保健食品重金属的检测

保健食品重金属的检测食品及保健品中重金属及有害元素检测法*GB/T5009.11-2003食品中总砷及无机砷的测定*GB5009.12-2010食品中铅的测定GB/T5009.15-2003食品中镉的测定*GB/T5009.17-2003食品中总汞及无机汞的测定GB/T5009.13-2003食品中铜的测定GB/T5009.14-2003食品中锌的测定GB/T5009.90-2003食品中铁、镁、锰的测定GB/T5009.92-2003食品中钙的测定GB/T5009.123-2003食品中铬的测定GB16740-1997保健（功能）食品通用标准SN/T0448-2011进出口食品中砷、汞、铅、镉的检测方法电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法SN/T2056-2008进出口茶叶中铅、砷、镉、铜、铁含量的测定电感耦合等离子体原子发射光谱法等等……GB16740-1997保健（功能）食品通用标准中规定一般产品铅≤0.5mg/kg一般胶囊产品1.5;以藻类和茶类为原料的固体饮料和胶囊产品2.0砷≤0.3mg/kg以藻类和茶类为原料的固体饮料和所有胶囊产品1.0。汞——以藻类和茶类为原料的固休饮料和所有胶囊产品0.3消解：湿法、干法、微波、回流提取(把金属元素消解成离子状态于消解液中）2019/8/17↓定容（稀释倍数由待测物的限度定）↓仪器检测:ICP-MS，原子吸收、原子荧光、测汞仪前处理方法主要有3种：1.微波消解法（推荐使用）2.湿式消解法3.干灰化法1.微波消解法称样：固体0.5g左右，液体1.0g左右，胶囊需连壳一块打粉一起称样；液体中含酒精的需先100℃蒸至近干后再加硝酸，防止爆炸；如果是油脂类样品，只能取0.2g；称取样品后加入5～8ml硝酸，1ml双氧水(可加可不加)后放置于电热板上100℃加热预消解30min，放冷后置于微波消解仪内消解。微波消解升温程序（根据不同的微波消解仪可以改变程序，只要最后达到190℃，保持10min以上就可以消解完全，前面的程序升温是使反应放缓、可控，使反应不至于太剧烈）步骤目标温度升温时间，min保持时间，min11201052160553190520推荐仪器：CEMMARS（40位）优点：操作简单，一次性可以消解40个罐子，是大批量实验时首选缺点：称样量少（罐子体积55ml），固体最多0.5g，液体1g屹尧EXCEL（10位）优点：价格便宜，称样量大（罐子体积100ml），固体可到1g缺点：一次最多消解10个罐子，操作比较麻烦消解完冷却至80℃以下后取出，放置电热板上赶酸，120℃（有做砷、汞）150℃（不做砷、汞），直到近干（大约0.5ml左右），不得赶干。加水定容至25ml容量瓶中。如有沉淀，用螺旋滤头过滤后装入塑料储液瓶中待测。2.湿式消解法铅：固体：1～2g，液体5～10g，置50ml或100ml锥形瓶中，样品加20ml硝酸+2ml高氯酸，加热沸腾消解直至最后1ml左右，再用水定容至25ml量瓶。如有沉淀，用螺旋滤头过滤后装入塑料储液瓶中待测。汞：固体：1～2g，液体5～10g，样品加20ml硝酸至长颈锥形瓶中，上部放小漏斗回流，微沸半小时后拿去漏斗去酸至1ml左右，用水定容至25ml容量瓶。如有沉淀，用螺旋滤头过滤后装入塑料储液瓶中待测。砷：固体：1～2g，液体5～10g，加20ml硝酸+1.5ml硫酸+2ml高氯酸加热沸腾（≥220℃时才能把全部的有机砷转化为无机砷），至大约1ml或无沸腾冒白烟（硫酸）马上拿起，用水定容至25ml量瓶中。如有沉淀，用螺旋滤头过滤后装入塑料储液瓶中待测。3.干灰化法铅：样品1g置于坩埚中，加热炭化至无烟，移至马弗炉500℃灰化8h，冷却后用0.5mol/L硝酸定容至25ml量瓶中。砷：样品1g置于坩埚中，加10ml150g/L硝酸镁混匀，低热蒸干，加1g氧化镁覆盖，加热炭化至无烟，移至马弗炉550℃灰化4h，冷却后用10ml（1+1)盐酸溶解，用（1+9）硫酸定容至25ml量瓶中。