11药物制剂分析2(第二军医大学)

1药物制剂分析（二）AnalysisofPharmaceuticalPreparations2【注射液的装量】【注射用无菌粉末的装量差异】【可见异物】【无菌】【热原】或【细菌内毒素】【不溶性微粒】指药物制成的供注入体内的灭菌溶液、乳状液或混悬液，以及供临用前配成溶液或混悬液的无菌粉末或浓溶液。注射剂大都血管内直接给药，部分肌肉注射。安全性要求与检查必须特别严格。注射剂3不溶性微粒检查在可见异物检查符合规定后，用以检查静脉滴注用注射液（装量为100ml以上者）中不溶性微粒。除另有规定外，每1ml中含有10μm以上的微粒不得超过20粒，含25μm的微粒不得超过2粒。显微计数法、光阻法4热原（pyrogen）检查法热原活的微生物的代谢产物或是死亡的微生物尸体，是微生物的一种内毒素，注射后会引起体温异常升高，严重的还会出现昏迷、虚脱，甚至有生命危险。热原检查法本法系将一定剂量的供试品，静脉注入家兔体内，在规定时间内，观察家兔体温升高的情况，以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。5检查法取适用的家兔3只，测定其正常体温后15分钟以内，自耳静脉缓缓注入规定剂量并温热至约38℃的供试品溶液，然后每隔30分钟按前法测量其体温1次，共测6次，以6次体温中最高的一次减去正常体温，即为该兔体温的升高温度(℃)。如3只家兔中有1只体温升高0.6℃或0.6℃以上，或3只家兔体温升高均低于0.6℃，但体温升高的总和达1.4℃或1.4℃以上，应另取5只家兔复试。结果判断61、注射剂中主药含量大，附加成分不干扰，可直接测定葡萄糖酸钙的原料药和注射剂：络合滴定法；2、主药遇热不稳定而易分解，常采用有机溶剂提取后测定3、主药含量较少，采用灵敏度高的方法－－排除附加剂干扰注射剂含量测定7注射剂的溶剂包括:水性溶剂、植物油及其他非水性溶剂等。最常用的水性溶剂为注射用水，亦可用0.9%氯化钠溶液或其他适宜的水溶液。非水溶剂有乙醇、丙二醇、聚乙二醇的水溶液。常用的油溶剂为注射用大豆油。其质量应符合大豆油(供注射用)的标准。8附加剂一般有渗透压调节剂、pH值调节剂、增溶剂、抗氧剂、抑菌剂等。抗氧剂有亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠等。常用的抑菌剂及其浓度(g/ml)为苯酚0.5%、甲酚0.3%、三氯叔丁醇0.5%等。抑菌剂用量应能抑制注射液内微生物的生长。加有抑菌剂的注射液，仍应用适宜的方法灭菌。附加剂9排除附加剂干扰抗氧剂（亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、维生素C等）NaCl（等渗溶液）稳定剂(乳酸钙或其他钙盐)溶剂水溶剂油10抗氧剂具有还原性药物的注射剂中常加抗氧剂。对氧化还原滴定有干扰。NaHSO3+CH3COCH3(CH3)2C(OH)-SO3Na碘量法测定维生素C注射液Na2S2O5+H2O→2NaHSO3NaHSO3+HCHOHO-CH2-SO3Na碘量法测定安乃近注射液。但是，甲醛也具有还原性。氧化电位高时不宜。亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠加入丙酮、或甲醛消除。1、加掩蔽剂11【规格】(1)1ml∶0.25g(2)2ml∶0.5g【含量测定】精密量取本品10ml，置100ml量瓶中，加乙醇80ml，再加水稀释至刻度，摇匀，立即精密量取10ml，置锥形瓶中，加乙醇2ml、水6.5ml与甲醛溶液0.5ml，放置1分钟，加盐酸溶液(9→1000)1.0ml，摇匀，用碘滴定液(0.1mol/L)滴定（控制滴定速度为每分钟3～5ml），至溶液所显的淡黄色在30秒钟内不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于17.57mg的C13H16N3NaO4S·H2O。