4药物定量分析与分析方法验证

第四章药物定量分析与分析方法验证§4.1定量分析样品的前处理方法概述含金属或卤素的药物，在分析前需要经过不同方法处理后，方可进行测定。处理方法因金属或卤素在分子中结合的牢固程度而异。一、含卤素有机药物的分析含卤素有机药物系指药物分子结构中所含卤素直接与芳环或脂肪链相连者，而不包括某些有机药物的卤酸盐或氢卤酸盐结构特点：C—X（一）卤原子的活泼性1.卤原子与碳原子直接相连，卤原子的活泼性和它直接相连的烃基的结构有很大关系（1）乙烯型卤和芳卤不活泼CH2CHXX（2）烯丙型卤和苄卤活泼CH2XCH2CHCH2X（3）卤代烷型介于两者之间CH2CH(CH2)nXn≥22.分子中所含卤原子的个数分子中所含卤原子的个数越多，活泼性越强，特别是同一碳上含多个卤原子或一个苯环上含多个卤原子时，活泼性增强更加明显3.卤素的种类I＞Br＞Cl＞F常见的含卤素有机药物CCH3OHCH3CCl3CCl3Cl3C三氯叔丁醇防腐药镇痛药六氯对二甲苯广谱驱虫药COOHIIINHCOCH3CH3CONH泛影酸X线造影剂COOHIIINHC(CH2)4OCNHOCOOHIII胆影酸X线造影剂COOHIIICONHCH3CH3CONH碘他拉酸X线造影剂IH2NIICH2CHCOOHC2H5碘番酸X线造影剂碘苯酯X线造影剂CHCH3(CH2)8COOCH2CH3I盐酸胺碘酮抗心律失常药OCH2CH2CH2CH3COOCH2CH2N(C2H5)2IIHClHNNFNC2H5OCOOH诺氟沙星广谱抗菌药OFFCH3HHOHCH3CCH2OCOCH3OOOCCH3CH3醋酸氟轻松肾上腺皮质激素类药，抗炎及抗过敏BrBrBrBrCCOOHOSO3NaSO3NaOH磺溴酞钠实验诊断用药（肝功能）（二）含卤素有机药物的分析XXC适当的处理直接回流后测定法碱性或酸性还原后测定法氧瓶燃烧分解后测定法1.直接回流后测定法本法是将含卤素有机药物溶于适当溶剂（如乙醇）中，加入氢氧化钠溶液（或一定量过量的硝酸银滴定液）后，加热回流使其水解，将有机结合的卤素转变为无机的卤素离子，然后采用银量法（Volhard法）测定。本法适用于含卤素有机药物结构中卤素原子结合不牢固的药物（如卤原子和脂肪碳原子相连者）。CCH3OHCH3CCl3原理三氯叔丁醇在NaOH溶液中加热回流水解，氯元素全部转变成NaCl，用剩余滴定法，即于水解液中加HNO3酸化，再加入定量过量的AgNO3滴定液，使Cl-生成AgCl沉淀，过量的AgNO3，以Fe3+为指示剂，用NH4SCN液回滴定。例：三氯叔丁醇的测定ChP（2005）CCl3C(CH3)2OH+4NaOH△回流(CH3)2CO+3NaCl+HCOONa+2H2ONaCl+AgNO3AgCl↓+NaNO3AgNO3+NH4SCNAgSCN↓+NH4NO3（淡棕红色）(Ksp=1.56×10–10)(Ksp=1.0×1012)Fe3++SCNˉFe(SCN)2+测定方法取本品约0.1g，精密称定，加乙醇5ml溶解后，加20%氢氧化钠溶液5ml，加热回流15min，放冷至室温，加水20ml与硝酸5ml，精密加硝酸银滴定液(0.1mol/L)30ml，再加邻苯二甲酸二丁酯5ml，密塞，强力振摇后，加硫酸铁铵指示液2ml，用硫氰酸铵滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当于6.216mg的C4H7Cl3O·1/2H2O。反应摩尔比为1∶3mlmg216.6Lg216.63molg47.186Lmol1.0ncMTT——滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数c——滴定液浓度，mol/LM——被测物的摩尔质量，g/moln——1mol样品消耗滴定液的摩尔数，常用反应摩尔比体现，即反应摩尔比为1∶n2.经氧化还原后测定法(1)碱性还原后测定卤素结合于芳环上时，由于分子中碘的结合较牢固，需在碱性溶液中加还原剂（如锌粉）回流，使碳-碘键断裂，形成无机碘化物后测定。