03药物分析方法的设计和验证

第三章药物分析方法的设计和验证第一节药物分析方法的分类和设计一、分类按取样量分常量分析（0.1~1g或10~100mL）微量分析半微量(10~100mg或1~10mL)微量(0.1~10mg或10uL~1mL)超微量(0.1mg或10uL)重量分析法滴定或容量分析法化学分析法（mC+nR—CmRn）仪器分析法光谱分析色谱分析电化学分析热分析吸收(UV，IR，AA，NMR)发射(荧光,火焰)质谱旋光折光-----LC，GC，TLC，CE-----电位、电流----TGA，DTA，DSC按测定原理与操作方法分（一）应与被测组分的含量相适应二、分析方法选择原则常量组分容量法重量法原料药含量测定干燥失重、灼炽残渣检查Rd千分之几微量组分仪器分析法制剂含量溶出度或均匀度检查Rd百分之几实例:配位滴定法测定复方氢氧化铝片中铝、镁问题：还可选用哪种方法？（二）应考虑被测组分性质被测组分性质测定方法常用原则：⑴纯度高样品-----容量分析法①酸或碱性------酸碱滴定法②氧化性或还原性----氧化还原滴定法③金属阳离子-----配位滴定法④卤素阴离子----银量法⑵复杂样品----色谱法①有一定挥发性-----GC②非挥发性------LC，TLC1、非水酸量法------------弱酸性药物2、紫外分光光度法----药物结构中有共轭体系且吸光系数大3、三氯化铁比色法------药物结构中有酚羟基结构4、HPLC-UV-----成分较多且相互影响且紫外吸收的药物5、TLC------------药物中杂质限度检查苯溴马隆实例分析小结：最佳方法------测定的目的与对象原料药含量测定----非水酸量法制剂含量或溶出度检查----UV杂质检查或鉴别----TLC赋形剂干扰-----LC（三）应与测定的具体要求相适应1、成品分析或仲裁分析-----------准确度要求高2、中间体分析或环境分析--------快速简便3、微量分析或痕量分析-----------灵敏度要求高（四）应考虑干扰物质的影响干扰物存在-------选择分离方法（TLC、HPLC）结论结构性质含量干扰物现有设备测定技术测定要求（准确度、专属性、灵敏度、时效）测定成本合适测定方法方法选择考虑因素第二节药物分析方法的验证准确度(accuracy)精密度(precision)（重复性、中间精密度、重现性）专属性(specificity)检测限(limitofdetection,LOD)定量限(limitofquantitation,LOQ)线性(linearity)范围(quantitationrange)耐用性(ruggedness)验证内容一、误差及其分类（一）绝对误差和相对误差（二）系统误差和随机误差1、系统误差（1）方法误差（2）仪器和试剂误差（3）操作误差2、随机误差-----多次平行测定解决方法对照或空白试验校正仪器3、测量结果检验-----方差分析（t检验、G检验、F检验）（一）准确度（Accuracy)1、定义表示分析结果与真实值的接近程度。用绝对误差或相对误差表示.2、评价方法加样回收率（相对误差）衡量%100)(加样值测定值回收值R一、准确度和精密度（二）精密度（precision)1、定义：平行测量的各次测量值（实验值）之间互相接近程度。2、评价方法（1）偏差（deviation)xxdi（2）平均偏差nxxniid1（5）相对标准偏差（RSDorCV）%100xSRSD%100xddR（3）相对平均偏差（Relativeaveragedeviation)12nxxSi（4）标准偏差（standarddeviation)（三）重复性、中间精密度、重现性（1）重复性同室同人同仪器对同样品的某物理量重复测定的结果相互接近程度。（2）中间精密度同室不同人、不同设备、不同时间对同一样品的某一物理量重复测定结果的精密度。（3）重现性不同人不同室不同仪器对同样品的某物理量测定结果的精密度。三、准确度和精确度的关系精密度是准确度的保证。测量值的准确度表示测量结果的正确性；测量值的精密度表示测量结果的重现性、重复性。第三节药物分析中的有效数字一、有效数字（一）定义：分析中，实际能测量到的数字。根据测定方法和使用仪器的准确程度来确定，只有最后一位欠准，欠准度为±1。2、有效位数确定（1）0在数据中位置不同，作用不同。例：1.002---4位，0.0980---3位，2.0×103---2位例:电子分析天平读数0.3526滴定管体积读数22.25例：9.48----4位（4）若数值的首位大于8，有效位数可多取一位。（3）pH、logK等数值的有效位数取决于小数部分数字的位数。例2.53÷3+11.352÷2------3和2（2）数据中的倍数或分数，可视为无限多位有效数字例pH=3.02-------2位二、运算规则（一）加减法以小数点后位数最少的数据为准（误差最大）。8.513.04.11.50281.045.11.50（二）乘除法以有效数字最少的那个测量值为准（相对误差最大）。例：0.231×20.24÷3.2=14.9618≈15三、药物含量测定结果的表达法测量结果的有效数字的保留取决于仪器的精确度和要求。一般滴定和重量分析取4位有效数字；仪器分析取3位有效数字。本章思考题1、P47思考题22、P47习题2，33、分析方法验证哪些内容？