酵母菌的计数

完成实验酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？提出问题作出假设设计实验分析结果，得出结论变量如何控制？探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化该探究活动中涉及4个科学方法：（1）数学模型法；（2）抽样检测法；（3）显微观察法；（4）微生物培养法。♣酵母菌的计数（1）计数工具——血球计数板实物图正面图侧面图计数室滴液处♣酵母菌的计数（1）计数工具——血球计数板放大后的计数池•每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。•每个计数池分为9个大方格，其中中央的即为计数室，每个计数室的体积为0.1mm3。25个中格16个小格16个中格25个小格25X16=400小格16X25=400小格每个计数室（大方格）共有400小格，总容积为0.1mm3*********抽样检测：5×16=80个小格抽样检测：4×25=100个小格♣酵母菌的计数（2）计算：每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少？酵母细胞个数/mL=所数小方格中细胞总数x400x104x稀释倍数所数的小方格数例1:酵母菌的计数通常用血球计数板进行，血球计数板每个大方格容积为0.1mm3，由400个小方格组成。现对某一样液进行检测，如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先后再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有个。例2:在用血球计数板（2mm×2mm方格）对某一稀释50倍样品进行计数时，发现在一个计数室内（盖玻片下的培养液厚度为0.1mm）酵母菌平均数为16，据此估算10mL培养液中有酵母菌个。2x1072×108稀释例3检测员将1mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16＝400个小格组成，容纳液体的总体积为0．1mm3。现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e5个中格80个小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻个／mL。5n×105♣酵母菌的计数（3）计数的操作•稀释：将酵母菌培养液进行适当的稀释；若菌液不浓，可不必稀释。•镜检计数室：在加样前，先对计数板的计数室进行镜检,若有污物，则需清洗后才能进行计数。•加样品：在清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再用无菌细口滴管将稀释的酵母菌液由盖玻片边缘滴入一小滴（将计数室充满即可），让菌液沿缝隙自行渗入计数室。•注意不可有气泡产生。♣酵母菌的计数（3）计数的操作•显微计数：静止5分钟后，先用低倍镜（16×10）找到计数室所在的位置。然后根据血球计数板规格，每个计数室选取5个（或4个）中方格中的菌体进行计数。每个小方格内约有5-10个菌体为宜。对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。如要从两个计数室中计得的值来计算样品的含菌量。♣酵母菌的计数（4）血球计数板的清洗：•使用完毕后，将血球计数板在水龙头上用水柱冲洗，切勿用硬刷洗刷，洗完后自行晾干或用吹风机吹干。镜检，观察每个小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重复洗涤至干净为止。♣酵母菌的计数（5）注意事项：•进行计数前，应先将试管摇匀，目的是使酵母菌在培养液中混合均匀，以减少计数误差。•显微镜计数时，对于压在小方格界线上的酵母菌，应取相邻两边及顶角计数。•若一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清时，则可将培养液稀释一定倍数后再计数。•本实验无对照实验，酵母菌每天的数量变化可形成前后对照。•血球计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和冲洗的方法清洗。探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化♣酵母菌的计数（6）讨论：计数前还应有哪些步骤？需注意些什么？探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化酵母菌培养：♠培养液配制♠灭菌♠接种♠培养配制质量分数为5％的葡萄糖溶液（葡萄糖20g，1000mL水），分装到5个烧杯中（200mL/烧杯）用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计数时所用的滴管分别灭菌。贴标签。接种时要在酒精灯附近，用灭菌干净的1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母液，往每个烧杯中加入。（注意：滴加量不要太多，避免初始菌数过多。）将烧杯置于28℃的恒温箱中培养无菌操作♣结果分析（1）数据记录以汤麦式血球计数板的数据记录为例。下表为某一次的数据记录表，其中，A表示五个中方格的总菌数；B表示菌液稀释倍数：探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化各中格的总菌数AB二室平均数菌数/ml12345第一室第二室♣结果分析（1）数据记录下表为一周的数据记录表：探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化时间次数1234567123平均♣结果分析（2）构建数学模型：酵母菌种群个体数量变化0200400600800100012001234567时间／d酵母菌数量／万个·mL-1探究培养液中酵母菌种群大小的动态变化☺实验再探究♣温度、营养物质影响酵母菌的生长吗？某同学按下表完成了有关实验。试管编号培养液/mL无菌水/mL酵母菌母液/mL温度（℃）A10—0.128B10—0.15C—100.128温度、营养物质对酵母菌生长的影响试管编号培养液/mL无菌水/mL酵母菌母液/mL温度（℃）A10—0.128B10—0.15C—100.128