(2)酸性还原后测定法两法均是将含卤素有机药物在碱性或酸性下，加还原剂（如锌粉）加热回流，药物产生还原裂解反应，使有机结合的卤素转变为无机的卤素离子，然后采用银量法（Fajans法）测定。本法适用于测定结构中碘与苯环直接相连，且一个苯环上含多个碘原子的含卤素有机药物。泛影酸（1）碱性还原后测定法例泛影酸的测定ChP(2005)取本品约0.4g，精密称定，加氢氧化钠溶液30ml与锌粉1.0g，加热回流30min，放冷，冷凝管用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水洗涤3次，每次15ml，洗液与滤液合并，加冰醋酸5ml与曙红钠指示液5滴，用硝酸银滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当于20.46mg的C11H9I3N2O4。COOHINHCOCH3IIH3COCHN+11NaOH+Zn回流△COONaNH2H2N+3NaI+2CH3COONa+2Na2ZnO2+H2OUSP(24)、BP（1998）ChP(2005)收载的胆影酸、碘番酸、胆影葡胺、泛影葡胺、碘他拉酸等均采用同法测定。碘番酸（2）酸性还原后测定法取本品的干燥品约0.4g，精密称定，加锌粉1g及冰醋酸10ml，加热回流30min，放冷，冷凝管用水30ml洗涤，用脱脂棉过滤，烧瓶与脱脂棉用水洗涤2次，每次20ml，洗液与滤液合并，加四溴酚酞乙酯指示液1ml，用硝酸银滴定液(0.1mol/L)滴定。终点时黄色沉淀变为绿色。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当于19.031mg的C11H12I3NO2。例碘番酸的测定JP(13)3.氧瓶燃烧分解后测定法（1）原理氧瓶燃烧法：将有机药物放入充满氧气的密闭燃烧瓶中进行燃烧，并将燃烧所产生的欲测物质吸收于适当的吸收液中，然后根据欲测物质的性质，采用适宜的分析方法进行鉴别、检查或含量测定NaClHClOClCNaOH2溶液点燃适用于含卤素、硫、氮、硒等有机药物的分析本法特点是简便、快速、破坏完全，尤其适用于微量样品的分析（2）仪器与材料①仪器装置燃烧瓶为500、1000或2000ml无色、磨口、厚壁、硬质玻璃锥型瓶；瓶塞空心，底部熔封铂丝一根，下端呈螺旋状或网状②称样用材料及称样A.固体样品无灰滤纸B.液体样品纸袋C.软膏类样品：将适量样品置不含被测成分的蜡油纸中包裹严密，外层再用无灰滤纸包裹氧瓶燃烧法装置与样品包装操作图④吸收液A.作用：吸收液的作用是将样品经燃烧分解所产生的各种价态的卤素、硫、氮、硒等，定量地吸收并转变为一定的便于测定的价态③氧气B.吸收液的选择氟水氯NaOH溶液溴H2O2-NaOHNaOH-硫酸肼饱和溶液碘NaOH－硫酸肼饱和溶液硫NaOH或H2O2硒硝酸溶液（3）操作方法①燃烧瓶燃烧前的准备用洗液洗净后，按各药品项下的规定加入吸收液，将瓶口用水湿润，小心急速地通入氧气1min，立即用表面皿覆盖瓶口。②样品的准备取样品适量，精密称定后按规定方法包裹，固定于铂丝下端的网内或螺旋处。③样品的燃烧点燃包有供试品的滤纸尾部，迅速放入燃烧瓶中，按紧瓶塞，加水少量封闭瓶口，俟燃烧完毕（应无黑色碎片），充分振摇，使生成的烟雾完全吸入吸收液中，放置15min，用水少量冲洗瓶塞及铂丝，合并洗液及吸收液，同法另做空白试验。然后按各药品项下规定的方法进行鉴别、检查或含量测定。①根据被燃烧分解的样品量选用适宜大小的燃烧瓶。（4）注意事项ChP（2005）规定的燃烧瓶体积为500、1000或2000ml三种，采用常量或半微量分析待分解样品量燃烧瓶的体积3~5mg（微量分析）150~250ml20~30mg（半微量分析）300~500ml50~60mg1000ml0.6~0.7g或更多2000ml或特殊结构的燃烧瓶正确选用燃烧瓶的目的在于：样品能在足够的氧气中燃烧分解完全；有利于将燃烧分解产物较快地吸收到吸收液中；防止爆炸的可能性。