血浆蛋白粉的质量评估

血浆蛋白粉质量评估上海格劳瑞国际贸易有限公司技术部血浆蛋白粉是一种富含免疫球蛋白等功能性的蛋白原料，应用已经超出普通蛋白饲料的应用范畴。对其质量评估，核心是评估其蛋白质变性与否、功能性成分IG含量以及是否含有其它搀杂物工艺条件、质量控制技术能力和管理控制是产品质量的决定性条件!前言感观镜检卫生指标常规指标检测功能性指标检测溶解度检测组份检测红线部分任何一项不达标均舍弃评估流程检查产品的颜色、流动性、气味、密度等检查产品中是否有杂质、焦粉等检测产品的粗蛋白、水份、灰份等营养成份检测产品的水溶性、透明度、沉淀物、悬浮物等检测产品的病原微生物、药物、重金属等指标定性定量检测产品的功能性成份检测产品的成份组成，以便剔除蛋白来源不纯的产品。APC血浆评估体系基本评估项目第二部分评估方法感观评估方法感观：检查颜色、性状、质地、气味、密度等将样品放置在白瓷盘内或白纸上，在非直射日光充足处，检查产品色泽、流动性、气味和密度。优质血浆蛋白粉颜色淡红色、灰白色、淡黄色气味固有的猪血腥味，无腐败变质气味性状、质地无定型粉状、无结块、无杂质，无黑色焦粒感观评估方法溶血感观评估方法镜检评估方法检查产品中是否有杂质、焦粉等。配备400倍、具有透射光源的生物显微镜；取少量样品于载玻片上并用盖玻片覆盖，并布满盖玻片覆盖范围。观察记数盖玻片覆盖范围内的杂质及焦粉。优质血浆蛋白粉在镜检时每片视野不得超过3个杂质及焦粉颗粒。相关链接1、蛋白质焦化变性，失去了原有的营养价值，使机体得不到应有的营养补充，2、可能转化为对机体细胞具有致突变性及致癌性的化合物。镜检评估方法镜检评估方法镜检评估方法镜检评估方法指标名称数值水份5%-8%粗蛋白76%-78%灰份6-8%盐份（以cl计）≤1.1%国产血浆数据AP920数据指标名称数值水份8%-10%粗蛋白70%-74%灰份12%-16%盐份（以cl计）≤4.0%常规指标评估方法溶解度评估方法水溶性：透明度、沉淀物、悬浮物表现为不溶评估核心蛋白质变性？称10g血浆粉配90ml水，置于100ml离心管中,震荡20分钟,静置8小时,观察沉淀物、悬浮物及溶液透明度。（可利用观察光源营造标准观察环境）优质血浆蛋白粉水溶性好，溶液透明度高,蛋白质变性少。感观评估方法溶解度(沉淀系数)的评估方法溶解度(沉淀系数)的评估方法溶解度的评估结果A样品：刚放入量筒中无沉淀液体,过30钟后上面有不溶物产生.过夜后溶解度为91%,B样品：刚放入量筒中就有很多点状不溶物,悬浊液,过2分钟后就有沉淀产生.过夜后溶解度为54%,凝胶状,沉淀为暗灰色.C样品：刚放入量筒中无沉淀液体,过30钟后上面有不溶物产生,过夜后溶解度为95%.D样品：刚放入量筒中就有很多点状不溶物,过夜后溶解度为56%,凝胶状,沉淀为暗灰色,且有黑色斑点.E样品：刚放入量筒中就有不溶物,过夜后溶解度为68%.溶解度的评估结果A、溶解度为91%.上层有少量液态不溶物B、溶解度为54%.上层有凝胶状不溶物C、溶解度为95%.上层有少量胶状不溶物D、溶解度为56%.上层有胶状不溶物E、溶解度为68%.上层有大量胶状不溶物样品常规指标标号生产商粗蛋白灰分水分溶解度1APC血浆78.28.488.9491.002北京××73.512.348.0454.003上海××78.610.125.2895.004上海××70.811.5911.6756.005武汉××71.824.6710.668.00溶解度的评估方法溶解度的评估方法样品常规指标标号生产商粗蛋白灰分水分溶解度1APC血浆77.98.488.9495.002上海××71.717.918.0496.003上海××70.411.736.9460.004武汉××73.611.5912.6352.005武汉××71.624.6713.360.006天津××69.826.746.9448.00凝胶实验1号:美国APC2号:北京XX3号:天津XX4号:武汉XX凝胶实验1号:美国APC2号:北京XX3号:天津XX4号:武汉XX功能成分评估方法－IgG“功能性”成分IgG的含量行业急需解决的问题--血浆中IgG的检测方法１、SDS电泳法２、HPLC法(高效液相色普法)３、免疫扩散法４、夹心ELISA法5、COBAS-MIRA全自动生化分析仪血浆来源IgG含量（%）AP92016.2武汉7.3天津8.05武汉华达12.82上海11.54１、关于SDS电泳利用蛋白质与SDS按重量比形成复合物，消除了不同蛋白质分子的电荷效应，使蛋白质分子的相对迁移率取决于分子量的大小，与标准蛋白质比较，推算未知蛋白质的分子量，或从已知蛋白质的分子量确定电泳条带。