安乃近注射液MetamizoleSodiumInjection122、加酸分解消除亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠均可被酸分解，加热逸出SO2Na2S2O3+2HCl→2NaCl+H2S2O3(加热)NaHSO3+HCl→NaCl+H2SO3(加热)SO2↑+H2OSO2↑+H2O13盐酸普鲁卡因胺注射液ProcainamideHydrochlorideInjection本品为盐酸普鲁卡因胺的灭菌水溶液。【规格】(1)1ml∶0.1g(2)2ml∶0.2g(3)5ml∶0.5g(4)10ml∶1g【含量测定】精密量取本品5ml，加水40ml与盐酸溶液(1→2)10ml，迅速煮沸，立即冷却至室温，照永停滴定法(附录ⅦA)，用亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)相当于27.18mg的C13H21N3O·HCl。143、加弱氧化剂氧化消除过氧化氢和硝酸，将抗氧剂(亚硫酸盐等)氧化，而不氧化被测药物，不消耗滴定液。Na2SO3+H2O2→Na2SO4+H2ONa2SO3+2HNO3→Na2SO4+2NO2+H2O15盐酸氯丙嗪注射液本品为盐酸氯丙嗪的灭菌水溶液。本品可加适量的维生素C(0.01mol/LHCl中UV最大吸收243nm)。【含量测定】避光操作。精密量取本品适量(约相当于盐酸氯丙嗪50mg)，置250ml量瓶中，加盐酸溶液(9→1000)至刻度，摇匀；精密量取10ml，置50ml量瓶中，加盐酸溶液(9→1000)至刻度，摇匀，照分光光度法(附录ⅣA)，在306nm的波长处测定吸收度，按C17H19ClN2S·HCl的吸收系数(E)为115计算，即得。【规格】(1)1ml∶10mg(2)1ml∶25mg(3)2ml∶50mg4、UV吸收谱差消除干扰243254306氯丙嗪维生素C盐酸氯丙嗪注射液的含量测定17甲萘氢醌二磷酸酯钠注射液(USP)本品为灭菌水溶液。含苯甲酸、或苯酚抑菌剂，及焦亚硫酸钠。5.萃取分离后UV测定【含量测定】精密移取本品适量，用0.1mol/L盐酸稀释配制为每1ml含甲萘氢醌二磷酸酯钠50g的溶液，取上述溶液10ml置于60ml分液漏斗中，用15ml三氯甲烷提取三次，弃去有机层，取水层离心分离后作为供试液，于290nm处测定其吸收值A。另取甲萘氢醌二磷酸酯钠对照品同法测定，按计算含量，即得。18溶剂油脂溶性药物(甾体激素等)常配制成油溶液。溶剂油对以水为溶剂的分析方法可产生影响：溶液浑浊，影响UV测定、容量滴定、HPLC测定。1、有机溶剂稀释法药物标示量高，稀释倍数大或测定溶剂对油溶解性好，溶剂油对测定无干扰。19维生素E注射液VitaminEInjection本品为维生素E的灭菌油溶液。【含量测定】精密量取本品2ml，置棕色具塞锥形瓶中，照维生素E项下的方法，精密加入内标溶液50ml，密塞，摇匀，取1～3μl注入气相色谱仪，并依法测定校正因子，计算，即得。【规格】1ml∶50mg202、溶剂提取-HPLC法例：丙酸睾酮注射液TestosteronePropionateInjection本品为丙酸睾酮的灭菌油溶液。【含量测定】HPLC法测定法用内容量移液管精密量取本品适量(约相当于丙酸睾酮50mg)，置50ml量瓶中，用乙醚分数次洗涤移液管内壁，洗液并入量瓶中，加乙醚稀释至刻度，摇匀；精密量取5ml置具塞离心管中，在温水浴内使乙醚挥散；用甲醇振摇提取4次(5，5，5，3ml)，每次振摇10分钟后离心15分钟，并用滴管将甲醇液移置25ml量瓶中，合并提取液，精密加入内标溶液5ml,用甲醇稀释至刻度，摇匀，取5～10μl注入液相色谱仪，测定，即得。21容量分析法：标示量%=VTFV样标示量（g/ml)×100%紫外分光光度法：标示量%=A/E稀释倍数100标示量（g/ml)×100%%100(g/ml)(ml)(g)%标示量供试量供试体积中测得量注射剂标示量注射剂含量测定结果计算22例：马来酸氯苯那敏注射液的含量测定精密量取本品2.5mL（标示量1ml:10mg），置500mL量瓶中，加盐酸溶液稀释至刻度；精密吸取25ml，置50ml量瓶中，加盐酸溶液稀释至刻度。取稀释液在264nm处测得吸收度为0.536，按吸收系数E1%1cm为217，计算其百分标示量。