上机测定1.电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS)可用于绝大多数金属元素分析检测限低同时完成多元素的测定，具有极高的检测效率目前痕量元素分析领域中最先进的方法保健食品方法上没有把此方法列入，但2010版中国药典已把此方法列入，可以参考药典实验，但出具报告需做方法偏离。标准曲线配置：（供参考）（标准曲线至少5个点）曲线可以根据需要配置浓度，如要做其他元素可以把其标准液也一起配置成标准曲线。曲线的r≥0.995才可以使用测定样品时如样品含量超过标准曲线最高点样液需用0.5mol/L硝酸稀释后重新测定。内标为Bi和Geng/ml标1标2标3标4标5标6铅248102050砷12451025汞0.40.81.62.04.010.02.石墨炉原子吸收光谱法（铅、铬、镉）样液直接上机测量，如果峰形不好（双峰、断峰、不成峰）需基体改进剂，其作用：往石墨炉或样品溶液中加入一种或几种化学物质，使基体形成易挥发的化合物，在原子化阶段之前驱除掉；或者降低待测元素的挥发性，以防止灰化过程中的损失。注意：对照品和供试品保持一致常用1%磷酸二氢铵+0.2%硝酸镁，进样样品20μl,基体改进剂5μl。标准曲线配置：机器或手动稀释曲线，曲线最少5个点，曲线线性范围：铅（ng/ml)：2～100铬（ng/ml)：5～100镉（ng/ml)：0.3～6如果配置的浓度太低，吸光度就太低，太高的话曲线就会弯曲，不成直线。PE-AA8003.火焰原子吸收分光光度法（铁、镁、锰、钾、钠、铜、钙）一次只能测一种元素，试液直接上机测定，稀释液（比如钙是用氧化镧，有的是用盐酸等等）根据标准配置，曲线的浓度也根据标准配置。（一般是几十ng/ml～几μg/ml）4冷原子吸收法（汞）样液直接上机，需配置氯化亚锡还原剂，盐酸载流（根据仪器的不同按仪器推荐的浓度配置）标准曲线浓度0.3～6ng/ml，曲线浓度太高容易污染仪器。5氢化物原子荧光光度法（砷、汞）样品和标准曲线需加入硫脲+抗坏血酸反应半小时后迅速上原子荧光测量，还原剂为硼氢化钾+氢氧化钾溶液。载流为盐酸。标准曲线浓度0.5～60ng/ml。空白试验重金属测定是痕量分析，仪器灵敏度很高，极易受容器、试剂、水、试验室环境等的污染，因此每次测定必须随行至少2管空白实验。样品测定结果应扣除空白值后再行计算。若空白值过高，则测定结果不可信。（一般来说铅空白2ng/ml,砷空白0.5ng/ml,汞空白0.3ng/ml硝酸、高氯酸、盐酸、硫酸、磷酸二氢、硝酸镁铵应为优级纯，碘化钾、抗坏血酸等为分析纯水应为去离子水或石英蒸馏器蒸馏的超纯水，电阻率≥18.2MΩ，使用前应检查相关金属元素含量。工作对照国家一级标准物质杨树叶、西红柿叶、绿茶等等（杨树叶和西红柿叶现已卖完，绿茶标准物质还有在卖）可做为工作对照物质，每次可随行测定2管，检查方法的可靠性。随行回收：70％～120％加标回收每次测定重金属可加标回收2份：样品称样量减半，加铅、砷、汞标准溶液适量（适量指加标后样品消解稀释上机后测的加标的浓度在标准曲线中间）举例：样品称样0.5g→稀释至25ml加标称样0.25g+铅500ng→稀释至25ml样品浓度+铅20ng/ml（在曲线线性范围内）+砷250ng+砷10ng/ml（在曲线线性范围内）+汞100ng+汞4ng/ml（在曲线线性范围内）每次做重金属样品平行称2份+2份空白+工作对照物质2份或加标回收2份（工作对照物质或加标回收只要做1种即可）2标准曲线采用标准曲线法，即每次测定必需随行标准曲线标准物质采用单元素标准溶液（国家标准物质研究中心或中国计量科学研究院提供）制备标准贮备溶液，可长期保存使用方便（》1ppm，保存2～3个月）标准曲线应分别临用新配可以采用一次方程线性回归，但有时采用二次方程线性回归更为准确相关系数要求》0.995数据处理每个样品平行做2根管，每根管每个元素至少做2个点，一根管2个点之间RSD≤5%，一批样品之间2管测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的（石墨20%，原子荧光10%、冷原子吸收20%）。