此法可对血浆蛋白粉中的IgG含量进行定性判定。IgG评估方法一2、HPLC法(高效液相色普法)在HPLC上，通过蛋白G柱对样品中的免疫球蛋白进行特异性吸附，再洗脱吸附的免疫球蛋白，比较样品洗脱峰面积与标准免疫球蛋白洗脱峰面积计算样品中的免疫球蛋白含量。此法为目前国标测定人保健食品中IgG含量的方法，测定血浆蛋白粉中的IgG含量同样适用。05080201v75:1_UV1_280nm05080201v75:1_Inject50010001500200025003000mAU0.00.20.40.60.8200.0210.0220.0230.0mlIgG评估方法二３、关于单向免疫扩散法IgG评估方法三利用琼脂凝胶为介质的一种沉淀反应，扩散作用使滴加的猪IgG与琼脂凝胶中的适合配比的兔抗猪IgG抗体或羊抗猪IgG抗体结合形成大分子抗原-抗体复合物而出现沉淀现象，形成沉淀环。此法可比较直观地反应血浆粉中IgG的活性，但不适宜定量检测。４、关于夹心ELISA法抗体的活性依赖于其天然结构的保持，抗体变性就丧失活性。利用双抗体夹心ELISA法可以测定血浆蛋白粉中抗体天然结构的保持情况，从而推断血浆蛋白粉中免疫球蛋白（抗体）的活性保持情况。此法可对活性免疫球蛋白进行定量。y=-0.9833x+2.8644R2=0.998900.511.522.50123OD平均值稀释倍数对数值IgG测定标准曲线猪标准血浆稀释度0，160，80，40，20，10，5，2.5千倍IgG评估方法四COBAS-MIRA全自动生化分析仪美国APC公司使用IgG评估方法五卫生指标评估方法检测方法1、定期送检病原微生物或药物残留指标。2、通过微量PCR检测牛羊等其他动物成份。3、定期送检违禁药品及重金属指标名称数值口蹄疫病毒-伪狂犬病毒-猪繁殖与呼吸综合征病毒-圆环病毒-附红细胞体-猪瘟病毒-牛羊成份未检出细菌总数符合国家饲料卫生标准沙门氏菌未检出铅1.82mg/kg砷1.01mg/kg盐酸克伦特罗-氨基酸分析评估方法ProductAP920ShanghaiJLWuhanNB水解皮革粉大豆分离蛋白天冬氨酸7.016.117.024.669.44苏氨酸4.423.144.690.642.89丝氨酸4.363.34.681.323.92谷氨酸11.5410.5410.359.914.5甘氨酸2.88.652.5719.444.28丙氨酸4.886.384.287.333.24胱氨酸2.721.662.380.940.88缬氨酸4.833.854.622.133.18蛋氨酸0.670.681.130.841异亮氨酸2.421.971.821.13.52亮氨酸8.366.577.912.696.08酪氨酸3.782.593.310.382.86苯丙氨酸4.253.393.771.564.42赖氨酸6.65.166.292.165.58组氨酸2.461.862.210.542.44精氨酸4.64.934.265.466.09晡氨酸5.187.924.0613.364.28总计81.879.4776.2574.4578.6第三部分注意事项优质血浆蛋白粉应该是：1、溶解后沉淀物少、不出现悬浮物,蛋白质变性少。2、IgG含量高（≥16）且稳定.3、不含有其它原料组分.优质血浆的基本评估1、血浆蛋白粉的颜色（具体变化规律请见下一页面）与工艺密切关联，为充分保证功能性成份的活性，不可能刻意追求产品颜色而改变针对保证功能性成份的活性而设计的生产工艺。2、科学判定因溶血所引起的血浆蛋白粉颜色的变化，通过测定铁含量来定量判断。影响血浆蛋白粉颜色的因素血浆铁含量的检测结果2008-1-9检测单位：上海市饲料质量监督检验站铁含量（ppm）APC血浆89.8武汉血浆121