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检验科血型的鉴定1ABO血型系统2ABO血型的鉴定3TableofContents内容大纲RH血型系统45RH血型的鉴定常见疑难血型的鉴定血型鉴定在生活中的应用6ABO血型系统O型血O型血是人类最古老的血型出现于4万-6万年前A型血A型血产生于农耕时代出现于1.7万年-2.7万年前B型血B型血产生于游牧民族出现于公元前1.7万-1.2万年前AB型血AB型血出现不到1000年血型传说不具有AB凝集原同时具有AB凝集原只有B凝集原只有A凝集原凝集原ABO血型系统抗原ABO血型系统是根据红细胞表面所含的凝集原不同而命名的。凝集原:附着在红细胞表面的一种抗原。ABO血型系统抗体凝集素(抗体):存在于血清中,与其同名凝集原会发生抗原抗体反应,导致红细胞凝集。人血清中含有两类凝集素:即抗A和抗B。属于天然抗体,天然抗体多以IgM型为主,不能通过胎盘,而免疫性抗体多以IgG型为主,能通过胎盘。凝集素对血液中红细胞的影响ABO血型系统抗A凝集素抗B凝集素同时含有抗A和抗B凝集素不含有抗A和抗B凝集素B血型的血清中A血型的血清中AB血型的血清中O血型的血清中ABO血型系统抗原——遗传显性基因:控制显性性状的基因。隐性基因:控制隐性性状的基因。ABO血型系统的基因位点在第9对染色体上。人的ABO血型受控于A、B、O三个基因。其中A、B为显性基因,O为隐性基因。AB型ABO血型鉴定抗原——遗传O型B型A型思考:A、B、AB以及O型血的基因型分别是什么?ABBBAAAoBooo遗传规律ABO血型的鉴定实验方法:血凝试验(玻片法、试管法、全自动微板法),微柱凝胶试验,流式细胞技术,酶联免疫吸附试验。ABO血型的鉴定实验原理:血型抗原与相应的抗体在反应介质中形成免疫复合物,出现肉眼可见的凝集现象。ABO血型的鉴定实验用具:载玻片胶头滴管棉签酒精抗A、B标准血清一次性采血针ABO血型的鉴定准备载玻片1取一载玻片,左右两侧分别标记字母AB。采血3采血针轻刺手指尖,轻轻挤压伤口使血液流出,分别滴在载玻片的两侧。消毒常规消毒,用棉签沾取75%的酒精,对采血部位进行消毒。2滴标准血清在载玻片两侧相应的滴加抗A(蓝色)和抗B(橙色)血清后,用棉签棍将两侧血液与血清混匀,注意一定要换不同的棉签棍。4混匀观察5混均后,静置3-5分钟后,观察现象。实验过程:ABO血型的鉴定实验结果:RH血型系统人类血型目前发现有30多种,除了ABO血型系统外,还有Rh血型系统等。Rh血型系统根据有无D抗原分为Rh阳性和Rh阴性。RH血型系统抗原及抗体Rh血型系统抗原Rh血型系统能识别的抗原共43种,常见的抗原有五种,分别是D、C、E、c、e。以D抗原的抗原性最强,故常以其存在与否定为Rh阳性或阴性,即凡含D抗原者为Rh阳性,不含D抗原者为Rh阴性。Rh血型系统抗体天然Rh抗体很少,绝大多数Rh抗体由输血或妊娠刺激机体免疫系统产生的IgG型免疫性抗体。主要Rh血型系统抗体有抗D、抗E、抗C、抗c、抗e五种,其中抗D最为常见。在盐水介质试验系统中可检测出某些Rh抗体,表明这些Rh抗体具有IgM的性质可能来自免疫反应抗体形成早期。Rh血型的鉴定方法及原理酶介质法红细胞表面的唾液酸带负电荷,使用木瓜酶或菠萝酶破坏红细胞表面的唾液酸,降低红细胞表面的负电荷,减少细胞间的排斥力,促进Rh抗原与相应抗体间的结合从而产生红细胞凝集。聚凝胺试验聚凝胺是带高价阳离子的季铵盐,溶解后产生的正电荷中和红细胞表面的负电荷,减少细胞间的排斥力,有利于红细胞凝集。如果是由Rh抗体致敏的红细胞产生的凝集,是特异的不可逆凝集。非抗体致敏红细胞凝集则是可逆性凝集。盐水介质抗D试验采用免疫球蛋白变性剂处理人源IgG类抗D血清,使小分子的IgG抗体分子增大成为具有大分子的“IgM”的性质,能在盐水介质中与相应红细胞发生凝集,可用于Rh血型的快速鉴定。Rh血型的鉴定方法及原理抗球蛋白试验又称Coombs试验,是检测红细胞上不完全抗体的经典方法。不完全抗体多与其相应的红细胞结合,在盐水介质中不出现凝集反应,Coombs试验利用抗球蛋白抗体作为第2抗体,通过连接致敏红细胞表面的特异性Rh抗体,使致敏红细胞出现特异性凝集。低离子强度试验红细胞外围的阴离子是红细胞的稳定因素之一,降低反应介质的离子强度可减少细胞外围的阴离子,促进带正电荷的IgG型Rh抗体与红细胞结合发生凝集反应,从而增加红细胞的凝集强度。常见疑难血型定义:疑难血型是指一种血型难以鉴定或判定的现象。特点:正定型凝集弱于2+或反定型弱于1+(正常凝集3+~4+)正反定性不一致干扰因素:生理因素(年龄、ABO亚型、先天无抗体、冷凝集素)临床治疗(大量输液、近期输过异性红细胞或血浆)实验技术原因(标本混淆、试剂质量问题、静脉输液处采样)分类:红细胞抗原减弱或丢失(ABO亚型、白血病、输异性血、急性大出血)红细胞额外反应(自身抗体、红细胞未洗涤、红细胞上粘附大量蛋白)混合凝集(近期输异性血、造血干细胞移植)血型定型减弱或无反应(年龄、先天性ABO抗体缺失)常见疑难血型的鉴定分析思路(三步法)第一步:排除人为因素或在技术上可能发生的操作失误;重新采集血样,核对试剂、器材,规范地复检ABO血型第二步:了解临床资料,分析可能出现的原因;第三步:排除不可能的原因,归纳不能排除的原因,设计验证试验。举例说明红细胞抗原减弱或丢失(ABO亚型、正定型ABO抗原减弱)红细胞额外反应(自身抗体)常见疑难血型的鉴定ABO亚型实验结果:正定型与反定型不一致、正定型被检红细胞凝集弱解决方法:加抗-AB、抗-H、抗Bc常见疑难血型的鉴定正定型AB抗原减弱实验结果:正定型与反定型不一致、正定型被检红细胞凝集弱、正定型呈mf样解决方法:加抗-AB常见疑难血型的鉴定自身抗体实验结果:抗-A+,抗-B+,Ac+,Bc+,Oc+,直抗+解决办法:37℃盐水洗涤红细胞至直抗阴性后鉴定血型。血型鉴定的应用血型鉴定在生活中的应用输血器官移植新生儿溶血症
本文标题:血型的鉴定
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