②测定含氟有机药物时，用石英制燃烧瓶③铂丝燃烧时起催化作用④应同时做空白试验⑤燃烧时要注意防爆⑥燃烧要完全⑦燃烧产生的烟雾完全被吸收（5）应用例磺溴酞钠的含量测定ChP(2005)BrBrBrBrCCOOHOSO3NaSO3NaOHBrBrBrBrOSOHHOSONaOOONaOOO燃烧分解O2HBr+Na2S+Na2SO4+…HBr+Na2SNaBr+Na2SO4+H2ONaOH，H2O2溴取本品约0.2g，照氧瓶燃烧法（附录ⅦC）进行有机破坏，选用1000ml燃烧瓶，以0.4%氢氧化钠溶液10ml，浓过氧化氢溶液0.5ml与水10ml作为吸收液，俟生成的烟雾完全吸入吸收液后，用水稀释至100ml，煮沸5分钟，放冷，加稀硝酸使成酸性，精密加硝酸银滴定液（0.1mol/l）20ml，摇匀，再加硫酸铁铵指示液2mL，用硫氰酸铵滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当于7.990mg的溴(Br)。例碘苯酯的含量测定ChP（2005）原理碘苯酯系有机碘化物，用氧瓶燃烧分解，转变为碘化物，继而氧化为游离的I2，并被定量地吸收于吸收液中，和NaOH反应，生成I-与IO3-，加入Br2-CH3COOH溶液，使全部转变为IO3-，过量的溴以HCOOH及通空气去除。加入KI，使与IO3-反应析出游离I2，用Na2S2O3液滴定，I2与淀粉结合所显的蓝色消失即为终点取本品约20mg，精密称定，照氧瓶燃烧法进行有机破坏，用氢氧化钠试液2ml与水l0ml为吸收液，待吸收完全后，加溴醋酸溶液(取醋酸钾10g，加冰醋酸适量使溶解，加溴0.4ml，再加冰醋酸使成1000m1)l0ml，密塞，振摇，放置数分钟，加甲酸约lml，用水洗涤瓶口，并通入空气流约3～5min以除去剩余的溴蒸气，加碘化钾2g，密塞，摇匀，用硫代硫酸钠滴定液(0.02mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的硫代硫酸钠滴定液(0.02mol/L)相当于1.388mg的C19H29IO2。滴定度的计算放大反应2mol碘苯酯→1molI21molI2→1molNaIO+1molNaI1molNaIO→1/3molNaIO3+2/3molNaI321molNaI+Br2→321molNaIO3即2mol碘苯酯→2molNaIO3I2molNaIO3+10I→6molI2即2mol碘苯酯→1molI2→6molI2→12molI→12molNa2S2O3反应摩尔比为1∶6mlmgncMT/388.1634.41602.098：140.氧瓶燃烧法中的装置有A.磨口硬质玻璃锥形瓶B.磨口软质玻璃锥形瓶C.铂丝D.铁丝E.铝丝96：133（99x：138）．选择氧瓶燃烧法所必备的实验物品A.磨口硬质玻璃锥形瓶B.铂丝C.普通滤纸D.氢气E.无灰滤纸99：76．氧瓶燃烧法测定含氯有机药物时所用的吸收液多数为A.H2O2溶液B.H2O2—NaOH溶液C.NaOH溶液D．硫酸肼饱和液E.NaOH—硫酸肼饱和液99：134.氧瓶燃烧法可用于A.含卤素有机药物的含量测定B.醚类药物的含量测定C.检查甾体激素类药物中的氟D.检查甾体激素类药物中的硒E.芳酸类药物的含量测定二、含金属有机药物的分析A.含金属的有机药物金属原子不与碳原子直接相连，通常为有机酸及酚的金属盐或配位化合物，其分子结构中的金属原子结合不够牢固如酒石酸锑钾、葡萄糖酸锑钠、富马酸亚铁CCHOCHOOOCOOSbSbOOCOOOCHOCHC2K+3H2O酒石酸锑钾抗血吸虫病药CCHCCOOOFeOMg(C17H35COO)2硬脂酸镁医药片剂的润滑剂和脱模剂富马酸亚铁抗贫血药CH2OHCHOHCHOCHOCHOCOO-SbOHOSbO-OCHCHCHCCHOOCH2-OOHOHONa3·9H2O葡萄糖酸锑钠抗寄生虫药，治疗黑热病B.有机金属药物金属原子直接与碳原子以共价键相连，结合比较牢