灵敏度:1ppb线性区间:(1-81)ppb可检样本:玉米、谷物、饲料等回收率:80%-120%板内CV及板间CV:板内CV8%,板间CV15%.线性系数:R²≥0.98272.酶联免疫试剂盒呕吐毒素检测试剂盒四、霉菌毒素现场检测操作注意问题1.取样要均一;2.样品称重要精确到小数点后两位;3.样品物料和液体充分混合接触,离心管180度翻转震荡即可;4.时间的计算应从物料充分浸润到液体中后开始计算,应≧5分钟,但不超过10分钟;5.移取离心管中的上清液时,请尽量用专用移液器(建议配置移液枪)移取,以减小误差;6.移取后的液体请用10ml小烧杯放置,因为是烧杯太大不利于下一步的精确操作;7.烘干萃取剂时,尽量不要把液体吹出烧杯外面来,以杯底边沿看不到液体流动(油液除外)为标准;8.应尽量使用专用移液器设备移取稀释液稀释烘干并冷却后的烧杯中的残留物,然后用配带的专用滴管尽量将杯底及烧杯壁固定物尽可能多的溶解;9.滴管移取烧杯中检测液时,请一次性饱满吸入,中间不留空隙和气泡。2829Thankyou!
本文标题:真菌毒素
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