23复方制剂分析Assayofcompoundpreparations复方制剂的意义增强某些药物的作用某几种药物有协同作用降低某些成分的毒副作用……复方制剂分析的特点成分更复杂含量差异悬殊……24复方制剂的分类各国药典收载的复方制剂复方解热镇痛类复方甾体激素类复方维生素类复方磺胺类……25方法选择原则是否有特殊的、不受干扰的性质由简到繁（不分离→分离测定、同时→分别测定）先准确后快速新药：HPLC优先原则医院制剂：UV优先原则26复方磺胺甲噁唑片是由磺胺甲噁唑（SMZ）、甲氧苄啶（TMP）两种有效成分组成。处方：磺胺甲噁唑400g甲氧苄啶80g———————————制成1000片ChP（2000版）:双波长分光光度法ChP（2005、2010版）:高效液相色谱法复方制剂分析示例27ChP（2000版）:双波长分光光度法原理：选择二个测定波长λ1与λ2干扰组分a在这两个波长处有等吸收待测组分b在这两个波长处有显著的△A△A与b浓度成正比，与a浓度无关复方磺胺甲噁唑片的含量测定28测定SMZ时，把TMP作为干扰成分SMZλmax=257nmTMPA257nm=A304nm测定TMP时，把SMZ作为干扰成分TMPλ=239nm（有较大紫外吸收）SMZA239nm=A295nm29复方左炔诺孕酮片本品每片中含左炔诺孕酮(C21H28O2)应为0.135～0.1725mg，含炔雌醇(C20H24O2)应为27.0～34.5μg。【处方】左炔诺孕酮150mg炔雌醇30mg───────────────制成1000片ChP2005年版—分光光度法ChP2010年版---HPLC法30ChP2005年版---分光光度法【含量测定】对照品溶液的制备精密称取左炔诺孕酮对照品15mg，…摇匀(每1ml中含左炔诺孕酮75μg、炔雌醇15μg)。供试品溶液的制备取本品5片，置分液漏斗中，加水6ml，振摇使崩解，用氯仿振摇提取5～6次，每次约7～8ml，提取液经同一棉花滤入50ml量瓶中,加氯仿稀释至刻度,摇匀即得。左炔诺孕酮精密量取供试品溶液10ml，置50ml具塞锥形瓶中，在水浴上蒸干，精密加乙醇5ml使溶解；另精密量取对照品溶液2ml，置另一具塞锥形瓶中，加乙醇3ml。在上述各锥形瓶中分别精密加碱性三硝基苯酚溶液4ml，密塞，在暗处放置40分钟,照分光光度法(附录ⅣＢ)，在490nm的波长处分别测定吸收度，计算，即得。炔雌醇….同上，上述各锥形瓶置冰浴上冷却30秒后，各精密加硫酸6ml，随加随振摇，加完继续冷却30秒钟，取出,在室温放置20分钟，照分光光度法(附录ⅣＢ),在530nm波长处分别测定吸收度，计算，即得。31ChP2010年版—HPLC法【含量测定】照高效液相色谱法（附录ⅤD）测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水（60:40）为流动相；检测波长为220nm。理论板数按左炔诺孕酮峰计算应不低于5000，左炔诺孕酮峰与炔雌醇峰的分离度应不小于2.5。测定法取本品10片，分别置10ml量瓶中，加流动相适量，超声处理40min并不时振摇使左炔诺孕与炔雌醇溶解，放冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液50μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取炔诺孕酮和炔雌醇对照品，精密称定，加乙腈，超声处理使溶解，放冷，并定量稀释制成每1ml中含左炔诺孕酮0.75mg和炔雌醇0.15mg的溶液，精密量取2ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，同法测定。按外标法以峰面积计算每片的含量，求出平均标示量，即得。32思考题1、注射剂常见附加成分的干扰及其排除方法？2、复方制剂分析的特点？33HomeworkmetronidazoleinjectionAssay:Diluteanaccuratelymeasuredquantitywithhydrochloricacidsolution(9→100