回收率待测物浓度RSD(%)平均回收率（%）待测物浓度RSD(%)平均回收率（%）100%1.398～10210ppm7.380～11010%1.898～1021ppm1180～1101%2.797～103100ppb1580～1100.1%3.795～10510ppb2160～115100ppm5.390～1071ppb3040～120添加浓度（mg/kg)平均回收率（%）RSD(%)＞170～11010＞0.1～≤170～11015＞0.01～≤0.170～11020＞0.001～≤0.0160～12030≤0.00150～12035检测限特别注意1.如果做海产品中的总砷，建议用微波消解+ICP-MS或湿法消解（≥220℃）+原子荧光分光光℃计，因为微波消解没法把有机砷完全转变为无机砷，但ICP-MS可以把有机和无机砷全打成砷离子。2.如果出现不合格样品时，铅的仲裁法为石墨炉法；砷的仲裁法为湿法消解+原子荧光；汞的仲裁法为微波消解+原子荧光。27举例样品A（测铅、砷、汞）：称样0号管、1号管0.5g样品，2号管、3号管加标回收管0.25g样品(+0.5ml1000ng/ml的铅溶液+2.5ml10ngng/ml的砷溶液+1ml100ng/ml的汞溶液），4号管、5号管空白管不加样品，称样完毕后所有消解罐内+8ml默克硝酸+1ml双氧水，放置于100°C电热板上预消解30min，放置冷却后进行微波消解，消解完等冷却至80°C左右取出，用少量超纯水清洗盖子和内壁，置于电热板上120°C赶酸大约14小时至0.5ml时取出转移定容至25ml容量瓶中后再转移至聚四氟乙烯小瓶中待测。ICP-MS上机测铅、砷、汞：样品液直接上机，配置0.5mol/L硝酸（又称2%硝酸，32ml默克硝酸→1000ml）1L，标准曲线用0.5mol/L硝酸稀释定容，定容好后就可以上机测量。（安捷伦7700）原子吸收上机测铅：样品液直接上机，配置0.5mol/L硝酸，标准曲线用0.5mol/L硝酸配置50ng/ml的曲线最高点，仪器自动稀释成2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、50.0ng/ml的标准曲线，0.5mol/L硝酸的硝酸做试剂空白，基体改进剂：1g磷酸二氢铵+0.2g硝酸镁→100ml水。（PEAA800）铅出峰时间在1～2s的时候为最好铅升温程序铬升温程序测汞仪测汞：样品液直接上机，还原剂:100ml盐酸+100g氯化亚锡，用水稀释至1000ml，载流：2ml盐酸→100ml水定容。标准曲线用2%盐酸稀释配置成0.0、0.3、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0的标准曲线。原子荧光测砷：精密吸取样品液5ml至10ml量瓶中，加入1ml的硫脲+抗坏血酸（10g硫脲+10g抗坏血酸+100ml水），用5%盐酸定容后放置半小时上机，室温25°C时最佳上机时间为0.5h～1h。还原剂：2.5g氢氧化钾+10g硼氢化钾+1000ml水。载流：5%盐酸。标准曲线配置的时候也要加入10%的硫脲+抗坏血酸（定容到50ml容量瓶加5ml，定容到100ml容量瓶加10ml），用5%盐酸定容原子荧光测汞：样品液直接上机，还原剂：0.5g氢氧化钾+10g硼氢化钾+1000ml水。载流：1%盐酸，标准曲线用1%盐酸定容。清洗重金属实验极易受污染，因此所使用的消解罐、烧杯、容量瓶、储液瓶、试管等一切接触样品、试液均需泡酸清洗，泡酸的过程：使用过或即将使用过的器皿先用自来水冲洗干净后放置于酸缸中,酸缸中液体是(1+1)硝酸，浸泡过夜，捞出后先用自来水冲干净酸后再用纯水冲洗3遍。之后放置于80°C烘箱烘干，储存。注意事项所用容量器皿应尽可能使用耐腐蚀的塑料器皿，以聚四氟乙烯材料制成的器皿为最好，玻璃器皿易吸附或吸收金属离子，因此仅适用于短时间